一种小黄鱼骨胶原抗菌肽及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种小黄鱼骨胶原抗菌肽及其应用，属于生物学技术领域，抗菌肽的氨基酸序列为HECEDCYSGCRNSCQH，分子量为1.87Da，可以抑制食品上的食品腐败微生物的生长，防止或抑制了被该微生物引起的所述食品的腐败变质，为实际无毒级，具有副作用或危险低的优势，安全性高；本发明专利技术抗菌肽可用于制备制备食品防腐剂，防止或抑制微生物引起的食品腐败变质；本发明专利技术抗菌肽与香豆素的合用具有较强的协同作用，可以增强抗菌活性，降低抗菌肽的使用量。

An antimicrobial peptide of small yellow croaker bone collagen and its application

The invention provides a small yellow croaker ossein antibacterial peptide and its application, belonging to the field of biological technology. The amino acid sequence of the antibacterial peptide is hecedcysgcrnscqh, with a molecular weight of 1.87da, which can inhibit the growth of food spoilage microorganism on food, prevent or inhibit the spoilage of the food caused by the microorganism, which is of the actual non-toxic level, with the advantages of low side effects or risks The antibacterial peptide of the invention can be used for preparing food preservatives to prevent or inhibit food spoilage caused by microorganisms; the combination of the antibacterial peptide and coumarin of the invention has strong synergistic effect, can enhance the antibacterial activity and reduce the use amount of the antibacterial peptide.

