抑制CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质在抑制RSV复制中的应用制造技术

本发明专利技术公开了抑制CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质在抑制RSV复制中的应用。抑制CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质由SEQ ID NO：4所示单链核酸分子和SEQ ID NO：5所示单链核酸分子组成。RSV感染细胞或小鼠后，CWF19L1蛋白的含量显著下降；敲降CWF19L1蛋白能够抑制RSV复制，同时提高感染细胞存活率；CWF19L1蛋白还可以抑制IL‑8的分泌。此外，还发现过表达CWF19L1能够诱导自噬小体产生。由此可见，CWF19L1蛋白参与RSV复制、炎症与自噬相关的过程，抑制CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质可以预防和/或治疗由RSV引起的疾病。本发明专利技术具有重要的应用价值。

Application of substances inhibiting the activity and / or expression of cwf19l1 protein in inhibiting RSV replication

【技术实现步骤摘要】
抑制CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质在抑制RSV复制中的应用
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及抑制CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质在抑制RSV复制中的应用。
技术介绍
呼吸道合胞病毒(respiratorysyncytialvirus，RSV)是全球新生儿与老年人最为常见的呼吸道疾病病原之一。70％以上的RSV患儿是5岁以下的儿童，其中10％因下呼吸道感染(LRTI)而入院治疗。自上世纪60年代，全球科学家不遗余力的研制RSV疫苗，遗憾的是市场上至今没有认证的预防疫苗。由此，WHO要求世界各国做好防控RSV的工作。RSV致病机制对于其预防疫苗及治疗药物的设计至关重要。迄今为止，RSV感染致病研究主要集中在RSV免疫逃逸机制、宿主免疫损伤及炎症效应。感染初期，RSV(NS1、NS2、G)可阻碍TLR信号通路，抑制IFN-Ⅰ型应答，避免天然免疫的抗病毒攻击，完成自我复制，传播至下呼吸道诱发肺部疾病。同时，大量RSV聚集活化TLRs、RIG-Ⅰ，诱导促炎基因表达，产生大量的IL-2、IL-6、TNF-α、CCL2、CCL3、IP-10等招募激活免疫细胞，侵入肺组织，造成肺部炎症反应导致损伤。现有研究表明RSV感染导致的细胞死亡与其致病机制密切相关。RSV致病过程复杂，影响因素众多，亟需深入探究。
技术实现思路
本专利技术的目的是制备RSV疫苗或治疗由RSV引起的疾病。本专利技术首先保护抑制CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质的应用，可为K1)或K2)或K3)：K1)制备产品；所述产品的功能可为C1)至C7)中的至少一种：C1)预防由RSV引起的疾病；C2)治疗由RSV引起的疾病；C3)抑制RSV复制；C4)提高感染RSV的宿主的细胞活力；C5)促进感染RSV的宿主分泌炎症因子IL-8；C6)降低感染RSV的宿主的自噬小体的生成；C7)降低感染RSV的宿主的自噬；K2)开发或筛选试剂；所述试剂的用途为C1)至C7)中的至少一种；K3)制备RSV疫苗。本专利技术还保护将CWF19L1蛋白作为药物靶点的物质的应用，可为K1)或K2)或K3)：K1)制备产品；所述产品的功能可为C1)至C7)中的至少一种：C1)预防由RSV引起的疾病；C2)治疗由RSV引起的疾病；C3)抑制RSV复制；C4)提高感染RSV的宿主的细胞活力；C5)促进感染RSV的宿主分泌炎症因子IL-8；C6)降低感染RSV的宿主的自噬小体的生成；C7)降低感染RSV的宿主的自噬；K2)开发或筛选试剂；所述试剂的用途为C1)至C7)中的至少一种；K3)制备RSV疫苗。本专利技术还保护CWF19L1蛋白或“提高CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质”的应用，可为如下D3)至D7)中的至少一种：D3)促进RSV复制；D4)降低感染RSV的宿主的细胞活力；D5)抑制感染RSV的宿主分泌炎症因子IL-8；D6)促进感染RSV的宿主的自噬小体的生成；D7)增加感染RSV的宿主的自噬。本专利技术还保护CWF19L1蛋白或“提高CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质”在制备RSV感染模型中的应用。本专利技术还保护产品甲，其可含有抑制CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质；所述产品甲的用途可为C1)至C7)中的至少一种：C1)预防由RSV引起的疾病；C2)治疗由RSV引起的疾病；C3)抑制RSV复制；C4)提高感染RSV的宿主的细胞活力；C5)促进感染RSV的宿主分泌炎症因子IL-8；C6)降低感染RSV的宿主的自噬小体的生成；C7)降低感染RSV的宿主的自噬。本专利技术还保护产品乙，其可含有CWF19L1蛋白或“提高CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质”；所述产品乙的用途可为如下D3)至D7)中的至少一种：D3)促进RSV复制；D4)降低感染RSV的宿主的细胞活力；D5)抑制感染RSV的宿主分泌炎症因子IL-8；D6)促进感染RSV的宿主的自噬小体的生成；D7)增加感染RSV的宿主的自噬。上述任一所述“抑制CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质”为寡聚核酸siRNA-CWF19L1；所述寡聚核酸siRNA-CWF19L1可由SEQIDNO：4所示单链核酸分子和SEQIDNO：5所示单链核酸分子组成。上述任一所述宿主可为肿瘤细胞或动物。所述肿瘤细胞具体可为肺癌细胞。所述肺癌细胞具体可为A549细胞。所述动物可为哺乳动物。所述哺乳动物可为小鼠。所述小鼠可为C57BL/6小鼠。本专利技术还保护S1)、S2)、S3)、S4)或S5)。S1)一种抑制RSV复制的方法，为降低宿主中CWF19L1蛋白活性和/或表达量。S2)一种提高感染RSV的宿主的细胞活力的方法，为降低宿主中CWF19L1蛋白活性和/或表达量。S3)一种促进感染RSV的宿主分泌炎症因子IL-8的方法，为降低宿主中CWF19L1蛋白活性和/或表达量。S4)一种降低感染RSV的宿主的自噬小体的生成的方法，为降低宿主中CWF19L1蛋白活性和/或表达量。S5)一种降低感染RSV的宿主的自噬能力的方法，为降低宿主中CWF19L1蛋白活性和/或表达量。上述任一所述的方法中，所述“降低宿主中CWF19L1蛋白活性和/或表达量”可为向宿主导入所述抑制CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质。上述任一所述的方法中，所述“抑制CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质”为寡聚核酸siRNA-CWF19L1；所述寡聚核酸siRNA-CWF19L1可由SEQIDNO：4所示单链核酸分子和SEQIDNO：5所示单链核酸分子组成。上述任一所述的方法中，所述宿主可为肿瘤细胞或动物。所述肿瘤细胞具体可为肺癌细胞。所述肺癌细胞具体可为A549细胞。所述动物可为哺乳动物。所述哺乳动物可为小鼠。所述小鼠可为C57BL/6小鼠。上述任一所述的方法中，所述“向A549细胞导入寡聚核酸siRNA-CWF19L1”的方法具体可为：(1)将A549细胞铺板，培养8-16h(如8-12h、12-16h、8h、12h或16h)；(2)加入寡聚核酸siRNA-CWF19L1，采用转染试剂(如jetPRIMETransfectionReagent)转染20-30h。(1)中A549细胞和(2)中寡聚核酸siRNA-CWF19L1的比例具体可为3×104个A549细胞：5.3μL浓度为50nmol的寡聚核酸siRNA-CWF19L1。上述任一所述RSV感染模型中RSV的含量提高。上述任一所述RSV具体可为RSVA2株。上述任一所述CWF19L1蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：2所示。上述任一所述编码CWF19L1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.抑制CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质的应用，为K1)或K2)或K3)：/nK1)制备产品；所述产品的功能为C1)至C7)中的至少一种：/nC1)预防由RSV引起的疾病；/nC2)治疗由RSV引起的疾病；/nC3)抑制RSV复制；/nC4)提高感染RSV的宿主的细胞活力；/nC5)促进感染RSV的宿主分泌炎症因子IL-8；/nC6)降低感染RSV的宿主的自噬小体的生成；/nC7)降低感染RSV的宿主的自噬；/nK2)开发或筛选试剂；所述试剂的用途为C1)至C7)中的至少一种；/nK3)制备RSV疫苗。/n

