一种杂交瘤细胞株及其用途制造技术

本发明专利技术涉及一种杂交瘤细胞株及其用途，具体涉及一种杂交瘤细胞株1C12/1G12及其用途。用杂交瘤技术制备分泌抗CD317单克隆抗体的杂交瘤细胞株1C12/1G12，其产生的抗CD317单克隆抗体1C12/1G12可以用于免疫印迹，流式细胞技术、免疫组化和ELISA。

A hybridoma cell line and its application

【技术实现步骤摘要】
一种杂交瘤细胞株及其用途
本专利技术涉及免疫学领域，具体涉及一种杂交瘤细胞株1C12/1G12及其用途。用杂交瘤技术制备分泌抗CD317单克隆抗体的杂交瘤细胞株1C12/1G12，其产生的抗CD317单克隆抗体1C12/1G12可以用于免疫印迹，流式细胞技术、免疫组化和ELISA。
技术介绍
CD317，即分化抗原簇317(ClusterofDifferentiation317)，又叫骨髓基质细胞抗原2(BoneMarrowStromalCellAntigen2)、Tetherin或HM1.24，是1994年通过单克隆抗体发现的终末分化B细胞表面标志蛋白，可能在B细胞的发育过程中发挥重要作用。因其在多发性骨髓瘤细胞中高表达，被肿瘤免疫学家当作骨髓瘤免疫疗法的靶向抗原，随之开展诸多靶向治疗相关的研究。期间发现CD317除了表达在骨髓基质细胞、成熟B细胞以及骨髓瘤细胞表面之外，在肺癌、乳腺癌等多种癌细胞中高表达。2008年首次被鉴定为干扰素诱导型宿主抗病毒因子，此后越来越多的科学家加入到该领域的探索中。经过近十年的研究，目前已经阐述了CD317结构、抗病毒及免疫特性等问题，也陆续发现了一些诸如参与肿瘤进展、束缚外泌体释放等新功能，研究热度不减当年。作为生物学研究领域应用最广泛的工具，抗体产品的地位毋庸置疑。而抗体的特异性和应用范围长久以来困扰着抗体产业，也是整个生物学研究领域的极大危机。抗体产品糟糕的质量会直接导致实验结果的误差，以及研究结果无法被重复和再现。研究项目的进展往往会因为抗体带来的问题停滞不前，由此造成的损失也是惊人的。据2011年的数据统计，仅在美国，平均每年就有3.5亿美元被浪费在这些无效抗体上。而在世界范围内，每年竟有8亿美元被浪费，占到了全球科研抗体总开销的50％。
技术实现思路
本技术制备的抗CD317单克隆抗体特异性靶向结合人和鼠细胞的CD317分子，可以应用于免疫印迹，流式细胞技术、免疫组化和ELISA等实验，是研究CD317功能的有力工具。本专利技术一个方面，提供了一种分离的特异性结合CD317的单克隆抗体或其抗原结合部分，所述单克隆抗体或其抗原结合部分由保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，具有保藏号CCTCCNO：C2019156的杂交瘤细胞系1C12/1G12产生。本专利技术另一个方面提供一种杂交瘤细胞系，其保藏信息为中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号CCTCCNO：C2019156。本专利技术另一个方面提供了一种组合物，包含前述的单克隆抗体或抗原结合部分。本专利技术再一个方面提供了本专利技术所述的分离的抗CD317单克隆抗体或或其抗原结合部分在检测CD317在样品中的存在或其表达水平的用途，或者用于制备试剂盒或检测试剂的用途，所述试剂盒或检测试剂用于检测CD317在样品中的存在或其表达水平。在本专利技术的技术方案中，所述样品包括但不限于，血液样品、组织样品和细胞样品。在本专利技术的技术方案中，所述抗体或其抗原结合部分还可包括可检测的标记。在本专利技术的技术方案中，检测CD317在样品中的存在或其表达水平的方法包括ELISA检测方法、Westernblot检测方法、流式细胞检测方法、免疫组化检测方法。在本专利技术的技术方案中，所述试剂盒包括ELISA检测试剂盒或Westernblot检测试剂盒，所述检测试剂包括流式细胞检测试剂、免疫组化检测试剂。本专利技术再一个方面提供了本专利技术所述的分离的抗CD317单克隆抗体或其抗原结合部分在ELISA检测中的应用。本专利技术再一个方面提供了本专利技术所述的分离的抗CD317单克隆抗体或其抗原结合部分在Westernblot检测中的应用。本专利技术再一个方面提供了本专利技术所述的分离的抗CD317单克隆抗体或其抗原结合部分在流式细胞检测中的应用。本专利技术再一个方面提供了本专利技术所述的分离的抗CD317单克隆抗体或其抗原结合部分在免疫组化检测中的应用。本专利技术再一个方面提供了ELISA检测试剂盒，其包括本专利技术所述的分离的抗CD317单克隆抗体或与或其抗原结合部分。优选地，所述抗体或其抗原结合部分还可包括可检测的标记。所述试剂盒还可包含第二抗体，其特异性识别所述抗体或其抗原结合部分；所述第二抗体结合部分还可包括可检测的标记。