一种好氧反硝化菌的现场快速扩培方法技术

本发明专利技术属于微生物培养技术领域，公开了一种好氧反硝化菌的现场快速扩培方法，包括如下步骤：(1)将好氧反硝化菌菌液加入一级培养罐内并加入培养基，加水稀释，进行充氧和搅拌，培养得到菌液；(2)将2个二级培养罐进行消毒处理，每个培养罐加水稀释，进行充氧和搅拌，培养得到菌液；(3)将2个三级培养罐进行消毒处理，将步骤(2)得到的菌液接入三级培养罐内，装入培养基加水，进行充氧和搅拌，培养得到菌液；(4)将步骤(3)得到的菌液一半转移至三级培养罐，加入培养基加水，进行充氧和搅拌，培养得到2吨好氧反硝化菌菌液；(5)根据需要，可重复步骤(3)、(4)得到吨级菌液。本发明专利技术扩培方法操作简单，投入经费小，实用性强。

A method of rapid field culture of aerobic denitrifying bacteria

The invention belongs to the technical field of microbial culture, and discloses a field rapid expansion culture method of aerobic denitrifying bacteria, which comprises the following steps: (1) adding aerobic denitrifying bacteria liquid into the primary culture tank and adding the culture medium, adding water to dilute, charging and stirring, and cultivating to obtain the bacteria liquid; (2) disinfecting two secondary culture tanks, adding water to dilute each culture tank, and filling Oxygen and agitation are used to obtain the bacterial solution; (3) two tertiary tanks are sterilized, and the bacterial solution obtained in step (2) is put into the tertiary tank, which is then filled with water, oxygenated and agitated to obtain the bacterial solution; (4) the first half of the bacterial solution obtained in step (3) is transferred to the tertiary tank, which is then filled with water, oxygenated and agitated to obtain 2 tons of aerobic denitrification According to the needs, steps (3) and (4) can be repeated to obtain ton level bacterial solution. The method has the advantages of simple operation, small investment and strong practicability.

