一种DNA合成仪制造技术

技术编号:22767655 阅读:39 留言:0更新日期:2019-12-07 08:59
本实用新型专利技术公开了一种DNA合成仪,包括碱基瓶、试剂瓶、合成柱、供气装置、泵、输送电磁阀、流路节流阀和废液瓶,供气装置的出气口连接一个输送电磁阀后在管路上连接七个试剂瓶,连接七个试剂瓶后再连接第二个输送电磁阀,第二个输送电磁阀后同时连接第三个输送电磁阀、流路节流阀、合成柱入口、泵的进出口和废液瓶,第三个输送电磁阀后的管路上连接八个碱基瓶和第四个输送电磁阀,第四个输送电磁阀后连接五个碱基瓶和三个试剂瓶,合成柱的出口连接流路节流阀。本实用新型专利技术构成整个DNA的整个合成流程的装置,在DNA合成中能够自动完成整个合成流程,且采用的部件均无需进口,大大压缩了成本,可以大幅度精简人力节约时间降低误差。

A DNA synthesizer

The utility model discloses a DNA synthesizer, which comprises a base bottle, a reagent bottle, a synthetic column, a gas supply device, a pump, a delivery solenoid valve, a flow path throttle valve and a waste liquid bottle. The air outlet of the gas supply device is connected with a delivery solenoid valve, then seven reagent bottles are connected on the pipeline, then the second delivery solenoid valve is connected after the seven reagent bottles are connected, and the second delivery solenoid valve is connected at the same time Three delivery solenoid valves, flow path throttle valve, synthetic column inlet, pump inlet and outlet and waste liquid bottle, eight base bottles and the fourth delivery solenoid valve are connected on the pipeline behind the third delivery solenoid valve, five base bottles and three reagent bottles are connected behind the fourth delivery solenoid valve, and the outlet of synthetic column is connected with flow path throttle valve. The device of the utility model for composing the whole DNA synthesis process can automatically complete the whole DNA synthesis process in the DNA synthesis, and the components used do not need to be imported, which greatly reduces the cost, greatly simplifies the manpower, saves the time and reduces the error.