本专利技术再一个方面提供Westernblot检测试剂盒，其包括本专利技术所述的分离的抗CD317单克隆抗体或其抗原结合部分。优选地，所述抗体或其抗原结合部分还可包括可检测的标记。所述试剂盒还可包含第二抗体，其特异性识别所述抗体或其抗原结合部分；所述第二抗体结合部分还可包括可检测的标记。本专利技术再一个方面提供了流式细胞检测试剂，其包括本专利技术所述的分离的抗CD317单克隆抗体或其抗原结合部分。优选地，所述抗体或其抗原结合部分还可包括可检测的标记。所述细胞检测试剂还可包含第二抗体，其特异性识别所述抗体或其抗原结合部分；所述第二抗体结合部分还可包括可检测的标记。本专利技术再一个方面提供了免疫组化检测试剂，其包括本专利技术所述的分离的抗CD317单克隆抗体或其抗原结合部分。优选地，所述抗体或其抗原结合部分还可包括可检测的标记。所述细胞检测试剂还可包含第二抗体，其特异性识别所述抗体或其抗原结合部分；所述第二抗体结合部分还可包括可检测的标记。在本专利技术中，术语抗体的“抗原结合部分”是指全长抗体的一个或多个部分，所述部分保持结合抗体所结合的相同抗原(例如，CD317)的能力，与完整抗体竞争对抗原的特异性结合。通常参见，FundamentalImmunology，Ch.7(Paul，W.，ed.，第2版，RavenPress，N.Y.(1989)，其以其全文通过引用合并入本文，用于所有目的。可通过重组DNA技术或通过完整抗体的酶促或化学断裂产生抗原结合部分。在一些情况下，抗原结合部分包括Fab、Fab′、F(ab′)2、Fd、Fv、dAb和互补决定区(CDR)片段、单链抗体(例如，scFv)、嵌合抗体、双抗体(diabody)和这样的多肽，其包含足以赋予多肽特异性抗原结合能力的抗体的至少一部分。在一些情况下，抗体的抗原结合部分是单链抗体(例如，scFv)，其中VL和VH结构域通过使其能够产生为单个多肽链的连接体配对形成单价分子(参见，例如，Bird等人，Science242：423-426(1988)和Huston等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA85：5879-5883(1988))。此类scFv分子可具有一般结构：NH2-VL-接头-VH-COOH或NH2-VH-接头-VL-COOH。合适的现有技术接头由重复的GGGGS氨基酸序列或其变体组成。例如，可使用具有氨基酸序列(GGGGS)4的接头，但也可使用其变体(Holliger等人(1993)，Proc.Natl.Acad.Sci.USA90：6444-6448)。可用于本专利技术的其它接头包括由Alfthan等人(1995)，ProteinEng.8：725-731，Choi等人(2001)，Eur.J.Im本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离的特异性结合CD317的单克隆抗体或其抗原结合部分，所述单克隆抗体或其抗原结合部分由保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，具有保藏号CCTCC NO：C2019156的杂交瘤细胞系1C12/1G12产生。/n

【技术特征摘要】
1.一种分离的特异性结合CD317的单克隆抗体或其抗原结合部分，所述单克隆抗体或其抗原结合部分由保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，具有保藏号CCTCCNO：C2019156的杂交瘤细胞系1C12/1G12产生。


2.一种杂交瘤细胞系，其保藏信息为中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号CCTCCNO：C2019156。


3.一种组合物，包含权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合部分。


4.权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合部分在检测CD317在样品中的存在或其表达水平的用途，或者用于制备试剂盒或检测试剂的用途，所述试剂盒或检测试剂用于检测CD317在样品中的存在或其表达水平。


5.根据权利要求4所述的用途，检测CD317在样品中的存在或其表达水平的方法包括ELISA检测方法、Westernblot检测方法、流式细胞检测方法、免疫组化检测方法。


6.根据权利要求4所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：万晓春，李俊鑫，
申请(专利权)人：中国科学院深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：广东;44