一种分泌黄芪甲苷单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种分泌黄芪甲苷单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于：所述杂交瘤细胞株于

【技术实现步骤摘要】
一种分泌黄芪甲苷单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用


[0001]本专利技术涉及免疫检测领域，具体为一种分泌黄芪甲苷单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用
。

技术介绍

[0002]黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，具有补气固表
、
利尿脱毒，排脓，敛疮生肌等功效
。
黄芪为常用中药，在中药制剂中以黄芪为君药的产品非常多，因此如何控制黄芪的质量至关重要
。
黄芪甲苷是黄芪主要有效成分之一，也是黄芪皂苷中具有代表性的单体，在抗衰老
、
调节免疫功能
、
保护心肌和大脑缺血等多方面具有显著作用
。
黄芪甲苷仅在
200nm
处有末端吸收，对
HPLC
色谱法紫外检测器检测不利，噪音对结果影响较大，灵敏度也较低
。2005
年版
《
中国药典
》
采用蒸发光散射检测器测定，操作繁琐，检测时间较长，价格昂贵，不利于制药公司及基层医疗单位普及
。
因此研究开发成本低廉
、
检测迅速
、
操作简便
、
灵敏度高的检测技术和产品势在必行
。
酶联免疫吸附分析法正逐渐应用于中药含量检测，该类方法除具有灵敏
、
快速
、
简便的优点外，还有可同时检测多个样品
、
特异性强等特点
。
[0003]在国内也公开了一些有关黄芪甲苷的检测的专利，例如：公开号为
CN116183749A
，公开了仁术健胃颗粒中黄芪甲苷的检测方法，仁术健胃颗粒中黄芪甲苷的测定包括以下步骤：步骤
1、
对照品溶液的制备；步骤
2、
供试品溶液的制备；步骤
3、
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，蒸发光散射检测器测定
。
本专利技术建立的检测方法，分析快速
、
准确，阴性样品没有干扰，有较强的的专属性，良好的重现性和稳定性，所得到的色谱图色谱峰峰型较好，能客观评价仁术健胃颗粒的质量
。
还有公开号为
CN116754667A
，提供了一种参芪健胃颗粒质量标准增加含量测定方法，基于高效液相色谱法测定参芪健胃颗粒中黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法，目的是为了更准确地检测参芪健胃颗粒中有效成分的含量，对药品质量进行严格控制
。
本方法采用高效液相色谱法，对黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷等有效成分进行分离和检测
。
此外，本专利技术还提供了供试品溶液的制备步骤，操作简便，易于理解和实施
。
本专利技术具有较高的准确性
、
良好的灵敏度和广泛的适用性，对药品质量控制具有重要意义，有利于保障药品的安全性和疗效
。
[0004]目前，黄芪甲苷的检测方法主要有紫外分光光度法
、
薄层扫描法
、
荧光法和高效液相色谱法
、
近年来，随着新型检测器的不断出现以及分析检测手段的进步，一些新的方法，如液相
‑
质谱联用分析方法等新方法也用来检测黄芪甲苷药材及制剂中黄芪甲苷含量，但是仪器分析的样品前处理比较繁杂，对操作人员要求较高，仪器本身也很昂贵，这些因素都限制了它的使用范围，酶联免疫分析方法具有高灵敏度
、
高特异性
、
操作简单
、
快速
、
成本较低等优点
、
适用于大批量样品的筛选
。

