一株具有促骨髓间充质干细胞增殖作用的动物双歧杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术提供一株具有促骨髓间充质干细胞增殖作用的动物双歧杆菌及其应用，属于生物技术及食品、药品技术领域。本发明专利技术首次分离筛选获得一株具有良好促骨髓间充质干细胞增殖作用的动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)NFTY9，其同时兼具良好的生产性能和产酸性能，上述诸多特性表明其是一株在骨髓间充质干细胞研究和治疗领域具有潜在应用前景的益生菌新菌株。

An animal Bifidobacterium strain with the effect of promoting the proliferation of BMSCs and its application

【技术实现步骤摘要】
一株具有促骨髓间充质干细胞增殖作用的动物双歧杆菌及其应用
本专利技术属于生物技术及食品、药品
，具体涉及一株具有促骨髓间充质干细胞增殖作用的动物双歧杆菌及其应用。
技术介绍
公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。益生菌是能够对人体产生有益作用的微生物的总称。目前主要有乳杆菌、双歧杆菌、酵母菌、酪酸梭菌等，越来越广泛的应用于食品、药品、农业、畜牧业、生物工程等。其中双歧杆菌是人肠道中最重要的菌群之一，也是衡量人健康长寿的重要指标之一，被称为人类的“健康卫士”。多种报道均证明双歧杆菌能够增强肠道粘膜屏障功能，防止致病菌侵入肠道；通过刺激肠道免疫系统，产生分泌型抗体sIgA，激活T细胞的非特异性免疫功能，产生多种细胞因子等增强人体免疫功能；同时，双歧杆菌还具有抗肿瘤、抗感染、延缓衰老的功能。定植于人体肠道的双歧杆菌可在体内合成维生素K、B1、B2、B12、叶酸等维生素，产生乙酸、甲酸、乳酸、乙醇，抑制腐败菌的生长，刺激肠道蠕动缓解便秘症状。关于益生菌对肠道粘膜保护作用的报道较多。专利CN201710039037中公开了一株乳杆菌D8可以显著提高小肠绒毛的长度和小肠隐窝的深度，降低肠炎症状，着重公开了通过体外乳杆菌-肠道类器官-固有层淋巴细胞共培养模型，发现乳杆菌D8可以促进肠道干细胞的增殖。多种报道称使用乳酸菌后小肠绒毛变长，隐窝加深，最有可能原因是乳酸菌促进了肠道干细胞的增殖，肠道干细胞位于隐窝基底部不断向隐窝顶部迁移，在迁移过程中肠道干细胞分化成不同的肠道粘膜细胞，使得小肠绒毛变长，隐窝加深。骨髓间充质干细胞(BoneMarrowMesenchymalStemCells，BMSCs)是存在于骨髓中除造血干细胞之外的另一类干细胞，具有分化成骨、软骨、脂肪、神经等多种分化潜能的细胞亚群。该细胞广泛应用于白血病、心脑血管疾病、肝硬化、骨和肌肉退行性疾病、脑和脊髓神经损伤、老年痴呆等的临床治疗。因此，BMSCs的分离培养增殖在各种应用中均具有基础决定作用。对促进骨髓间充质干细胞的报道较多。其中专利CN201810624600公开了一种多肽能促进骨髓间充质干细胞的增殖；专利CN201811164544公开了α-雪松烯、β-雪松烯和异雪松酮可以有效促进人骨髓间充质干细胞的增殖，且不会影响其多向分化能力。关于中药及中药成分提取物具有促进骨髓间充质干细胞增殖作用的报道更多，卫荣报道了中药补肾活血方提取物能够促进大鼠骨髓间充质干细胞的增殖；刘耀辉报道了熊果酸可干预骨髓间充质干细胞的增殖；银楠楠报道了通窍活血汤可诱导骨髓间充质干细胞增殖及分化。然而，据专利技术人所知，目前尚未发现关于益生菌特别是动物双歧杆菌对骨髓间充质干细胞具有增殖作用的报道。
技术实现思路
针对上述现有技术的不足，本专利技术提供一株动物双歧杆菌，经试验验证，该菌株具有良好的促骨髓间充质干细胞增殖作用，同时该菌株还具有优异的生产性能和产酸能力，适于工业化大规模培养和生产，因此具有良好的实际应用之前景。本专利技术是通过如下技术方案实现的：本专利技术的第一个方面，提供一株动物双歧杆菌，该菌株命名为动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis)NFTY9，于2019年6月13日保藏于位于中国武汉市武汉大学的中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，其保藏编号为CCTCCNO:M2019454。本专利技术的第二个方面，提供上述动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis)NFTY9的培养方法，所述方法包括将动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis)NFTY9置于培养基中进行厌氧培养，所述培养条件包括在30-40℃(优选为37℃)培养1-24h(优选为12-16h)。本专利技术的第三个方面，提供上述动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis)NFTY9和/或上述培养方法制得的动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis)NFTY9培养物在制备促骨髓间充质干细胞增殖产品中的应用。