一种黄曲霉毒素M1检测装置制造方法及图纸

本实用新型专利技术提供了一种黄曲霉毒素M1检测装置，包括：读数仪，反应微孔，插在读数仪上内置样品参数的ID卡及试纸条，所述反应微孔中容置有乳胶微球偶联抗体，所述试纸条包括底板、样品垫、硝酸纤维素膜、吸水纸；其中，所述样品垫与吸水纸设置在底板的两端，在样品垫与吸水纸之间为硝酸纤维素膜，在硝酸纤维素膜上标记有检测线和质控线；所述质控线靠近吸水纸一侧，检测线靠近样品垫一侧；所述试纸条插入反应微孔中进行显色反应。本实用新型专利技术红色乳胶微球颜色鲜艳饱满，正红色，便于识别；乳胶微球产量至少50L‑100L，同批量是胶体金的5‑10倍。黄曲霉毒素M1偶联抗体为化学键偶合，比胶体金物理吸附稳定性好，准确度和精密度高，成本低，操作简单。

A detection device for aflatoxin M1

The utility model provides a aflatoxin M1 detection device, which comprises a reading instrument, a reaction micropore, an ID card and a test paper strip inserted on the reading instrument for sample parameters, wherein the reaction micropore contains latex microspheres coupling antibody, and the test paper strip comprises a base plate, a sample pad, a nitrocellulose film and a water absorption paper, wherein the sample pad and the water absorption paper are arranged at both ends of the base plate There is a nitrocellulose membrane between the sample pad and the absorbent paper, and a detection line and a quality control line are marked on the nitrocellulose membrane; the quality control line is close to the side of the absorbent paper, and the detection line is close to the side of the sample pad; the test paper strip is inserted into the reaction micropore for color reaction. The red latex microsphere of the utility model is bright and full in color, positive red, and easy to identify; the output of the latex microsphere is at least 50L \u2011 100L, and the same batch is 5 \u2011 10 times that of the colloidal gold. The aflatoxin M1 coupling antibody is a chemical bond coupling, which has better physical adsorption stability, higher accuracy and precision, lower cost and simple operation than colloidal gold.

