一种树形金银花组培苗快速繁殖的继代培养基制造技术

本发明专利技术公开了一种树形金银花组培苗快速繁殖的继代培养基，该培养基既可作为金银花外植体诱导培养基，也可作为壮苗培养基，繁殖系数达到5以上，且增殖不定芽长势整齐、健壮，生长周期15‑25天，培育的不定芽已达到壮苗的要求，可进行生根培养，无需再进行壮苗培养，缩短生产周期。

A Subculture Medium for Rapid Propagation of Tissue Culture Seedlings of Tree Honeysuckle

【技术实现步骤摘要】
一种树形金银花组培苗快速繁殖的继代培养基
本专利技术涉及园艺学中植物栽培技术，尤其涉及一种树形金银花组培苗快速繁殖的继代培养基。
技术介绍
金银花是药材名称，为忍冬科忍冬属植物忍冬(LonicerajaponicaThunb.)的干燥花蕾或带初开的花，别名忍冬花、双花、金花、银花等，是大宗传统中药材，被国家定为重点发展的名贵中药材。近年来，由于金银花的需求量大增以及其可观的经济价值，除了山东平邑、河南封丘、河北巨鹿等道地产区大规模种植外，很多非传统产区，比如四川、湖南、浙江、广西、重庆等地也都积极种植。目前栽培上，金银花繁殖方式有扦插、嫁接、分根、压条等无性繁殖方式，也有种子繁殖的有性繁殖方式。随着生物技术的发展，利用植物组织培养技术培育无毒优质苗木已成为主流。国内关于金银花组织培养技术研究的报道颇多，大部分研究都停留在试验阶段，离规模化生产的要求还比较远，主要原因是繁殖系数低，苗木白化、黄化、枯死现象严重，无法快速生产大量健壮的繁殖材料。金银花繁殖系数低，最直接也是最重要的原因是继代培养基不合适，因此苗木繁殖能力差。研究人员也意识到这一点，花大量的时间和精力调制继代培养基配方，但结果不尽如人意。本专利申请人收集了近年来关于金银花继代培养基公开配方，发现绝大多数配方以MS为基础培养基，附加不同种类及浓度的细胞分裂素和生长素。使用这些配方普遍存在的问题是繁殖系数偏低、长势慢、苗不整齐，出现黄化、白化、枯顶等现象，无法规模化生产。现有技术培养金银花、树形金银花组培苗快速繁殖一般是采用MS培养基，有两个方向：一是采用MS培养基，附加不同种类和浓度的细胞分裂素和生长素的配方，例如：MS+6BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L，该配方是郑吉发等人在《现代农业科技》2017年第22期发表题为“金银花组培快繁技术研究”中公开的配方，该配方为现有技术公开表现最好的配方。金银花使用该配方进行继代培养，繁殖系数3-4，增殖周期20-25天，在夏秋季表现还不错，在冬春季相对比较差，主要问题是繁殖系数偏低，长势慢，苗不整齐，出现黄化、白化、枯顶等现象。二是以MS培养基为基础对各组分进行改良，附加细胞分裂素和生长素的配方。例如：陈泽雄等人以MS培养基为基础，对大量元素和微量元素各组分进行大幅度调整，大量元素中降低硝酸氨、硝酸钾和氯化钙浓度，新添加葡萄糖酸钙、硝酸镁、磷酸二氢钠和硫酸氨浓度，微量元素降为MS培养基的2/3，筛选出适合金银花继代培养的培养基MB，并成功应用到产业化生产中，该研究成果发表于《园艺学报》2013年第12期题为“灰毡毛忍冬工厂化快繁生产体系的建立及再生苗遗传稳定性的分子鉴定”。MB培养基主要以B5和MS培养基为基础，针对性的大幅度调整各类物质浓度而形成，金银花在MB培养基(附加6BA1.5mg/L+IAA0.8mg/L)上培养，继代苗长势健壮且伸长，繁殖系数4.16，继代周期30天。但还是存在繁殖系数偏低，长势慢的问题。综上所述，树形金银花是金银花的一种，现有技术使用MS配方，无论采用调整细胞分裂素及生长素的常规方法，还是采用调整无机元素等比较复杂的方法，繁殖系数3.5-5，增殖的不定芽长势不整齐，易出现黄化、白化、枯死芽，生长周期20-30天，需要再进行壮苗培养后才能进入生根培养阶段，这些因素严重制约树形金银花组培苗规模化生产。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有树形金银花使用MS配方的不足，提供一种树形金银花组培苗快速繁殖的继代培养基，以解决树形金银花组织培养过程中出现的繁殖系数低、增殖的不定芽长势不整齐、需要再进行壮苗培养后才能进入生根培养阶段的问题。