技术实现思路

[0005]为解决上述技术问题，本专利技术提供了对黄芪甲苷具有较高亲和力和检测灵敏度的
黄芪甲苷单克隆抗体，可以用来建立黄芪甲苷的酶联免疫检测方法，为间接竞争
ELISA
试剂盒以及胶体金试纸条的研发推广奠定基础
。
从而能快速检测中药药材
、
黄芪颗粒
、
黄芪生脉饮等样品中的黄芪含量
。
[0006]本专利技术的第一个目的是提供一种分泌黄芪甲苷单克隆抗体的杂交瘤细胞株，所述杂交瘤细胞株于
2023
年
08
月
15
日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号
CGMCC No. 45655。
[0007]本专利技术的第二个目的是提供上述分泌黄芪甲苷单克隆抗体的杂交瘤细胞株在制备黄芪甲苷单克隆抗体中的应用
。
[0008]本专利技术的第三个目的是提供上述分泌黄芪甲苷单克隆抗体的杂交瘤细胞株在黄芪甲苷检测中的应用
。
[0009]本专利技术的第四个目的是提供黄芪甲苷单克隆抗体，所述黄芪甲苷单克隆抗体是通过上述杂交瘤细胞株分泌得到
。
[0010]本专利技术的第五个目的是提供上述黄芪甲苷单克隆抗体在黄芪甲苷检测中的应用
。
[0011]本专利技术的第六个目的是提供一种黄芪甲苷检测产品，所述黄芪甲苷检测产品包括上述黄芪甲苷单克隆抗体或上述分泌黄芪甲苷单克隆抗体的杂交瘤细胞株
。
当然，检测产品可制备成免疫亲和柱
、
试剂盒
、
试剂
、
试纸条等任何形式
。
[0012]进一步，所述黄芪甲苷检测产品为黄芪甲苷酶联免疫检测试剂盒，所述黄芪甲苷酶联免疫检测试剂盒，包括盒体和盒内的一块酶标板
、12
瓶试剂和放试剂的下凹瓶位，其特征在于：酶标板采用的是包被了羊抗鼠的二抗，所述的
12
瓶试剂分别为6瓶不同浓度的黄芪甲苷标准溶液
、1
瓶黄芪甲苷酶标记物
、1
瓶抗体工作液
、1
瓶显色液
、1
瓶终止液
、1
瓶浓缩样本复溶液，1瓶
10
倍浓缩清洗液，所述试剂瓶都设有相应下凹瓶位，所述抗体工作液的抗体为权利要求3所述的黄芪甲苷单克隆抗体
。
[0013]进一步，所述试剂盒的盒体是硬纸盒，所述酶标板为聚苯乙烯板，放置于真空铝铂袋内，所述不同浓度的黄芪甲苷标准溶液均采用黑色帽的棕色玻璃瓶，所述酶标记物用蓝色帽的白色半透明
PE
塑料瓶，所述抗体工作液用绿色帽的白色半透明
PE
塑料瓶，所述显色液用棕色
PE
塑料瓶，所述终止液用白色帽的半透明白色
PE
塑料瓶，所述浓缩样本复溶液用白色帽的半透明白色
PE
塑料瓶，
10
倍浓缩清洗液用白色帽的半透明白色
PE
塑料瓶，所述下凹瓶位由塑料泡沫制成
。
[0014]进一步，所述酶标板是包被了羊抗鼠的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种分泌黄芪甲苷单克隆抗体的杂交瘤细胞株， 其特征在于： 所述杂交瘤细胞株于
2023
年
08
月
15
日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号
CGMCC No. 45655。2.
权利要求1所述的杂交瘤细胞株在黄芪甲苷检测中的应用
。3.
一种黄芪甲苷单克隆抗体， 其特征在于： 所述黄芪甲苷克隆抗体是通过权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌得到
。4.
权利要求3所述的黄芪甲苷单克隆抗体在黄芪甲苷检测中的应用
。5.
一种黄芪甲苷检测产品， 其特征在于： 所述黄芪甲苷检测产品包括权利要求3所述的黄芪甲苷单克隆抗体或权利要求1所述的杂交瘤细胞株
。6.
根据权利要求5所述的一种黄芪甲苷检测产品， 其特征在于：所述黄芪甲苷检测产品为免疫亲和柱
、
试剂盒
、
试剂或试纸条
。7.
根据权利要求5所述的一种黄芪甲苷检测产品， 其特征在于：所述黄芪甲苷检测产品为黄芪甲苷酶联免疫检测试剂盒，所述黄芪甲苷酶联免疫检测试剂盒，包括盒体和盒内的一块酶标板
、12
瓶试剂和放试剂的下凹瓶位，酶标板采用的是包被了羊抗鼠的二抗，所述的
12
瓶试剂分别为6瓶不同浓度的黄芪甲苷标准溶液
、1
瓶黄芪甲苷酶标记物
、1
瓶抗体工作液
、1
瓶显色液
、1
瓶终止液
、1
瓶浓缩样本复溶液，1瓶
10
倍浓缩清洗液，所述试剂瓶都设有相应下凹瓶位，所述抗体工作液的抗体为权利要求3所述的黄芪甲苷单克隆抗体
。8.
根据权利要求6所述的一种黄芪甲苷检测产品， 其特征在于：所述试剂盒的盒体是硬纸盒，所述酶标板为聚苯乙烯板，放置于真空铝铂袋内，所述不同浓度的黄芪甲苷标准溶液均采用黑色帽的棕色玻璃瓶，所述酶标记物用蓝色帽的白色半透明
PE
塑料瓶，所述抗体工作液用绿色帽的白色半透明
PE
塑料瓶，所述显色液用棕色
PE
塑料瓶，所述终止液用白色帽的半透明白色
PE
塑料瓶，所述浓缩样本复溶液用白色帽的半透明白色
PE
塑料瓶，
10
倍浓缩清洗液用白色帽的半透明白色
PE
塑料瓶，所述下凹瓶位由塑料泡沫制成
。9.
根据权利要求7所述的一种黄芪甲苷检测产品，其特征在于：所述酶标板是包被了羊抗鼠的二抗的聚苯乙烯板，宽度为
85mm
，长度为
126mm
，包...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘建龙，
申请(专利权)人：河北伊莱莎生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：