牛λ3干扰素突变体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种牛λ3干扰素突变体及其制备方法和应用。属于生物技术领域。是以登录号为XP_010847513.1的牛λ3干扰素氨基酸序列为原始序列的第5位氨基酸由半胱氨酸突变成精氨酸，第19位氨基酸由丝氨酸突变成脯氨酸，得到的牛λ3干扰素突变体。进一步将突变体进行氨基酸单位点突变、双位点突变和多位点突变，获得多个抗病毒活性提高的牛λ3干扰素突变体。本发明专利技术利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中表达的所述牛λ3干扰素突变体的抗病毒活性大幅度提高。本发明专利技术提供的牛λ3干扰素突变体能够用于制备预防或治疗牛病毒性疾病的药物或试剂。

Bovine interferon lambda 3 mutant and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
牛λ3干扰素突变体及其制备方法和应用
本专利技术涉及牛λ3干扰素突变体及其制备方法和应用，属于生物

技术介绍
干扰素是一类在同种细胞上具有抗病毒活性的蛋白质，其活性的发挥又受细胞基因组的调节和控制，涉及RNA和蛋白质的合成。IFN蛋白家族根据其编码基因的序列、染色体定位和受体特异性分为Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型干扰素。Ⅰ型干扰素包括IFN-α、IFN-β、IFN-ω、IFN-δ、IFN-ε、IFN-ζ、IFN-τ等，哺乳动物中主要是IFN-α和IFN-β，Ⅰ型干扰素具有较强的抗病毒活性，主要通过干扰病毒的复制抑制其增殖，还具有抗肿瘤和免疫调节的功能。Ⅱ型干扰素只有IFN-γ一个成员，又称为免疫干扰素，主要作用是激活巨噬细胞杀灭微生物。Ⅲ型干扰素是新发现的细胞因子，包括λ1(IL-29)、λ2(IL-28a)和λ3(IL-28b)。Ⅲ型干扰素与Ⅰ型干扰素关系密切，但有特殊的生理学功能，如刺激主要组织相容性复合体(majorhistocom-patibilitycomplex，MHC)分子的活化和表达，调节先天免疫和获得性免疫等。由于干扰素具有广谱抗病毒、抗肿瘤的活性以及强大的免疫调节作本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种牛λ3干扰素在制备干扰素突变体中的应用，，其特征在于：所述牛λ3干扰氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示，其编码基因的多核苷酸序列为(a)或(b)或(c)所示：(a)SEQ ID No.2所示的多核苷酸序列；或(b)与SEQ ID No.2的互补序列在严谨杂交条件能够进行杂交的多核苷酸序列，该多核苷酸编码的蛋白仍具有干扰素的功能或活性；或(c)与SEQ ID No.2的多核苷酸序列至少有80％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸编码的蛋白仍具有干扰素的功能或活性；优选的，与SEQ ID No.2的多核苷酸序列至少有85％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸编码的蛋白仍具有干扰素的...

【技术特征摘要】
1.一种牛λ3干扰素在制备干扰素突变体中的应用，，其特征在于：所述牛λ3干扰氨基酸序列为SEQIDNO.1所示，其编码基因的多核苷酸序列为(a)或(b)或(c)所示：(a)SEQIDNo.2所示的多核苷酸序列；或(b)与SEQIDNo.2的互补序列在严谨杂交条件能够进行杂交的多核苷酸序列，该多核苷酸编码的蛋白仍具有干扰素的功能或活性；或(c)与SEQIDNo.2的多核苷酸序列至少有80％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸编码的蛋白仍具有干扰素的功能或活性；优选的，与SEQIDNo.2的多核苷酸序列至少有85％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸编码的蛋白仍具有干扰素的功能或活性；更优选的，与SEQIDNo.2的多核苷酸序列至少有90％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸编码的蛋白仍具有干扰素的功能或活性。2.一种牛λ3干扰素突变体，其特征在于：是权利要求1所述的牛λ3干扰素氨基酸序列SEQIDNO.1为原始序列的第5位氨基酸由半胱氨酸突变成精氨酸，第19位氨基酸由丝氨酸突变成脯氨酸，得到的牛λ3干扰素突变体；所述突变体的氨基酸序列为SEQIDNO.3所示，其编码基因的核苷酸序列为SEQIDNO.4所示。3.一种牛λ3干扰素突变体，其特征在于：是将权利要求2所述的牛λ3干扰素突变体的第125位氨基酸由甲硫氨酸突变成苏氨酸，164位氨基酸由赖氨酸突变成谷氨酸，得到的牛λ3干扰素突变体；所述突变体的氨基酸序列为SEQIDNO.5所示，其编码基因的核苷酸序列为SEQIDNO.6所示。4.一种牛λ3干扰素突变体，其特征在于：是将权利要求3所述的牛λ3干扰素突变体进行E51A、T57R、F66R、H76R、T81S、H86Q、A109S、H117R、L124H、Q127R、I129V、S131A、T142M、S144G、S145P、S165P或D167S中的任何一种氨基酸单位点突变获得的牛λ3干扰素突变体；优选为，将权利要求3所述的牛λ3干扰素突变体进行F66R、A109S、L124H、S131A、S145P或S165P中的任何一种氨基酸单位点突变获得的牛λ3干扰素突变体；其中，将权利要求3所述的牛λ3干扰素突变体进行F66R氨基酸单位点突变获得的牛λ3干扰素突变体的氨基酸序列为SEQIDNO.7所示，其编码基因的核苷酸序列为SEQIDNO.8所示。5.一种牛λ3干扰素突变体，其特征在于：将权利要求3所述的牛λ3干扰素突变体进行F66R-A109S、F66R-L124H、F66R-S131A、F66R-S145P、F66R-S165P、A109S-L124H、A109S-S131A、A109S-S145P、A109S-S165P、L124H-S131A、L124H-S145、L124H-S165P、S131A-S145P、S131A-S165P或S145P-S165P中的任何一种氨基酸双位点突变获得的牛λ3干扰素突变体；优选为，将权利要求3所述的牛λ3干扰素突变体进行F66R-L124H、F66R-S145P或A109S-S131A任何一种氨基酸双位点突变获得的牛λ3干扰素突变体；其中，将权利要求3所述的牛λ3干扰素突变体进行F66R-L124H氨基酸双位点突变获得的牛λ3干扰素突变体的氨基酸序列为SEQIDNO.9所示，其编码基因的核苷酸序列为SEQIDNO.10所示。6.一种牛λ3干扰素突变体，其特征在于：将权利要求3所述的牛λ3干扰素突变体进行F66R-A109S-L124H、F66R-A109S-S131A、F66R-A109S-S145P、F66R-L124H-S131A、F66R-L124H-S145P、F66R-S131A-S145P、A109S-L124H-S131A或A109S-S131A-S145P任何一种氨基酸多位点突变获得的牛λ3干扰素突变体；优选为，将权利要求3所述的牛λ3干扰素突变体进行F66R-L124H-S145P氨基酸多位点突变获得的牛λ3干扰素突变体；其中，将权利要求3所述的牛λ3干扰素突变体进行F66R-L124H-S145P...

【专利技术属性】
技术研发人员：易咏竹，沈兴家，唐顺明，赵璐璐，赵泽，邵丽萍，王朋，魏珍珍，
申请(专利权)人：江苏科技大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32