一种编码人GM-CSF与多串连表位融合的mRNA癌症疫苗制造技术

本发明专利技术提供了一种编码人GM‑CSF与多串连表位融合的mRNA癌症疫苗。编码人GM‑CSF与三个串连hTERT表位融合的pVec‑GM‑CSF‑hTes、编码人GM‑CSF与分别来自MUC1和Kras以及EGFR的三个串连表位融合的pVec‑GMKE以及编码人白细胞介素‑12的pVec‑hIL‑12被分别构建，并被作为模板用于产生相应的体外转录的mRNAs，进一步被混合作为mRNA癌症疫苗。该mRNA癌症疫苗含有用作免疫佐剂的人GM‑CSF、多个串连表位构成的多表位癌症抗原以及用于增强免疫治疗作用的hIL‑12。

A cancer vaccine encoding fusion of human GM-CSF and multiple tandem epitopes

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种编码人GM-CSF与多串连表位融合的mRNA癌症疫苗描述专利技术背景本专利技术涉及一种生物核酸mRNA疫苗，尤其是涉及一种编码人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)与多串连表位融合的mRNA癌症疫苗。通过刺激免疫系统来抗现有癌症的治疗性癌症疫苗是治疗癌症的最有效的药物，这是因为癌症疫苗可引起机体的免疫应答并产生免疫记忆。确保癌症疫苗成功的第一步是癌症疫苗的抗原设计。用于癌症疫苗的大多数抗原是肿瘤相关抗原(tumor-associatedantigens，TAAs)，例如人端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase，hTERT)、粘蛋白1(mucin1，MUC1)、Kras和表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR)等。端粒位于真核染色体的末端，是由串连重复非转录DNA序列(TTAGGG)和端粒结合蛋白组成的特殊“帽”结构。端粒的作用是维持染色体完整性和控制细胞分裂周期。染色体的端粒随着每次连续的细胞分裂而变短。当端粒收缩到一定程度时，细胞停止分裂并处于静止状态。端粒酶能够添加TTAGGG本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种mRNA癌症疫苗，包括：a.GM‑CSF‑hTes mRNA；b.GMKE mRNA；和c.人白细胞介素‑12(hIL‑12)mRNA。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种mRNA癌症疫苗，包括：a.GM-CSF-hTesmRNA；b.GMKEmRNA；和c.人白细胞介素-12(hIL-12)mRNA。2.权利要求1的GM-CSF-hTesmRNA，其中GM-CSF-hTesmRNA是以pVec-GM-CSF-hTes作为模板和通过体外转录产生的。3.权利要求2的pVec-GM-CSF-hTes，其中pVec-GM-CSF-hTes编码人GM-CSF与三个串连hTERT表位融合基因，包括GM-CSF(无终止密码子)-接头-HindIII-hTERT(I540-548)-11aa-hTERT(572Y-580)-2aa-hTERT(988Y-997)即GM-CSF-hTes。4.权利要求2的pVec-GM-CSF-hTes，其中用于PCR扩增和获得人GM-CSF(无终止密码子)的反向引物的核苷酸序列与SEQIDNO：3相同或至少53％相同。5.权利要求2的pVec-GM-CSF-hTes，其中用于PCR扩增并获得hTERT(I540-548)-11aa-hTERT(572Y-580)-2aa-hTERT(988Y-997)的正向引物的核苷酸序列与SEQIDNO：16相同或至少69％相同。6.权利要求2的pVec-GM-CSF-hTes，其中用于PCR扩增并获得hTERT(I540-548)-11aa-hTERT(572Y-580)-2aa-hTERT(988Y-997)的反向引物的核苷酸序列与SEQIDNO：17相同或至少68％相同。7.权利要求2的pVec-GM-CSF-hTes，其中hTERT(I540-548)-11aa-hTERT(572Y-580)-2aa-hTERT(988Y-997)的氨基酸序列与SEQIDNO：8相同或至少64％相同。8.权利要求2的pVec-GM-CSF-hTes，其中hTERT(I540-548)-11aa-hTERT(572Y-580)-2aa-hTERT(988Y-997)的核苷酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁恩雨，
申请(专利权)人：丁恩雨，
类型：发明
国别省市：美国,US