【技术实现步骤摘要】
一种黄曲霉毒素M1检测装置
本技术涉及黄曲霉毒素检测领域，尤其涉及一种黄曲霉毒素M1检测装置。
技术介绍
黄曲霉毒素是一种毒性极强的剧毒物质。它的主要分子型式为B1、B2、G1、G2、M1、M2等，黄曲霉毒素M1是动物摄入黄曲霉毒素B1后体内经羟基化代谢的产物，存在于动物体内可食部分，如乳、肝、蛋类等，其中以牛奶中最为常见，M1在乳与乳制品的生产和贮藏期间相当稳定，巴氏消毒难以破坏。黄曲霉毒素与人的肝癌有密切关系，也能引起人的急性中毒死亡。黄曲霉毒素M1属于霉菌毒素的一种，目前乳制品领域流行的霉菌毒素试纸条主要为胶体金定性产品，胶体金定量产品由于准确度、精密度和稳定性很难达到要求，一直难以占市场主导，客户只能用酶联免疫试剂盒和仪器法如高效液相等，检测样品的具体含量，酶联免疫试剂盒和仪器法对人员和环境的要求较高，检测时间较长。我国国家标准GB2761-2017食品安全国家标准乳制品中真菌毒素国家限量黄曲霉毒素M1限量500ppt，欧盟限量50ppt。现有技术的缺陷和不足：(1)目前市场流行的黄曲霉毒素M1试纸条主要为胶体金技术，胶体金本身为暗紫红色，颜色较浅，不易判别阴阳性。(2)胶体金一批制金量最多约10L左右，粒径偏差较难精准控制，大量生产定量产品，不同批容易造成大的批间差。(3)胶体金标记技术为物理吸附，较化学键偶联，产品稳定性较差。(4)目前市场胶体金试纸条主要为定性产品，大多客户需要操作快速、简单、人员要求低、成本低、肉眼可视的定量产品。定量检测卡可以使客户降低对人员的要求，节省人力，尤其是原料筛选有很大的优势，之前一直是定性筛选，假阴性和假阳性较高。(5)烧金、标记抗体工作量较大，工艺繁琐，产出少，浪费人力物力。(6)由于AFM1抗体和抗原的特殊性，市面上进口产品胶体金标记AFM1技术的变异系数较大。
技术实现思路
本技术的目的在于解决现有技术中的上述缺陷，提供一种定量检测黄曲霉毒素M1的检测装置，能定量检测黄曲霉毒素M1的含量，测量精准，实验数据可靠，使用方便，成本低的黄曲霉毒素M1检测装置。为了实现本技术的主要目的，本技术提供：一种黄曲霉毒素M1(aflatoxinM1，简称AFM1)检测装置，包括：读数仪，反应微孔，试纸条，插在读数仪上内置样品参数的ID卡并对插在读数仪内的试纸条进行读数，所述反应微孔中容置有乳胶微球偶联的黄曲霉毒素M1抗体，所述试纸条包括底板、样品垫、硝酸纤维素膜、吸水纸；其中，所述样品垫与吸水纸设置在底板的两端，在样品垫与吸水纸之间为硝酸纤维素膜，在硝酸纤维素膜上标记有检测线和质控线；所述质控线靠近吸水纸一侧，检测线靠近样品垫一侧；所述试纸条的样品垫一端插入反应微孔中进行显色反应。作为优选方案，所述质控线处设有羊抗鼠的IgG抗体捕获试剂；所述检测线处设有AFM1-OVA抗原捕获试剂。作为优选方案，所述羊抗鼠的IgG抗体浓度为0.1mg/mL，所述AFM1-OVA抗原浓度为1.0mg/mL。作为优选方案，所述乳胶微球偶联抗体中黄曲霉毒素M1抗体浓度为0.5-2mg/mL。作为优选方案，所述吸水纸及样品垫分别与硝酸纤维素膜重叠1-2mm。作为优选方案，所述吸水纸长为25cm，硝酸纤维素膜长为21cm、宽为3-4mm，样品垫长为20cm。所述检测线和质控线之间的间隔为4-5mm。作为优选方案，所述检测线和质控线之间的间隔为5mm。作为优选方案，所述底板为PVC底板。本技术提供了一种黄曲霉毒素M1检测装置，主要原理是：将黄曲霉毒素M1(AFM1)抗体偶联于乳胶微球，包被于反应微孔中，将AFM1-OVA抗原固定在硝酸纤维素膜上作为检测线(T)，将羊抗鼠的IgG抗体固定在质控线作为对照线(C)，向偶联有黄曲霉毒素M1抗体的乳胶微球中加样检测，若样品中含有黄曲霉毒素M1，首先与黄曲霉毒素M1抗体结合形成复合物，此复合物在样品垫上向前涌动到检测线位置，由于偶联的黄曲霉毒素M1抗体表面位点被AFM1-OVA抗原占据，而使其不能与检测线的AFM1-OVA抗原结合，此检测限由于不能拦截微球而不显色或显色弱，将此检测结果视为阳性；而当样品中不含黄曲霉毒素M1时，乳胶微球涌动到检测线时将被AFM1-OVA抗原捕获。乳胶微球聚集于检测线上呈现出肉眼可见的鲜红色条带，此检测结果视为阴性，当检测线与质控线均为无色或质控线不显色，视为试纸条失效。与现有技术相比，本技术具有的有益技术效果：1)黄曲霉毒素M1检测装置检测均可实现定量，整个检测时间10-30min，反应时间10min即可检测出粮油和饲料中黄曲霉毒素M1的含量；2)乳胶微球为正红色颜色鲜艳饱满，极好判别；3)乳胶微球产量至少50-100L，同批量是胶体金的5-10倍；4)乳胶微球所负载的黄曲霉毒素M1偶联抗体与黄曲霉毒素M1抗原为化学键偶合，比胶体金物理吸附稳定性好，准确度和精密度高；5)黄曲霉毒素M1检测装置结构简单，操作方便，成本较低，提高检测效率，适用性广；6)乳胶微球标记的黄曲霉毒素M1偶联抗体，产品CV值较小，同类产品进口厂家文献显示CV值。附图说明图1是本技术黄曲霉毒素M1检测装置示意图。图2是本技术反应微孔的结构示意图。图3是本技术试纸条的结构示意图。具体实施方式相关溶液的配置：如图1-3所示，一种黄曲霉毒素M1检测装置，包括：读数仪1，反应微孔2，试纸条4，插在读数仪1上内置样品参数的ID卡并对插在读数仪1内的试纸条4进行读数，所述反应微孔2中容置有乳胶微球偶联抗体，所述试纸条4包括底板41、样品垫42、硝酸纤维素膜43、吸水纸44；其中，所述样品垫42与吸水纸44设置在底板41的两端，在样品垫42与吸水纸44之间为硝酸纤维素膜43，在硝酸纤维素膜43(NC膜)上标记有检测线45和质控线46；所述质控线46靠近吸水纸44一侧，检测线45靠近样品垫42一侧；所述试纸条4的样品垫42一端插入反应微孔2中进行显色反应。本技术黄曲霉毒素M1检测装置检测黄曲霉毒素M1的过程：1)预热：打开恒温孵育器开关，检测前升温到56±1℃；2)标记样品：根据待检样本数量，取出相应数量的反应微孔和试纸条，在试纸条上标记区分样品；3)加液：将反应微孔放置在恒温孵育器上，用移液枪吸取待检样本溶液150μL，加到反应微孔中，反复吸打8次以上至混匀；4)孵育2min：将加样后的乳胶微球在56±1℃条件下孵育2min；5)反应8min：手持试纸条的Logo端将试纸条的样品垫插入反应微孔中，开始计时，8min判断结果，其它时间判断结果无效。读取结果6)读数仪系统：打开型号为E-K07的读数仪，插入相对应的本批定量产品ID卡和本批定量试纸条，设置读数仪进入“样品检测”模本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种黄曲霉毒素M1检测装置，包括：读数仪(1)，反应微孔(2)，试纸条(4)，插在读数仪(1)上内置样品参数的ID卡，其特征在于，所述反应微孔(2)中设有乳胶微球偶联的黄曲霉毒素M1抗体，所述试纸条(4)包括底板(41)、样品垫(42)、硝酸纤维素膜(43)、吸水纸(44)；其中，/n所述样品垫(42)与吸水纸(44)设置在底板(41)的两端，在样品垫(42)与吸水纸(44)之间为硝酸纤维素膜(43)，在硝酸纤维素膜(43)上标记有检测线(45)和质控线(46)；所述质控线(46)靠近吸水纸(44)一侧，检测线(45)靠近样品垫(42)一侧；所述试纸条(4)的样品垫(42)一端插入反应微孔(2)中进行显色反应。/n