一种树形金银花组培苗快速繁殖的继代培养基，该培养基既可作为树形金银花外植体诱导培养基，也可作为壮苗培养基，繁殖系数达到5以上，且增殖不定芽长势整齐、健壮，生长周期15-25天，培育的不定芽已达到壮苗的要求，可进行生根培养，无需再进行壮苗培养，缩短生产周期，该培养基的组分及各组分的浓度如下：1.无机营养成分：(1)大量元素(2)微量元素2.有机营养成分：3.植物生长调节物质：本专利技术所述的琼脂，优选凝胶强度1200。申请人研究发现：MS培养基应用最广泛，其钾盐、铵盐及硝酸盐含量高，微量元素种类比较齐全，其养分数量及比例均比较合适，广泛用于植物的器官、花药、细胞及原生质的培养。但是不同品种对培养基的要求是有差异的，金银花不适合MS培养基或者改良的MS培养基，因为无论如何调整细胞分裂素和生长素，培养效果都不理想。本专利技术所述培养基针对现有的MS培养基和改良的MS培养基做了大量的调整，成分及浓度不一样，培养效果差异明显：①针对树形金银花组培苗继代培养，本专利技术培养基在含有较高的钾盐的基础上，降低了铵态氮、提高了盐酸硫铵素；②为了让树形金银花继代苗长势快，苗木均匀健壮，本专利技术调整大量元素；③为了提高金银花繁殖系数、降低黄化、白化、枯顶等现象，达到规模化生产要求，本专利技术对微量、有机物及植物生长调节物质进行调整。和现有配方培养技术相比，本专利技术具有如下优点：1、增殖系数明显提高：增殖系数从3.5-5提高到5以上；2、增殖不定芽质量高：长势健壮、整齐，少有黄化、白化、枯顶；3、缩短继代培养周期：继代培养周期从20-30天缩短到15-25天；4、缩短生产周期：继代培养和壮苗培养一步完成，从40-60天缩短到15-25天；5、节约成本：通过提高繁殖系数和质量，缩短继代生长周期、减少工序等方面，节约生产成本。具体实施方式下面以实施例对本专利技术作进一步说明，但本专利技术并不局限于这些实施例。准备本专利技术的培养基和对比培养基，对比培养基选自MS培养基和MB培养基(陈泽雄等人，发表于《园艺学报》2013年第12期题为“灰毡毛忍冬工厂化快繁生产体系的建立及再生苗遗传稳定性的分子鉴定”)：实施例的配方是本专利技术配方；对比例1的配方是：MS+6BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L(该配方是郑吉发等人在《现代农业科技》2017年第22期发表题为“金银花组培快繁技术研究”中公开的配方)；对比例2的配方是：MS+6BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L；对比例3的配方是：MB+6BA1.5mg/L+IAA0.8mg/L(该配方是陈泽雄等人在《园艺学报》2013年第12期发表题为“灰毡毛忍冬工厂化快繁生产体系的建立及再生苗遗传稳定性的分子鉴定”中公开的配方)。实施例1：一种树形金银花组培苗快速繁殖的继代培养基，采用本专利技术和三个对比例的配方的培育品种为H-5的树形金银花，实施季节为夏秋季：使用以上四种配方连续培养三代，其培养结果是：实施例2：一种树形金银花组培苗快速繁殖的继代培养基，采用本专利技术的培育品种为H-5的树形金银花，实施季节为冬春季：使用以上四种配方连续培养三代，其培养结果是：总结：通过以上实施例和对比例结果分析，采用本专利技术培养基与公开配方的培养基主要参数和效果对比：本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种树形金银花组培苗快速繁殖的继代培养基，其特征在于，该培养基的组分及各组分的浓度如下：1.无机营养成分：(1)大量元素

【技术特征摘要】
1.一种树形金银花组培苗快速繁殖的继代培养基，其特征在于，该培养基的组分及各组分的浓度如下：1.无机营养成分：(1)大量元素(2)微量元素2.有机营养成分：3.植物生长调节物质：(1)细胞分裂素类6-苄基腺嘌呤(6...

【专利技术属性】
技术研发人员：李清香，吴红英，何贵整，吕月保，陈乃明，宁振升，何克钦，张桂兰，谢云，蔡林，梁刚，
申请(专利权)人：钦州市林业科学研究所，
类型：发明
国别省市：广西,45