一种临床级树突状细胞冻存液制造技术

本发明专利技术公开了一种临床级树突状细胞冻存液。本发明专利技术的细胞冻存液包括氨基酸组分、pH缓冲体系、白蛋白、渗透性保护剂和非渗透性保护剂。本发明专利技术的细胞冻存液用白蛋白代替了传统的牛血清，成分清晰，不含对人体有害且不可用于临床的物质，并降低了DMSO含量，导致本发明专利技术的细胞冻存液与传统冻存液相比，大大提高了细胞冻存效率。

A clinical dendritic cell cryopreservation solution

【技术实现步骤摘要】
一种临床级树突状细胞冻存液
本专利技术属于生物学领域，涉及一种细胞冻存液，具体涉及一种临床级树突状细胞冻存液。
技术介绍
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一，其目的是在低温环境下减缓细胞的代谢活动并维持生命。在细胞悬液的冷冻过程中，冰晶的形成是导致细胞死亡的主要原因之一。影响细胞冻存的主要因素包括细胞冻存液和冻存速率。细胞冻存液作为细胞冻存时必须使用的一种溶液，其作用是将需要冻存的细胞悬浮，并供给细胞生命代谢所需的营养物质，同时防止或减少冷冻冰晶对细胞的损伤。冻存速率对细胞存活率的影响有两种，一种是慢速冻存下的损伤，由于细胞脱水和细胞外培养基浓度过高所致；一种是快速冻存下的损伤，细胞死亡和冰晶的形成有较大相关性，不同的细胞所需的冻存速率不同。在现有技术中冻存细胞常使用血清与DMSO混合的方法。传统方法具有以下缺陷：(1)DMSO用量为10％，过低的DMSO浓度会导致冻存效果欠佳，但高浓度的DMSO有较大毒性，会对细胞体造成伤害；(2)传统冻存液配方中使用血清，因动物个体不同，血清产地、批号不同，每批质量差异甚大，其成分不能本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞冻存液，其特征在于，所述细胞冻存液包括以下组分：白蛋白、氨基酸、pH缓冲体系、渗透性保护剂、非渗透性保护剂。/n

【技术特征摘要】
1.一种细胞冻存液，其特征在于，所述细胞冻存液包括以下组分：白蛋白、氨基酸、pH缓冲体系、渗透性保护剂、非渗透性保护剂。


2.根据权利要求1所述的细胞冻存液，其特征在于，白蛋白是重组人血白蛋白；优选地，重组人血白蛋白浓度为0.07g/mL。


3.根据权利要求1所述的细胞冻存液，其特征在于，氨基酸包括甘氨酸、脯氨酸、天门冬氨酸、丙氨酰-谷氨酰胺；优选地，甘氨酸浓度为1*10-4g/mL、脯氨酸浓度为1.2*10-4g/mL、天门冬氨酸浓度为1.2*10-4g/mL、丙氨酰-谷氨酰胺浓度为1*10-4g/mL。


4.根据权利要求1所述的细胞冻存液，其特征在于，非渗透性保护剂包括蔗糖、海藻糖、右旋糖酐、羟乙基淀粉、聚乙烯吡咯烷酮；优选地，非渗透性保护剂是蔗糖、海藻糖、右旋糖酐；更优选地，蔗糖浓度为12*10-3g/mL、海藻糖浓度为2*10-3g/mL、右旋糖酐浓度为2*10-2g/mL。


5.根据权利要求1所述的细胞冻存液，其特征在于，pH缓冲体系包括氯化钠、氯化钾、氯化钙、硫酸镁、碳酸氢钠、HEPES；优选地，氯化钠浓度为5*10-3g/mL、氯化钾浓度为4*10-4g/mL、氯化钙浓度为4*10-4g/mL、硫酸镁浓度为4*10-5g/mL、碳酸氢钠浓度为4*10-4g/mL、HEPES浓度为5*10-3g/mL。


6.根据权利要求1所述的细胞冻存液，其特征在于，渗透性保护剂包括DMSO、二甲基亚砜、甘油、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇；优选地，渗透性保护剂是DMSO；更优选地，DMSO含量为5％。


7.权利要求1-6任一项所述的细胞冻存液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：取细胞冻存液组分，根据其各自溶解特性分类溶解，然后混合，加入水使得各组分终浓度如权利要求1所述；
优选地，所述制备方法包括如下步骤：
(1)分别配制pH缓冲体系储液、氨基酸储液、非渗透性保护剂储液；
(2)取适量pH缓冲体系储液、氨基酸储液、非渗透性保护剂储液加入适量渗透性保护剂、重组人血白蛋白，混匀；
更优选地，所述制备方法包括如下步骤：
(1)分别配制pH缓冲体系储液、氨基酸储液、非...

【专利技术属性】
技术研发人员：马艳玲，李若鲲，程旭东，
申请(专利权)人：中生康元生物科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11