熊去氧胆酸的纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种熊去氧胆酸的纯化方法，包括以下步骤：步骤1)将含有熊去氧胆酸的混合物溶解在四氢呋喃中，加入二异丙基乙基胺进行反应，制得含有熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐的溶液；步骤2)在0‑5℃下冷却所述的含有熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐的溶液使其结晶，之后分离得到熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐；步骤3)熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐的水解。本发明专利技术操作简单，试剂消耗量少，选择性高，得到的熊去氧胆酸的纯度高。

Purification of ursodeoxycholic acid

【技术实现步骤摘要】
熊去氧胆酸的纯化方法
本专利技术涉及精细化工领域，具体地涉及一种熊去氧胆酸的纯化方法。技术背景熊去氧胆酸(Ursodeoxycholicacid，UDCA)，又名3a,7β-二羟基-5β-胆甾烷-24-酸，是中药熊胆的有效成分之一，具有明目、清热、平肝等重要功效，几个世纪以来，熊去氧胆酸一直用于治疗肝胆疾病，尤其针对治疗胆固醇型胆结石有着独特的功效，并且能维持体内肠肝循环的动态平衡。至今为止，熊去氧胆酸是唯一由美国食品和药品管理局(FDA)批准的可用于治疗原发性胆汁性肝硬化的药物。鉴于熊去氧胆酸的重要性，其临床应用的需求不断增加。起初主要是从天然熊胆和熊胆汁中提取，但是活熊资源十分有限，且违反了动物保护法。目前，由于鹅去氧胆酸廉价易得，因此工业上主要通过它的氧化还原反应来制备熊去氧胆酸，在此反应过程中，除了产物熊去氧胆酸，还有中间体7-酮石胆酸(7K-LCA，3α-羟基-7-羰基-5β-胆烷酸)，以及副产物鹅去氧胆酸(Chenodeoxycholicacid，CDCA，3α,7α-二羟基-5β-胆烷-24-酸)。目前工业上主要采用有机溶剂选择性地从含有熊去氧胆酸的混合物中溶解除去鹅去氧胆酸等相关杂质。乙酸乙酯可以选择性地溶解鹅去氧胆酸，但是两种胆酸在乙酸乙酯中的溶解度都很小，需要使用大量的溶剂多次纯化才能使鹅去氧胆酸去除，耗能太大。在乙醇等有机溶剂中，两种胆酸的溶解度都很大，改变温度导致两者的溶解度差异不明显，无法结晶出来。美国专利(US4282161)曾报道了一种纯化熊去氧胆酸的方法，用甲醇处理粗品熊去氧胆酸，生成熊去氧胆酸甲酯后，再用乙酸乙酯结晶，然后用碱性碱皂化，生成熊去氧胆酸碱金属盐，最后酸化处理，得到纯品熊去氧胆酸，此专利技术包括酯化、皂化和水解三个过程，步骤较多，会导致生产周期延长并且产品损耗大，不适合工业生产。另有中国专利(CN106928306A)公开了通过三乙胺处理粗品熊去氧胆酸来纯化，主要缺点是难以达到三乙胺在药学上可以接受的限度。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术的存在的问题和不足，提供一种更加适宜工业生产、选择性好、得到的熊去氧胆酸纯度高的纯化熊去氧胆酸的方法。为了达到上述目的，本专利技术提供的熊去氧胆酸的纯化方法，其特征在于：包括以下步骤：1)将含有熊去氧胆酸(1)的混合物溶解于四氢呋喃中，在50-65℃下加入二异丙基乙基胺进行反应，制得含有熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐(2)的溶液，反应式如下：2)在0-5℃下冷却步骤1)中制得的含有熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐(2)的溶液，使其结晶，之后分离，过滤，干燥，得到熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐(2)；3)熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐的水解：将步骤2)中得到的熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐(2)悬浮在超纯水中，加入氢氧化钠水溶液，在25-30℃下将pH调节至12.0-12.5；经二氯甲烷萃取后，将水相投入反应瓶中，搅拌升温至45-50℃，滴加稀盐酸调节pH为2.0-2.5；将浆液冷却至20-25℃，过滤，收集滤饼并用超纯水洗涤，干燥，得到熊去氧胆酸纯品(3)，反应式如下：作为优选方案，所述步骤1)中的含有熊去氧胆酸(1)的混合物是经7-酮石胆酸还原得到的产物；所述四氢呋喃的加入量是熊去氧胆酸(1)混合物体积的10倍。进一步地，所述步骤2)和步骤3)中的干燥是指在55-60℃的温度下进行减压干燥；所述步骤3)中熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐(2)悬浮使用的超纯水是熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐(2)体积的20倍；所述氢氧化钠水溶液的质量分数为20％，稀盐酸的体积分数为5％；所述熊去氧胆酸纯品(3)的纯度高于99.5％。本专利技术的优点及有益效果如下：本专利技术纯化方法将经7-酮石胆酸还原得到的熊去氧胆酸进行了分离和纯化，试剂消耗量少，选择性好，操作简单，得到的熊去氧胆酸的纯度达到99.5％以上。熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐能够在有机溶剂中结晶析出，而其他组分在有机溶剂中的溶解度较大，不能析出，根据其溶解度差异从而实现了熊去氧胆酸的选择性分离和纯化。将所得到的熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐经过水解，重新生成熊去氧胆酸，经结晶抽滤分离后，干燥，即可得到高纯度的熊去氧胆酸。附图说明图1为本专利技术熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐的合成；图2为本专利技术熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐的水解。具体实施方式以下结合附图和具体实施例来对本专利技术作进一步地详细说明。实施例1将10g含有95％的熊去氧胆酸粗品溶解于100mL四氢呋喃中，搅拌升温至55℃，加入3.29g二异丙基乙基胺，并在65℃下反应1小时，然后将所得浆液冷却至0-5℃，结晶抽滤，用适量的四氢呋喃冲洗滤饼，在55-60℃下减压干燥，得到熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐13g。上述熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐悬浮在260mL超纯水中，加入20％的氢氧化钠水溶液，在25-30℃下将pH调节至12.0；然后溶液经二氯甲烷萃取后，投入反应瓶中，搅拌升温至45℃，滴加5％的稀盐酸调节pH为2.0，将浆液冷却至20℃，结晶，抽滤，超纯水冲洗残留的酸液，收集干燥，得到熊去氧胆酸纯品9.2g。实施例2将10g含有85％的熊去氧胆酸粗品溶解于100mL四氢呋喃中，搅拌升温至60℃，加入3.25g二异丙基乙基胺，并在65℃下反应40min，然后将所得浆液冷却至0-5℃，结晶抽滤，用适量的四氢呋喃冲洗滤饼，在55-60℃下减压干燥，得到熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐12.5g。上述熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐悬浮在250mL超纯水中，加入20％的氢氧化钠水溶液，在25-30℃下将pH调节至12.2；然后溶液经二氯甲烷萃取后，投入反应瓶中，搅拌升温至48℃，滴加5％的稀盐酸调节pH为2.4，将浆液冷却至25℃，结晶，抽滤，超纯水冲洗残留的酸液，收集干燥，得到熊去氧胆酸纯品8.9g。实施例3将10g含有80％的熊去氧胆酸粗品溶解于100mL四氢呋喃中，搅拌升温至50℃，加入3.3g二异丙基乙基胺，并在65℃下反应1.5小时，然后将所得浆液冷却至0-5℃，结晶抽滤，用适量的四氢呋喃冲洗滤饼，在55-60℃下减压干燥，得到熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐13.2g。上述熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐悬浮在250mL超纯水中，加入20％的氢氧化钠水溶液，在25-30℃下将pH调节至12.5；然后溶液经二氯甲烷萃取后，投入反应瓶中，搅拌升温至50℃，滴加5％的稀盐酸调节pH为2.5，将浆液冷却至22℃，结晶，抽滤，超纯水冲洗残留的酸液，收集干燥，得到熊去氧胆酸纯品8.7g。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种熊去氧胆酸的纯化方法，其特征在于：包括以下步骤：/n1)将含有熊去氧胆酸(1)的混合物溶解于四氢呋喃中，在50-65℃下加入二异丙基乙基胺进行反应，制得含有熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐(2)的溶液，反应式如下：/n

【技术特征摘要】
1.一种熊去氧胆酸的纯化方法，其特征在于：包括以下步骤：
1)将含有熊去氧胆酸(1)的混合物溶解于四氢呋喃中，在50-65℃下加入二异丙基乙基胺进行反应，制得含有熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐(2)的溶液，反应式如下：



2)在0-5℃下冷却步骤1)中制得的含有熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐(2)的溶液，使其结晶，之后分离，过滤，干燥，得到熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐(2)；
3)熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐的水解：
将步骤2)中得到的熊去氧胆酸二异丙基乙基铵盐(2)悬浮在超纯水中，加入氢氧化钠水溶液，在25-30℃下将pH调节至12.0-12.5；经二氯甲烷萃取后，将水相投入反应瓶中，搅拌升温至45-50℃，滴加稀盐酸调节pH为2.0-2.5；将浆液冷却至...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭鹏，郭梦芹，张艺铭，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42