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基于回文分子信标检测ATP的生物传感器及其制备方法和应用技术

技术编号:22913123 阅读:32 留言:0更新日期:2019-12-24 21:40
本发明专利技术涉及生物传感器技术领域,特别涉及基于回文分子信标检测三磷酸腺苷(ATP)的生物传感器,包括回文分子信标MB、ATP适配体(劈开的适配体探针AP1、AP2)、目标物ATP、Bst DNA聚合酶、UDG、核酸内切酶IV和缓冲液;基于核酸适配体与目标物的特异性识别,从而使两个劈开的适配体片段尾部序列邻近,将回文分子信标MB的发夹结构打开产生荧光,与此同时预锁定的回文序列被释放,进行分子间的杂交,从而触发自发聚合、修复、内切、循环过程,实现荧光信号的放大,从而构建了适体生物传感器,该传感器反应只需要一步,因此具有检测速度快,操作简便,价格低廉,检测限低,特异性高等优点。

Biosensor for ATP detection based on palindrome molecular beacon and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
基于回文分子信标检测ATP的生物传感器及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物传感器
,特别涉及基于回文分子信标检测ATP的生物传感器,还涉及其制备方法和应用。
技术介绍
三磷酸腺苷(ATP)存在于从微生物到高等动植物所有的生物体中,是细胞的主要能量来源,在细胞内新陈代谢、合成和生物化学过程中起着重要作用。ATP在体内含量并不高,在细胞中摩尔浓度通常为1-10mM,死亡的细胞将不能检测到ATP,癌细胞的ATP代谢特别活跃。通常,异常的ATP浓度与许多疾病密切相关,如低血糖、心血管病、帕金森、组织缺氧等。因此,迅速而准确地测定ATP,对于研究细胞乃至机体的生理活性和代谢过程、进行药物敏感实验以及相关的疾病分析具有非常重要的意义。目前,常用的ATP检测方法包括质谱,高效液相色谱等,这些方法往往存在工序繁琐、分析周期长、设备昂贵、检测费用高等问题,远远不能满足ATP检测方便、快捷、灵敏度等方面的要求。因此,急需建立一种快速、准确、简便且特异性高的ATP检测方法。近几年,DNA生物传感检测技术凭借其高灵敏性和特异性得到广泛的关注。其本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测三磷酸腺苷ATP的生物传感器,其特征在于,包括回文分子信标MB、ATP适配体AP1、ATP适配体AP2、目标物ATP、Bst DNA聚合酶、UDG、dNTPs、核酸内切酶IV和缓冲液;/n所述的dNTPs包括dATP、dGTP、dCTP和dUTP;/n所述的AP1碱基序列如SEQ No.1所示;/n所述的AP2碱基序列如SEQ No.2所示;/n所述的MB碱基序列如SEQ No.3所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测三磷酸腺苷ATP的生物传感器,其特征在于,包括回文分子信标MB、ATP适配体AP1、ATP适配体AP2、目标物ATP、BstDNA聚合酶、UDG、dNTPs、核酸内切酶IV和缓冲液;
所述的dNTPs包括dATP、dGTP、dCTP和dUTP;
所述的AP1碱基序列如SEQNo.1所示;
所述的AP2碱基序列如SEQNo.2所示;
所述的MB碱基序列如SEQNo.3所示。


2.权利要求1所述的生物传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)均相反应:将ATP、缓冲液、AP1、AP2、MB、BstDNA聚合酶、UDG、dNTPs、核酸内切酶IV,混和均匀后孵育...

【专利技术属性】
技术研发人员:王玉李莎莎刘素黄加栋徐艺城张儒峰赵一菡瞿晓南孙文玉王业茹
申请(专利权)人:济南大学
类型:发明
国别省市:山东;37

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