【技术特征摘要】
1.一种黄曲霉毒素M1检测装置，包括：读数仪(1)，反应微孔(2)，试纸条(4)，插在读数仪(1)上内置样品参数的ID卡，其特征在于，所述反应微孔(2)中设有乳胶微球偶联的黄曲霉毒素M1抗体，所述试纸条(4)包括底板(41)、样品垫(42)、硝酸纤维素膜(43)、吸水纸(44)；其中，
所述样品垫(42)与吸水纸(44)设置在底板(41)的两端，在样品垫(42)与吸水纸(44)之间为硝酸纤维素膜(43)，在硝酸纤维素膜(43)上标记有检测线(45)和质控线(46)；所述质控线(46)靠近吸水纸(44)一侧，检测线(45)靠近样品垫(42)一侧；所述试纸条(4)的样品垫(42)一端插入反应微孔(2)中进行显色反应。


2.根据权利要求1所述的黄曲霉毒素M1检测装置，其特征在于，所述质控线(46)处设有羊抗鼠的IgG抗体捕获试剂；所述检测线(45)处设有AFM1-OVA抗原捕获试剂。


3.根据权利要求2所述的黄曲霉毒素M1检测装置，其特征在于，所述羊抗鼠的IgG抗体浓度为0.1mg/mL，...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘建龙，
申请(专利权)人：河北伊莱莎生物技术有限公司，
类型：新型
国别省市：河北;13