本专利技术的第四个方面，提供一种促骨髓间充质干细胞增殖的产品，所述产品的活性成分包括上述动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis)NFTY9和/或上述培养方法制得的动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis)NFTY9培养物。本专利技术的第五个方面，提供一种体外培养骨髓间充质干细胞的方法，所述方法包括给予上述动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis)NFTY9和/或上述培养方法制得的动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis)NFTY9培养物和/或上述产品。本专利技术的有益技术效果：本专利技术首次分离筛选获得一株具有良好促骨髓间充质干细胞增殖作用的动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis)NFTY9，其同时兼具良好的生产性能和产酸性能，上述诸多特性表明其是一株在骨髓间充质干细胞研究和治疗领域具有潜在应用前景的益生菌新菌株，因此具有良好的实际应用之价值。附图说明构成本专利技术的一部分的说明书附图用来提供对本专利技术的进一步理解，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。图1为本专利技术动物双歧杆菌NFTY9平板单菌落划线图。图2为本专利技术动物双歧杆菌NFTY9革兰氏染色镜检结果图(油镜观察)。图3为本专利技术动物双歧杆菌NFTY9生化实验结果图。图4为本专利技术动物双歧杆菌NFTY9同源性分析图。图5为本专利技术动物双歧杆菌NFTY9系统进化树图。图6为本专利技术动物双歧杆菌NFTY9与动物双歧杆菌C3-0008生物量的比较图。图7为本专利技术动物双歧杆菌NFTY9与动物双歧杆菌C3-0008产酸曲线比较图。图8为本专利技术使用的骨髓间充质干细胞图。图9为本专利技术动物双歧杆菌NFTY9促进骨髓间充质干细胞增殖相关图；其中，图9(a)为空白对照组；图9(b)为NFTY9发酵液稀释至2-4时，对骨髓间充质干细胞促增殖作用图；图9(c)为NFTY9发酵液稀释至2-5时，对骨髓间充质干细胞促增殖作用图。具体实施方式应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本专利技术提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本专利技术的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。应理解，本专利技术的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本专利技术实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株动物双歧杆菌，所述菌株命名为动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)NFTY9，于2019年6月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO:M2019454。/n

【技术特征摘要】
1.一株动物双歧杆菌，所述菌株命名为动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis)NFTY9，于2019年6月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCCNO:M2019454。


2.权利要求1所述动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis)NFTY9的培养方法，其特征在于，所述方法包括将动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis)NFTY9置于培养基中进行厌氧培养。


3.如权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述培养条件包括在30-40℃(优选为37℃)培养1-24h(优选为12-16h)。


4.如权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述培养基为适于乳酸菌生长繁殖的培养基，进一步优选为适于双歧杆菌生长繁殖的培养基，更进一步优选为TPY培养基。


5.权利要求1所述动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis)NFTY9和/或权利要求2-4所述培养方法制得的动物双歧杆菌(Bifidobacteriumanimalis)NFTY9培养物在制备促骨髓间充...

【专利技术属性】
技术研发人员：单宝龙，张建梅，陈甜甜，樊梅娜，孙尹双，白冬红，刘红，程秀芳，党兰庆，
申请(专利权)人：泰安大凡神农生物有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37