一种含再生因子的冻干制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开一种含再生因子的冻干制剂及其制备方法和应用。所述含再生因子的冻干制剂包括第一冻干制剂和第二冻干制剂；第一冻干制剂包括激活后的富血小板血浆和激活剂的混合物被冻干后得到的冻干产物；第二冻干制剂包括贫血小板血浆被冻干后得到的冻干产物，冻干制剂包含独立冻干的被激活的血小板血浆和贫血小板血浆，更好的保全了血浆中的功能因子和营养物质，避免了激活剂提前激活血浆中的纤维蛋白原。本发明专利技术还提供了所述冻干制剂的制备方法，该制备方法工艺简单、耗时短，使冻干制剂可以得到更好的利用、保存；且该制备方法可用于产业化批量生产含再生因子的冻干制剂，也可应用于医疗场所，采集伤患的自体血液，现场制作使用。

A lyophilized preparation containing regeneration factor and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种含再生因子的冻干制剂及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物制品
，尤其涉及一种含再生因子的冻干制剂及其制备方法和应用。
技术介绍
作为哺乳动物血液中的主要成分之一，血小板是从骨髓成熟的巨核细胞胞质裂解脱落下来的具有生物活性的小块胞质。富血小板血(Platelet-richplasma，PRP)是通过离心血提取的血小板浓聚物，主要成分有高浓度的血小板(数目比全血中数目高3倍以上)、白细胞和纤维蛋白。富血小板血浆(PRP)治疗术是一项再生修复治疗技术，主要用于组织创伤修复，如难愈合骨折、骨缺损、骨髓炎、关节软骨肌腱韧带损伤等修复及难愈合的创面(如压疮、烧烫伤、皮肤软组织缺损等)修复。该技术主要采用自源性富血小板血浆(PRP)进行治疗，从根本上避免了外源性生长因子引起的免疫排斥、传播疾病以及异种重组基因产品可能改变人类遗传结构的担忧。富血小板血浆(PRP)治疗技术在欧美等国已开展数十年，并在国内开展了多中心临床观察，证实安全、有效，能解决临床组织修复的难题，相比传统的组织修复方法可以缩短病程、减轻疼痛、加速功能恢复等，为医生、患者提供了一种全新的治疗手段。虽然PRP在治疗难愈合创面中有明显作用，但仍有不易存储、容易变质失活、使用不便、每次使用均需要重复抽血、重新制备等局限性。目前的富血小板血浆(Platelet-richplasma，PRP)在临床应用时有许多缺点，包括：生长因子含量较低；不易保存，每次治疗均须采血，病人离开医院则不能自行使用；使用过程患者行动受限等。可见，现有技术有待改进。>
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供一种含再生因子的冻干制剂及其制备方法和应用。为实现以上目的，本专利技术提供以下技术方案：一种含再生因子的冻干制剂，包括：第一冻干制剂和第二冻干制剂；所述第一冻干制剂包括激活后的富血小板血浆和激活剂的混合物被冻干后得到的冻干产物；所述第二冻干制剂包括贫血小板血浆被冻干后得到的冻干产物；所述第一冻干制剂和所述第二冻干制剂可以是来源于同一个体，也可以是来源于不同个体。进一步的，用于制备所述第一冻干制剂的所述激活后的富血小板血浆和激活剂的混合物的体积与用于制备所述第二冻干制剂的贫血小板血浆的体积的比例范围为3:1～1:1；优选2:1。进一步的，所述激活剂包括凝血酶；所述凝血酶在激活剂中的用量为400U/ml。一种含再生因子的冻干制剂的制备方法，包括步骤：获得富血小板血浆和贫血小板血浆；加入激活剂，激活所述的富血小板血浆；将激活后的所述的富血小板血浆和激活剂的混合物制成第一冻干制剂；将贫血小板血浆制成第二冻干制剂。其中所述将贫血小板血浆制成第二冻干制剂的操作可在获得贫血小板血浆后的任一步骤进行。进一步的，所述的获得富血小板血浆和血浆的操作包括：采血；进行第一次离心；分离第一次离心得到的离心产物，得到第一分离产物；将第一分离产物进行第二次离心；分离第二次离心得到的离心产物，获得第二分离产物和贫血小板血浆。所述第二分离产物即为富血小板血浆。进一步的，所述第一次离心条件为：15-25℃，离心力100-500g(优选100-300g，更优选200g)，离心10min。第一次离心后全血分为3层，上层为血浆层，下层为红细胞，两层交界处浅黄色分界层即PRP层；所述第二次离心条件为：温度15-25℃，离心力不低于400g，离心10min。进一步的，所述分离第一次离心得到的离心产物的操作包括：吸弃红细胞层总体积90％～95％的红细胞，余下的离心产物即为所述的第一分离产物；将所述第一分离产物充分混匀，作为所述第二次离心的起始物。进一步的，所述第二次离心的产物的上层血浆层即为贫血小板血浆层；所述分离第二次离心得到的离心产物的操作包括：吸取贫血小板血浆层总体积的90％～95％的贫血小板血浆待用，余下的离心产物即为所述的第二分离产物；从待用的贫血小板血浆中取与所述的第二分离产物的体积比为3:1～1:1的贫血小板血浆待用。进一步的，所述富血小板血浆的激活操作包括：将上述制得的富血小板血浆与激活剂混合，常温静置1小时激活，然后再-80℃冷冻保存至结冰以方便冻干。所述的富血小板血浆与所述激活剂的体积比为10:1～10:100。进一步的，所述激活剂包括凝血酶；所述凝血酶在激活剂中的用量为400U/ml。优选所述激活剂组成为：每1mL5％的氯化钙溶液中含400U的凝血酶。本专利技术的含再生因子的冻干制剂，或本专利技术制备方法制得的含再生因子的冻干制剂在临床治疗中的应用，具体应用场景包括但不限于：浅表新鲜创面、陈旧创面(各类感染创面)、深层组织或器官创面(如溃疡面等)、烧伤等。进一步的，所述含再生因子的冻干制剂使用时先用溶剂溶解，再将溶解物覆于创面。所述溶剂包括生理盐水、医用无菌水、去离子水、蒸馏水等。进一步的，所述第一冻干制剂和第二冻干制剂可以先分别溶解后再同时使用于创面，也可以现将冻干粉混合后再溶解，再用于创面。本专利技术的有益效果：本专利技术的冻干制剂包含独立冻干的含激活剂的被激活的PRP和血浆，更好的保全了血液中的功能因子和营养物质，避免了激活剂提前激活血浆中的纤维蛋白原，保护了血浆中的纤维蛋白原。本专利技术冻干制剂使用时，复溶后的含激活剂的PRP与血浆混合，激活剂中的凝血酶可以和未激活过的血浆即时形成凝胶(凝血酶通过切除血浆中可溶解的纤维蛋白原中的血纤肽A和B而生成的单体蛋白质，形成不溶解的纤维蛋白，从而形成凝胶)，所形成的可以保持创面的湿性愈合状态，并且有效的防止其它功能因子和营养物质的流失，隔绝了因环境中污染物接触创面而给创面愈合带来的不良影响。本专利技术的冻干制剂的制备方法分别分离出PRP和血浆，并只在PRP中加入激活剂，然后将加了激活剂的PRP和血浆分别冻干保存，更好的保全了血液中的功能因子和营养物质，避免了激活剂提前激活血浆中的纤维蛋白原，保证了本专利技术的冻干制剂的疗效。而如果不将血浆分离出来单独冻干保存，并于冻干前激活的话，血浆中的纤维蛋白原将会被提前激活(纤维蛋白原只能被凝血酶激活一次)，纤维蛋白原被提前激活后再制成的冻干制品，一方面不能很好地被保存，另一方面复融后使用时不能形成凝胶，无法附着在创面上。本专利技术的冻干制剂的制备方法中，激活剂的加入量在完成富血小板血浆激活的同事，保证了贫血小板血浆冻干产物复溶后被激活所需要激活剂量；且多余量的激活剂(每5mL5％氯化钙溶液中加入2000U凝血酶)也不会影响疗效。在冻干前加入激活剂激活PRP，使其中生长因子充分释放。本专利技术技术方案的激活-冻干-复溶的方法工艺简单、耗时短，使冻干制剂可以得到更好的利用、保存；病人可以避免多次抽血及多次往返医院的困扰，制作成冻干制剂后可以自行使用。且本专利技术的冻干制剂的制备方法可以用于产业化批量生产本专利技术的含再生因子的冻干制剂，也可以应用于医疗场所如医院等，采集伤患的自体血液，现场制作使用。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种含再生因子的冻干制剂，其特征在于，所述冻干制剂包括：第一冻干制剂和第二冻干制剂；所述第一冻干制剂包括激活后的富血小板血浆和激活剂的混合物被冻干后得到的冻干产物；所述第二冻干制剂包括贫血小板血浆被冻干后得到的冻干产物。/n

