The device for co culture of cells relates to the field of cell culture, which is composed of a dish body and a dish cover. The dish body is a hollow structure with an upper opening. The opening of the dish body is provided with a dish cover, and the dish body is provided with an isolation ring, which divides the interior of the dish body into areas I and II, and there are climbing plates in the isolation ring. In order to study the effect on myocytes or adipocytes in co culture environment, the device can not only realize the direct contact and co culture of bovine myocytes and adipocytes, but also collect the single cells (myocytes or adipocytes) on the climbing plate for subsequent transcriptome and proteome analysis, so as to further explore the relationship between myocytes and adipocytes Interaction; it has been proved by many observations that the muscle cells and fat cells cultured by this method have high survival efficiency, good vitality and obvious cell characteristics, and are consistent with the morphology of the muscle cells and fat cells cultured separately. It is a good in vitro research model, which has certain promotion research value.
【技术实现步骤摘要】
一种细胞共培养的装置及牛肌细胞与脂肪细胞的共培养方法
本专利技术涉及细胞培养领域,具体涉及一种细胞共培养的装置及牛肌细胞与脂肪细胞的共培养方法。
技术介绍
相较于单层细胞培养技术,为了能够建立更接近体内环境的培养体系,在20世纪80年代后期,细胞共培养技术应运而生。细胞共培养又称为复合培养或混合培养,是将两种或两种以上的细胞共同培养于同一环境中,由于它考虑到活体细胞间的相互作用,最大程度地模拟体内微环境,弥补了单层细胞培养的缺陷,所以能更好地研究细胞与细胞之间的相互作用。目前,研究细胞共培养的技术主要包括直接接触共培养和间接接触共培养两种。直接接触共培养是将将两种或两种以上的细胞按照一定的接种比例放在同一培养环境中共同混合培养,其缺陷是无法对单类细胞进行后续转录组或蛋白组的分析处理;间接接触共培养是将两种或两种以上的细胞分别接种于不同的载体上,然后再将这两种载体置于同一培养环境中,较为典型的方法是Transwell共培养体系,包含上室和下室两部分,其中,上室内盛装上层培养液,下室内盛装下层培养液,上、下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。将两种细胞分别接种于上、下室内,由于聚碳酸酯膜具有通透性,上、下层的培养液中的成分可以互相扩散,而细胞本身无法通过,所以可以用来研究两种细胞之间的相互作用情况,但同时也存在的问题是:(1)Transwell培养系统上下室以聚碳酸酯膜相隔,为防止细胞穿过,共培养中要选用0.4微米孔径的膜,会影响细胞分泌因子的通过和作用时间;(2)不易对上下室细胞进行较为直观地观察和后续操作;(3)价格昂 ...
【技术保护点】
1.一种细胞共培养装置,是由皿体(1)和皿盖(2)构成,其特征在于:所述皿体(1)为上开口的中空结构,皿体(1)开口处设有皿盖(2),皿体(1)的内部设有隔离圈(4),隔离圈(4)为上下开口的中空结构,隔离圈(4)将皿体(1)的内部分割为区域Ⅰ和区域Ⅱ,隔离圈(4)的内部为区域Ⅰ,隔离圈(4)与皿体(1)之间为区域Ⅱ,隔离圈(4)的内部设有爬片(3)。/n
【技术特征摘要】
1.一种细胞共培养装置,是由皿体(1)和皿盖(2)构成,其特征在于:所述皿体(1)为上开口的中空结构,皿体(1)开口处设有皿盖(2),皿体(1)的内部设有隔离圈(4),隔离圈(4)为上下开口的中空结构,隔离圈(4)将皿体(1)的内部分割为区域Ⅰ和区域Ⅱ,隔离圈(4)的内部为区域Ⅰ,隔离圈(4)与皿体(1)之间为区域Ⅱ,隔离圈(4)的内部设有爬片(3)。
2.根据权利要求1所述的一种细胞共培养装置,其特征在于所述的皿体(1)和隔离圈(4)均为圆柱体。
3.根据权利要求2所述的一种细胞共培养装置,其特征在于所述的皿体(1)的直径60mm,隔离圈(4)的直径为35mm,爬片(3)为24mm*24mm的盖玻片。
4.利用权利要求1所述的装置共培养牛肌细胞与脂肪细胞的方法,其操作步骤如下:
(1)在无菌条件下,分别取牛背最长肌和肾周脂肪组织,切除可见的血管和结缔组织,用5%~10%质量百分比双抗的1xPBS冲洗,然后将组织剪成1mm3大小的小块,备用;
(2)分别在(1)步骤中剪碎的牛背最长肌肌肉组织加入0.25%的Ⅱ型胶原酶/0.1%的Ⅱ型中性蛋白酶消化液,在(1)...
【专利技术属性】
技术研发人员:王洪宝,苏晓彤,王亚宁,李安奇,成功,昝林森,
申请(专利权)人:西北农林科技大学,
类型:发明
国别省市:陕西;61
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