【技术实现步骤摘要】
一种DNA合成仪
本技术涉及一种生物实验装置,尤其涉及一种DNA合成仪。
技术介绍
在生物实验中,DNA合成是常用的仪器,但现有技术中的DNA合成仪国内市场一直没有自己的品牌,相关研究工作都依赖于国外进口仪器或者是非自动化合成。进口仪器成本高昂,如若采用非自动化合成将会大量耗费时间成本和人力成本,也伴随人工合成时存在的不可消除的误差风险,工序繁琐且费时费力,因此,存在改进空间。
技术实现思路
本技术的目的就在于为了解决上述问题而提供一种DNA合成仪。本技术通过以下技术方案来实现上述目的:本技术包括碱基瓶、试剂瓶、合成柱、供气装置、泵、输送电磁阀、流路节流阀和废液瓶,所述供气装置的出气口连接一个输送电磁阀后在管路上连接七个试剂瓶,连接七个试剂瓶后再连接第二个输送电磁阀,第二个输送电磁阀后同时连接第三个输送电磁阀、流路节流阀、合成柱入口、泵的进出口和废液瓶,第三个输送电磁阀后的管路上连接八个所述碱基瓶和第四个输送电磁阀,第四个输送电磁阀后连接五个碱基瓶和三个试剂瓶,所述合成柱的出口连接所述流路节流阀。本技术的有益效果在于:本技术是一种DNA合成仪,与现有技术相比,本技术构成整个DNA的整个合成流程的装置,在DNA合成中能够自动完成整个合成流程,且采用的部件均无需进口,大大压缩了成本,使用方便,省时省力,可以大幅度精简人力(单人操作)节约时间(智能合成)降低误差(精准定量),从而完美解决国内相关行业的技术难题,具有推广应用的价值。附图说明图1是本技术的结构示意图。图中:1-碱基瓶、2-试剂瓶、3-合成柱、4-供气装置、5-泵、6-输送电磁阀、7-流路节流阀、8-废液瓶。具体实施方式下面结合附图对本技术作进一步说明:如图1所示:本技术包括碱基瓶1、试剂瓶2、合成柱3、供气装置4、泵5、输送电磁阀6、流路节流阀7和废液瓶8,所述供气装置的出气口连接一个输送电磁阀后在管路上连接七个试剂瓶,连接七个试剂瓶后再连接第二个输送电磁阀,第二个输送电磁阀后同时连接第三个输送电磁阀、流路节流阀、合成柱入口、泵的进出口和废液瓶,第三个输送电磁阀后的管路上连接八个所述碱基瓶和第四个输送电磁阀,第四个输送电磁阀后连接五个碱基瓶和三个试剂瓶,所述合成柱的出口连接所述流路节流阀。供气装置:DNA合成仪采用惰性气体(氩气)或氮气及电磁阀组驱动液体试剂。采用气体及电磁阀驱动液体试剂时,需首先将管路系统电磁阀前段,含试剂瓶组中压力加压到规定气压,通过合成管理软件或手动打开电磁阀(一般打开时间为数ms),即可驱动液体试剂到所需的合成柱中。试剂和碱基瓶组DNA合成仪一般需碱基瓶组及试剂瓶组。试剂瓶含脱保护剂(Deb)、活化剂(act)、盖帽试剂A(capA)、盖帽试剂B(capB)、氧化剂(OXI)、洗脱乙腈(ACN)。碱基瓶为标准碱基(A/C/G/T/和rA/rC/rG/U),同时搭配特殊碱基瓶位,用于荧光标记等合成。压力管路及输送管路DNA合成仪的一般原则需要保持内外气体隔绝,因此无论试剂瓶、碱基瓶均需密封保持一定压力。所有压力管路目前均采用特氟龙导管。每个瓶子都有一个氩气压力管道及输送管道进入瓶盖插塞,对于亚磷酰胺,1—13号瓶其压力管道也作为排气管。氩气管要保持在液体水平以上,而输送管却伸到瓶的底部。当阀门正确设置打开时,储液瓶上部空间由氩气加压,液体被推进输送管,流到其目的地。亚磷酰胺瓶排气除了加压外,亚磷酰胺瓶都是用压力排气管排气的。把亚磷酰胺放人仪器前,要用氩气排除空气使其净化。净化是通过输送管输送气体,当气体输送到瓶内时,空气经压力排气管排出。这是由瓶子更换步骤自动完成的。废液瓶是输送系统的低压侧,必须将出口与大气相通。要确保排气管通到通风柜。如果排气管阻塞,将会产生反压,试剂和溶剂的输送会受到抑制。输送电磁阀试剂输送系统包括三个试剂阀块及2个柱阀块。阀块控制气体和化学试剂流人柱子及出口。除亚磷酰胺和四唑以外,试剂和溶剂都被同时输送到所有活化柱。当有多个活化柱时,对流速的细微变化,以自动调节每个柱子的输送次数来补偿。每一个5—端口柱阀块将流出物导人废液口、DMT收集口,或DNA收集瓶,它也控制用于除去或冲洗柱内和柱阀块内的试剂的氩气。合成柱起始结合在载体(CPG)上的核苷酸是装在一次性的柱子中,除柱体外,还有2个固定过滤板和2个接头,所有的部件都由惰性材料制成。固定过滤板是多孔性聚苯乙烯固定在两端盖子中。入口和出口是母路鲁尔接头,与仪器的公路鲁尔接头配对。柱子是对称的(没有顶端和底部、前后之分),可以以任何方式与公路鲁尔接头相连接。每一个柱子都用颜色编号,表示不同的起始核苷酸,以及有一个唯一的连续顺序号码。正常的流路是从底部进入,通过向上输送液体,使CPG颗粒上升并保持悬浮状态。溶剂和试剂的流速已经设置好,能使颗粒适当地混合。流路节流阀试剂通过底部的luer接头,流到柱子,如果没拧上下面的一个luer接头,应会在一个圆柱形的玻璃流路节流阀上发现。试剂通过流路节流阀中一个很小的通道流到柱子。小量的试剂可以在流路节流阀中结晶,长期这样会造成流路阻塞。废液和排气大多数化学试剂输送的最终点是废液瓶,废液瓶是一个空立着的10L的聚苯乙烯容器,可放在合成仪附近的地板上或放在低于仪器的附近工作台上。排气管将废气导人适当的排气装置,如排烟罩。整个设备的控制可以采用计算机进行控制。本技术的工作原理如下:1)脱保护基(Deblocking):用三氯乙酸溶液(0.2mL,3%)脱去连结在CPG可控孔径玻璃(10mg,通常1微mol)上的核苷酸的保护基团DMTr(二甲氧基三苯甲基),获得游离的5'-羟基端,以供下一步缩合反应;2)活化(Activation):将亚磷酰胺保护的核苷酸单体(0.1mL,0.1M)与四氮唑活化剂(0.1mL,0.1M)混合并进入合成柱,形成亚磷酰胺四唑活性中间体(其3'-端已被活化,但5'-端仍受DMT保护),此中间体将与GPG上的已脱保护基的核苷酸发生缩合反应;3)缩合(Coupling):亚磷酰胺四唑活性中间体遇到CPG上已脱保护基的核苷酸时,将与其5'-羟基发生亲合反应,缩合并脱去四唑,此时合成的寡核苷酸链向前延长一个碱基;4)封闭(Capping):缩合反应后为了防止连在CPG上的未参与反应的5'-羟基在随后的循环反应中被延伸,常通过乙酰化来封闭此端羟基,一般乙酰化试剂是用乙酸酐(0.1mL,0.1M)和N-甲基咪唑(0.1mL,0.1M)等混合形成的;5)氧化(Oxidation):缩合反应时核苷酸单体是通过亚磷酯键与连在CPG上的寡核苷酸连接,而亚磷酯键不稳定,易被酸、碱水解,此时常用碘的四氢呋喃溶液(0.1mL,0.02M)将亚磷酰转化为磷酸三酯,得到稳定的寡核苷酸。以上各步骤均在DNA合成仪内全自动本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种DNA合成仪,其特征在于:包括碱基瓶、试剂瓶、合成柱、供气装置、泵、输送电磁阀、流路节流阀和废液瓶,所述供气装置的出气口连接一个输送电磁阀后在管路上连接七个试剂瓶,连接七个试剂瓶后再连接第二个输送电磁阀,第二个输送电磁阀后同时连接第三个输送电磁阀、流路节流阀、合成柱入口、泵的进出口和废液瓶,第三个输送电磁阀后的管路上连接八个所述碱基瓶和第四个输送电磁阀,第四个输送电磁阀后连接五个碱基瓶和三个试剂瓶,所述合成柱的出口连接所述流路节流阀。/n

【技术特征摘要】
1.一种DNA合成仪,其特征在于:包括碱基瓶、试剂瓶、合成柱、供气装置、泵、输送电磁阀、流路节流阀和废液瓶,所述供气装置的出气口连接一个输送电磁阀后在管路上连接七个试剂瓶,连接七个试剂瓶后再连接第二个输送电磁阀,第二个输送...

【专利技术属性】
技术研发人员:黄震
申请(专利权)人:纽奥维特成都生物科技有限公司
类型:新型
国别省市:四川;51

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