【技术特征摘要】
1.抑制CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质的应用，为K1)或K2)或K3)：
K1)制备产品；所述产品的功能为C1)至C7)中的至少一种：
C1)预防由RSV引起的疾病；
C2)治疗由RSV引起的疾病；
C3)抑制RSV复制；
C4)提高感染RSV的宿主的细胞活力；
C5)促进感染RSV的宿主分泌炎症因子IL-8；
C6)降低感染RSV的宿主的自噬小体的生成；
C7)降低感染RSV的宿主的自噬；
K2)开发或筛选试剂；所述试剂的用途为C1)至C7)中的至少一种；
K3)制备RSV疫苗。


2.将CWF19L1蛋白作为药物靶点的物质的应用，为K1)或K2)或K3)：
K1)制备产品；所述产品的功能为C1)至C7)中的至少一种：
C1)预防由RSV引起的疾病；
C2)治疗由RSV引起的疾病；
C3)抑制RSV复制；
C4)提高感染RSV的宿主的细胞活力；
C5)促进感染RSV的宿主分泌炎症因子IL-8；
C6)降低感染RSV的宿主的自噬小体的生成；
C7)降低感染RSV的宿主的自噬；
K2)开发或筛选试剂；所述试剂的用途为C1)至C7)中的至少一种；
K3)制备RSV疫苗。


3.CWF19L1蛋白或“提高CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质”的应用，为如下D3)至D7)中的至少一种：
D3)促进RSV复制；
D4)降低感染RSV的宿主的细胞活力；
D5)抑制感染RSV的宿主分泌炎症因子IL-8；
D6)促进感染RSV的宿主的自噬小体的生成；
D7)增加感染RSV的宿主的自噬。


4.CWF19L1蛋白或“提高CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质”在制备RSV感染模型中的应用。


5.产品甲，其含有抑制CWF19L1蛋白活性和/或表达量的物质；所述产品甲的用途为C1)至C7)中的至少一种：
C1)预防由RSV引起的疾病；
C2)治疗由RSV引起的疾病；
C3)抑制RS...

【专利技术属性】
技术研发人员：谷宏婧，杨晓岚，王希良，赵忠鹏，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：北京;11