【技术实现步骤摘要】
一种好氧反硝化菌的现场快速扩培方法
本专利技术属于微生物培养
，涉及一种好氧反硝化菌的现场快速扩培方法。
技术介绍
好氧反硝化菌是利用好氧反硝化酶的作用，在有氧条件下进行反硝化作用的一类反硝化菌，是一类好氧或兼性好氧、以有机碳作为能源的异养硝化菌，主要存在于假单胞菌属、产碱杆菌属、副球菌属和芽孢杆菌属等。由于微生物菌剂在应用时必须保持有效活菌数和细菌的活性，但是项目情况随时在发生变化并且微生物菌剂投加具有持续性，若在菌剂厂生产包装好在运往现场则会导致运费高、现场保存时间长等原因增加项目成本和影响细菌质量。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是克服上述缺陷，提供一种好氧反硝化菌的现场快速扩培方法，为有效菌提供增殖所需的营养物质、氧气与空间，实现在项目所在地进行有效菌现场扩培，保证扩培与应用有效连接，保证有效微生物的活菌数，还能够大幅度降低运输成本、时间成本等。为了解决上述技术问题，本专利技术的技术方案为：一种好氧反硝化菌的现场快速扩培方法，包括如下步骤：(1)实验室接种扩培好氧反硝化菌菌液，作为现场扩培的好氧反硝化菌菌种液；(2)将微孔曝气盘连接上曝气管，曝气管上连接调节阀门用于调节曝气量，放在一级培养罐内，利用75％浓度酒精对一级培养罐、曝气盘、曝气管消毒，并用纱布和玻璃绳对桶口进行绑扎，并对纱布进行消毒；(3)将好氧反硝化菌菌液加入一级培养罐内并加入配置好的培养基，加水稀释至20L，开启微型曝气机进行充氧和搅拌，培养48小时得到菌液；(4)将2个二级培养罐进行步骤(2)处理，将步骤(3)得到的菌液分别接入2个二级培养罐内，并将培养基平均装进2个二级培养罐内，每个培养罐加水稀释至50L，开启微型曝气机进行充氧和搅拌，培养48小时得到菌液；(5)将2个三级培养罐进行步骤(2)处理，将步骤(4)得到的菌液接入其中一个三级培养罐内，并将培养基装进三级培养罐内，加水至500L，开启微型曝气机进行充氧和搅拌，培养48小时得到菌液；(6)将步骤(5)得到的菌液转移250L至另外一个三级培养罐，并将培养基装进两个三级培养罐内，加水至1000L，开启微型曝气机对两个三级培养罐进行充氧和搅拌，培养48小时，得到2吨好氧反硝化菌菌液；(7)根据需要，可重复步骤(5)、(6)得到吨级菌液。优选的，所述细菌菌种的接种比≥15％；其中一级扩培接种比为15％，二级扩培和三级扩培接种比为20％，吨级扩培接种比为25％，使目标细菌成为绝对优势细菌。优选的，步骤(3)所述好氧反硝化菌菌液的加入量为3L。优选的，所述一级培养罐、二级培养罐、三级培养罐的体积比为1:3:50。优选的，步骤(2)所述微孔曝气盘是利用微孔曝气管盘成，所述曝气管是具有相同管径的塑料软管，所述曝气管在培养罐外部分配套安装阀门。优选的，步骤(3)所述微型曝气机根据不同培养罐大小选择不同参数的曝气机，所述曝气机进气口用纱布包扎，减少空气中粉尘的进入。优选的，所述一级培养罐、二级培养罐、三级培养罐的罐口均用纱布进行绑扎并定期使用酒精消毒，保证排气和散热。优选的，所述好氧反硝化菌培养基为市场上常用培养基，配制使用时将培养基的各组分用小型容器溶解，配成水剂形态使用。优选的，步骤(7)为利用已扩培好的好氧反硝化菌菌液作为菌种液可持续扩培。上述培养条件为：温度时间pH溶解氧接种比例20-30℃48小时/每级7-7.54-6mg/L≥15％与现有技术相比本专利技术的有益效果是：(1)本专利技术扩培方法，以实验室好氧反硝化细菌制剂产品为原始菌种，通过经济的细菌培养基和简易的扩培方法，在项目现场进行扩培，培养后的好氧反硝化菌液可在使用现场立即投加使用，节约运输成本和时间成本，并且可以避免长期保持带来的负面影响。(2)本专利技术扩培方法通过为有效菌提供增殖所需的营养物质、氧气与空间，实现在项目所在地进行有效菌现场扩培，保证扩培与应用有效连接，保证有效微生物的活菌数，通过本专利技术方法扩培出的好氧反硝化菌菌液的浓度为每毫升菌液中含菌约108个，还能够大幅度降低运输成本、时间成本。(3)本专利技术扩培方法通过提高接种比例，一级扩培接种比为15％，二级扩培和三级扩培接种比为20％，吨级扩培接种比为25％，使目标细菌成为绝对优势细菌。(4)本专利技术扩培方法操作简单，投入经费小，实用性强。附图说明图1为本专利技术现场快速扩培两吨好氧反硝化菌菌液的工艺流程示意图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1如图1所示，一种好氧反硝化菌的现场快速扩培方法，培养条件：温度20℃；pH＝7；溶解氧4mg/L；包括如下步骤：(1)实验室接种扩培好氧反硝化菌菌液，作为现场扩培的好氧反硝化菌菌种液；(2)将微孔曝气盘连接上曝气管，曝气管上连接调节阀门用于调节曝气量，放在20L的一级培养罐内，利用75％浓度酒精对一级培养罐、曝气盘、曝气管消毒，并用纱布和玻璃绳对桶口进行绑扎，并对纱布进行消毒；(3)将3L好氧反硝化菌菌液加入一级培养罐内并加入配置好的培养基，加水稀释至20L，开启微型曝气机进行充氧和搅拌，培养48小时得到菌液；(4)将2个60L的二级培养罐进行步骤(2)处理，将步骤(3)得到的20L菌液分别接入2个二级培养罐内，并将培养基平均装进2个二级培养罐内，每个培养罐加水稀释至50L，开启微型曝气机进行充氧和搅拌，培养48小时得到菌液；(5)将2个1000L的三级培养罐进行步骤(2)处理，将步骤(4)得到的100L菌液接入其中一个三级培养罐内，并将培养基装进三级培养罐内，加水至500L，开启微型曝气机进行充氧和搅拌，培养48小时得到菌液；(6)将步骤(5)得到的菌液转移250L至另外一个三级培养罐，并将培养基装进两个三级培养罐内，加水至1000L，开启微型曝气机对两个三级培养罐进行充氧和搅拌，培养48小时，得到2吨好氧反硝化菌菌液。实施例2如图1所示，一种好氧反硝化菌的现场快速扩培方法，培养条件：温度25℃；pH＝7.5；溶解氧5mg/L；包括如下步骤：(1)实验室接种扩培好氧反硝化菌菌液，作为现场扩培的好氧反硝化菌菌种液；(2)将微孔曝气盘连接上曝气管，曝气管上连接调节阀门用于调节曝气量，放在20L的一级培养罐内，利用75％浓度酒精对一级培养罐、曝气盘、曝气管消毒，并用纱布和玻璃绳对桶口进行绑扎，并对纱布进行消毒；本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种好氧反硝化菌的现场快速扩培方法，其特征在于：包括如下步骤：/n(1)实验室接种扩培好氧反硝化菌菌液，作为现场扩培的好氧反硝化菌菌种液；/n(2)将微孔曝气盘连接上曝气管，曝气管上连接调节阀门用于调节曝气量，放在一级培养罐内，利用75％浓度酒精对一级培养罐、曝气盘、曝气管消毒，并用纱布和玻璃绳对桶口进行绑扎，并对纱布进行消毒；/n(3)将好氧反硝化菌菌液加入一级培养罐内并加入配置好的培养基，加水稀释至20L，开启微型曝气机进行充氧和搅拌，培养48小时得到菌液；/n(4)将2个二级培养罐进行步骤(2)处理，将步骤(3)得到的菌液分别接入2个二级培养罐内，并将培养基平均装进2个二级培养罐内，每个培养罐加水稀释至50L，开启微型曝气机进行充氧和搅拌，培养48小时得到菌液；/n(5)将2个三级培养罐进行步骤(2)处理，将步骤(4)得到的菌液接入其中一个三级培养罐内，并将培养基装进三级培养罐内，加水至500L，开启微型曝气机进行充氧和搅拌，培养48小时得到菌液；/n(6)将步骤(5)得到的菌液转移250L至另外一个三级培养罐，并将培养基装进两个三级培养罐内，加水至1000L，开启微型曝气机对两个三级培养罐进行充氧和搅拌，培养48小时，得到2吨好氧反硝化菌菌液；/n(7)根据需要，可重复步骤(5)、(6)得到吨级菌液。/n...