【技术特征摘要】
1.一种含再生因子的冻干制剂，其特征在于，所述冻干制剂包括：第一冻干制剂和第二冻干制剂；所述第一冻干制剂包括激活后的富血小板血浆和激活剂的混合物被冻干后得到的冻干产物；所述第二冻干制剂包括贫血小板血浆被冻干后得到的冻干产物。


2.根据权利要求1所述的含再生因子的冻干制剂，其特征在于，用于制备所述第一冻干制剂的所述激活后的富血小板血浆和激活剂的混合物的体积与用于制备所述第二冻干制剂的贫血小板血浆的体积的比例范围为3:1～1:1。


3.根据权利要求1所述的含再生因子的冻干制剂，其特征在于，所述激活剂包括凝血酶；所述凝血酶在激活剂中的用量为400U/ml。


4.一种含再生因子的冻干制剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括步骤：
获得富血小板血浆和贫血小板血浆；
加入激活剂，激活所述的富血小板血浆；
将激活后的所述的富血小板血浆和激活剂的混合物制成第一冻干制剂；
将贫血小板血浆制成第二冻干制剂。


5.根据权利要求4所述的含再生因子的冻干制剂的制备方法，其特征在于，所述的获得富血小板血浆和血浆的操作包括：采血；进行第一次离心；分离第一次离心得到的离心产物，得到第一分离产物；将第一分离产物进行第二次离心；分离第二次离心得到的离心产物，获得...

【专利技术属性】
技术研发人员：张智勇，杨逸禧，周永林，王文浩，
申请(专利权)人：广州医科大学附属第三医院广州重症孕产妇救治中心，广州柔济医院，
类型：发明
国别省市：广东;44