【技术实现步骤摘要】
一种小黄鱼骨胶原抗菌肽及其应用
本专利技术属于生物学
，具体涉及一种小黄鱼骨胶原抗菌肽及其应用。
技术介绍
胶原蛋白是动物体内的一种组织结构蛋白，约占动物体总蛋白含量的25％。胶原蛋白是细胞外基质中最主要的纤维状蛋白质，是机体结缔组织和间质组织的主要纤维组成成分，也是细胞骨架的重要组分。胶原蛋白广泛存在于皮肤、筋腱、骨头及韧带等实质器官中，使组织器官具有一定的结构以及机械力学性质，能够达到保护机体、支撑器官的作用。胶原多肽是胶原蛋白的酶解产物，分子质量要比胶原蛋白低得多，其肽链已经断开，可被人体直接吸收利用。目前，大量的研究表明，利用蛋白酶水解畜骨得到的水解产物胶原多肽具有多种生物活性功能，例如降血压、抗氧化、预防和治疗关节炎和抗衰老等。抗菌肽(antibacterialpeptides,ABP)是具有抗菌活性的肽类的总称，不但具有广谱的抗菌活性，而且还有抗癌、抗病毒、抗寄生虫、促进伤口愈合等作用，具有较大的药用开发价值。从自然生物活体中提取的抗菌肽大多是由12-100个氨基酸残基构成，有典型的两亲结构，分子质量大约在4-10kDa之间。为将抗菌肽开发为新型的食品防腐剂，或抗菌、抗癌等药物，在近些年中，众多学者对抗菌肽进行了研究。我国是一个水产品生产和消费的大国，据统计自年以来，我国的水产品生产总量已经连续年位居世界第一。然而，水产大国并不等于是水产强国，我国的水产品结构不合理，加工水平依然停留在初级阶段。主要表现在初级加工产品多，工业化程度较低，深加工产品少，加工品比例较低而且技术含量少，急需用新型技术加以改进和提高。目前我国的水产品加工率仅为，远远低于渔业发达国家的水平；而且我国水产加工业的废弃物利用水平较低，每年产生的大量水产品下脚料无法得到有效地加工利用，成了影响水产业经济效益的关键所在。以小黄鱼生产加工为例，我国含有丰富的小黄鱼资源，每年加工生产过程中会产生大量的鱼骨废弃物未得到有效的利用。面对如此巨大的骨资源，如不利用或者不合理利用，必将带来环境污染问题。胶原多肽的生产是一个变废为宝的过程，虽然原料低廉但成品价格却十分昂贵，大批量的生产可带动水产养殖业的发展，增加渔民收入，在大大促进经济发展的同时又减少了环境污染，对可持续发展具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种抑菌活性强，可以抑制食品上的食品腐败微生物的生长，防止或抑制食品腐败变质的小带鱼源抗菌肽添加剂。本专利技术为实现上述目的所采取的技术方案为：一种小黄鱼骨胶原抗菌肽，其氨基酸序列是SEQIDNO:1所示。该抗菌肽可以抑制食品上的食品腐败微生物的生长，防止或抑制了被该微生物引起的食品的腐败变质。且抗菌肽对小鼠经口最大耐受量大于15g/kg，为实际无毒级。优选的，抗菌肽的分子量为1.87Da。计算机模拟的等电点pI＝5.39。本专利技术本专利技术的又一目的在于，提供小黄鱼骨胶原抗菌肽在制备食品防腐剂中的应用。小黄鱼骨胶原抗菌肽具有副作用或危险低的优势，安全性高，经口可为消化酶分解为氨基酸，进而作为营养物质吸收。所以，该抗菌肽可以用于制备没有抗药菌的出现或副作用的问题、并且安全性极高的具有抗真菌活性的食品防腐剂。优选的，食品防腐剂防止或抑制微生物引起的食品腐败变质。优选的，微生物为细菌或真菌。优选的，细菌是选自假单胞菌或芽孢杆菌的食品腐败种类细菌。优选的，真菌是选自以下种属的食品腐败种类真菌：链格孢菌、曲霉菌、镰刀霉、葡萄孢菌、炭疽菌、酵母。进一步优选，真菌是选自克鲁维酵母或接合酵母种属的食品腐败种类真菌。优选的，食品为源自、提供、或为，水果、坚果、蔬菜、种子、糖、奶制品、肉类、鱼类或面包。优选的，防腐剂还包含香豆素。抗菌肽与香豆素的合用具有较强的协同作用，可以增强抗菌活性，降低抗菌肽的使用量。此外，该组合的使用可能减少其他防腐技术的使用，如加热法，保留食物自身风味；该组合的使用也可能减少其他化学防腐剂的使用，进而减少其副作用。本专利技术本专利技术的又一目的在于，提供一种防止或抑制微生物引起的食品腐败变质的方法，其特征在于：包括给有需要的食品使用含有有效剂量的上述防腐剂。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术抗菌肽的氨基酸序列为HECEDCYSGCRNSCQH，可以抑制食品上的食品腐败微生物的生长，防止或抑制了被该微生物引起的所述食品的腐败变质，为实际无毒级，具有副作用或危险低的优势，安全性高；本专利技术抗菌肽可用于制备制备食品防腐剂，防止或抑制微生物引起的食品腐败变质；本专利技术抗菌肽与香豆素的合用具有较强的协同作用，可以增强抗菌活性，降低抗菌肽的使用量。本专利技术采用了上述技术方案提供一种小黄鱼骨胶原抗菌肽及其应用，弥补了现有技术的不足，设计合理，操作方便。附图说明图1是本专利技术实施例1中凝胶层析图谱；图2是本专利技术实施例1中凝胶层析图谱中各组分峰的抑菌效果；图3是本专利技术实施例1中离子交换层析图谱；图4是本专利技术实施例1中离子交换层析图谱中各组分峰的抑菌效果；图5是本专利技术实施例1中反相高效液相色谱图；图6是本专利技术试验例2中抗菌肽和香豆素的抑菌效果。具体实施方式本专利技术所述多肽对食品的防腐可以发生于食品的储存过程、运输过程、处理操作过程、加工过程或展示过程。以下实施例进一步说明本专利技术的内容，但不应理解为对本专利技术的限制。在不背离本专利技术精神和实质的情况下，对本专利技术方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本专利技术的范围。本专利技术的一个实施方案是一种小黄鱼骨胶原抗菌肽，其氨基酸序列是SEQIDNO:1所示。该抗菌肽可以抑制食品上的食品腐败微生物的生长，防止或抑制了被该微生物引起的所述食品的腐败变质。在一个实施方案中，抗菌肽的分子量为1.87Da。计算机模拟的等电点pI＝5.39。本专利技术的一个实施方案是一种小黄鱼骨胶原抗菌肽的制备方法，包括如下步骤：步骤1：将小黄鱼骨进行修整、清洗并破碎成1-20mm的鱼骨颗粒；步骤2：按固液比为1:1-2g/mL将鱼骨颗粒中加入pH为8.0-9.0的磷酸盐缓冲液(含0.01-0.05μM香草醛)，用组织均质机磨碎，在温度为40-60℃的密闭容器中蒸煮15-30min；在水产品加工过程中，原料在高温蒸煮过程中的受热程度会严重影响最终产品的质量，但是蒸煮的温度和时间不易控制，容易导致蛋白质变性不够充分或者变性过度，从而影响酶解效果。而该步骤可使小黄鱼骨胶原蛋白结构在较低的蒸煮温度下即发生改变，使得胶原蛋白分子暴露出更多的酶切位点，有利于蛋白酶与蛋白的结合，从而得到氨基酸序列为HECEDCYSGCRNSCQH的抗菌肽，且该步骤的处理可以增大酶解反应速率和抗菌肽的得率；步骤2：将步骤1得小带鱼中加入碱性蛋白酶和风味蛋白酶，碱性蛋白酶的酶底比为400-600U/g，风味蛋白酶的酶底比为300-500U/g，在温度为50-60℃下进行酶解4-6h，然后灭酶，即得酶解液；步骤3：将步骤2得酶解液加入截留分子本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种小黄鱼骨胶原抗菌肽，其特征在于：其氨基酸序列是SEQ ID NO:1所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种小黄鱼骨胶原抗菌肽，其特征在于：其氨基酸序列是SEQIDNO:1所示。


2.根据权利要求1所述的一种小黄鱼骨胶原抗菌肽，其特征在于：所述抗菌肽的分子量为1.87Da。


3.权利要求1或2所述的小黄鱼骨胶原抗菌肽在制备食品防腐剂中的应用。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述食品防腐剂防止或抑制微生物引起的食品腐败变质。


5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述微生物为细菌或真菌。


6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述细菌是选自假单胞菌或芽...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶常青，
申请(专利权)人：舟山市常青海洋食品有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33