【技术特征摘要】
1.一种好氧反硝化菌的现场快速扩培方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)实验室接种扩培好氧反硝化菌菌液，作为现场扩培的好氧反硝化菌菌种液；
(2)将微孔曝气盘连接上曝气管，曝气管上连接调节阀门用于调节曝气量，放在一级培养罐内，利用75％浓度酒精对一级培养罐、曝气盘、曝气管消毒，并用纱布和玻璃绳对桶口进行绑扎，并对纱布进行消毒；
(3)将好氧反硝化菌菌液加入一级培养罐内并加入配置好的培养基，加水稀释至20L，开启微型曝气机进行充氧和搅拌，培养48小时得到菌液；
(4)将2个二级培养罐进行步骤(2)处理，将步骤(3)得到的菌液分别接入2个二级培养罐内，并将培养基平均装进2个二级培养罐内，每个培养罐加水稀释至50L，开启微型曝气机进行充氧和搅拌，培养48小时得到菌液；
(5)将2个三级培养罐进行步骤(2)处理，将步骤(4)得到的菌液接入其中一个三级培养罐内，并将培养基装进三级培养罐内，加水至500L，开启微型曝气机进行充氧和搅拌，培养48小时得到菌液；
(6)将步骤(5)得到的菌液转移250L至另外一个三级培养罐，并将培养基装进两个三级培养罐内，加水至1000L，开启微型曝气机对两...

【专利技术属性】
技术研发人员：窦建军，李雯，蒋克梅，刘光友，
申请(专利权)人：重庆沐联环境工程有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆;50