定量检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的时间分辨免疫层析试纸条及其制备方法技术

本发明专利技术揭示了一种定量检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的试纸条的制备方法，包括：将硝酸纤维素膜包被检测线与质控线，检测线使用NGAL包被抗体，质控线使用NGAL捕获抗体的二抗；制备结合垫，其包括：离心洗涤捕获抗体，将纳米增强型时间分辨荧光微球与NGAL捕获抗体溶解于PBS，加入EDC室温反应30min‑12h；加入封闭液封闭30min‑12小时；离心后PBS洗涤沉淀，使用微球稀释液稀释后定量喷涂到第一载体；其中，捕获抗体为NGAL捕获抗体；还包括制备样品垫，包括将第二载体浸泡于含有0.9％NaCl和0.5‑3％的表面活性剂S9的水溶液中，然后烘干。

【技术实现步骤摘要】
定量检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的时间分辨免疫层析试纸条及其制备方法
本专利技术涉及临床免疫学检测领域，具体涉及一种采用时间分辨免疫层析技术进行定量检测试纸条及其制备方法。
技术介绍
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)是lipocalin的一种，最初是在激活中性粒细胞中被发现的一种小分子量分泌性蛋白，现代研究表明，NGAL是诊断急性肾损伤的最有效生物学标志之一，也是早期糖尿病肾病的有效标志物之一。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供应用于临床的检测NGAL的定量检测试纸条，以提供高灵敏度、特异性的检测，满足临床的需求。为实现上述专利技术目的，本专利技术提供定量检测NGAL的时间分辨免疫层析试纸条的制备方法，其包括：将硝酸纤维素膜包被检测线与质控线，检测线使用NGAL包被抗体，质控线使用NGAL捕获抗体的二抗；还包括制备结合垫，其包括：使用洗涤液离心洗涤捕获抗体，洗涤液为纯水；纳米增强型时间分辨荧光微球与NGAL捕获抗体溶解于PH6-8、浓度0.05mol/L的PBS，加入EDC使终浓度为10mg/ml，室温反应30min-12h；加入封闭液封闭30min-12h，封本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.定量检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的时间分辨免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，所述方法包括，将硝酸纤维素膜包被检测线与质控线，所述检测线使用NGAL包被抗体，所述质控线使用NGAL捕获抗体的二抗；还包括制备结合垫，其包括：使用洗涤液离心洗涤捕获抗体，所述洗涤液为纯水；纳米增强型时间分辨荧光微球与NGAL捕获抗体溶解于PH6‑8、浓度0.05mol/L的PBS，加入EDC使终浓度为10mg/ml，室温反应30min‑12h；加入封闭液封闭30min‑12h，所述封闭液含有0.1‑1％F68、10‑50mmol/ml甘氨酸；离心后PBS洗涤沉淀，使用微球稀释液稀释到30‑120倍，所...

【技术特征摘要】
1.定量检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的时间分辨免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，所述方法包括，将硝酸纤维素膜包被检测线与质控线，所述检测线使用NGAL包被抗体，所述质控线使用NGAL捕获抗体的二抗；还包括制备结合垫，其包括：使用洗涤液离心洗涤捕获抗体，所述洗涤液为纯水；纳米增强型时间分辨荧光微球与NGAL捕获抗体溶解于PH6-8、浓度0.05mol/L的PBS，加入EDC使终浓度为10mg/ml，室温反应30min-12h；加入封闭液封闭30min-12h，所述封闭液含有0.1-1％F68、10-50mmol/ml甘氨酸；离心后PBS洗涤沉淀，使用微球稀释液稀释到30-120倍，所述微球稀释液为PBS溶液，所述PBS溶液含有1-3％吐温20及20％海藻糖或蔗糖；将稀释的微球定量喷涂到第一载体；还包括制备样品垫，其包括将第二载体浸泡于含有0.9％NaCl和0.5-3％的表面活性剂S9的水溶液中，然后烘干；其中，所述捕获抗体为NGAL捕获抗体，所述百分比浓度为质量百分比。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述纳米增强型时间分辨荧光微球与捕获抗体溶解于PH6、浓度0.05mol/L的PBS，加入EDC使终浓度为10mg/ml，室温反应30min；加入封闭液封闭12h，所述封闭液含有1...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵伟，刘佳佳，王丽君，
申请(专利权)人：苏州遵道生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32