【技术实现步骤摘要】
一种牙髓干细胞原代提取方法
本专利技术涉及牙髓干细胞提取领域，更具体地说，涉及一种牙髓干细胞原代提取方法。
技术介绍
牙髓组织位于牙齿内部的牙髓腔内，是牙体组织中唯一的软组织。2000年Gronthos等通过对人牙髓细胞的研究，发现了一种与骨髓间充质干细胞有着极其相似的免疫表型及形成矿化结节能力的细胞，细胞中形态呈梭形，可自我更新和多向分化，有着较强的克隆能力。这些由牙髓组织中分离出的成纤维状细胞就称为牙髓干细胞，牙髓干细胞具有多向分化的潜能，它除了能形成矿化结节能力的细胞外，经过不同细胞因子的诱导，还能够分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、血管内皮、肝、神经等细胞系类型。牙髓干细胞具有以下优点：1、来源丰富。6-11岁的小孩自然脱落的牙齿中、成人需要拔掉的智齿中都含有丰富的牙髓干细胞。2、副作用小。牙髓干细胞是一种间充质干细胞，具有间充质干细胞的通性，不仅免疫原性低，不须经过严格配对即可使用，不会引起强烈的排异反应，而且还具有免疫调节功能，异体一直不会引起排斥反应。3、无伦理争议。因牙髓干细胞取自小孩自然脱落的牙齿及成人的智齿，属于废弃物品，且不损及生命，不存在伦理上的...
【技术保护点】
1.一种牙髓干细胞原代提取方法，其特征在于：其提取方法包括以下步骤：S1、收集5‑14岁儿童新鲜拔除的滞留乳切牙，用酒精对其表面进行擦拭，做消毒处理。S2、通过实验仪器将残留牙髓组织取出，将其置于I型胶原酶(3g/L)和分散酶(4g/L)的消化液中，恒温37度将取出的牙髓组织消化1h，获得单细胞悬浮液。S3、用计数板对细胞悬液进行细胞计数，根据实验需要，通过培养液对细胞悬液的密度进行调整，并将密度调整后的细胞悬液分装在培养瓶中。S4、将培养瓶静置于二氧化碳培养箱，恒温37度对原代细胞培养。S5、在显微镜下分别观察各个培养瓶内的原代细胞的培养情况。
【技术特征摘要】
1.一种牙髓干细胞原代提取方法，其特征在于：其提取方法包括以下步骤：S1、收集5-14岁儿童新鲜拔除的滞留乳切牙，用酒精对其表面进行擦拭，做消毒处理。S2、通过实验仪器将残留牙髓组织取出，将其置于I型胶原酶(3g/L)和分散酶(4g/L)的消化液中，恒温37度将取出的牙髓组织消化1h，获得单细胞悬浮液。S3、用计数板对细胞悬液进行细胞计数，根据实验需要，通过培养液对细胞悬液的密度进行调整，并将密度调整后的细胞悬液分装在培养瓶中。S4、将培养瓶静置于二氧化碳培养箱，恒温37度对原代细胞培养。S5、在显微镜下分别观察各个培养瓶内的原代细胞的培养情况。2.根据权利要求1所述的一种牙髓干细胞原代提取方法，其特征在于：所述S2中的实验仪器包括提取装置台(1)，所述提取装置台(1)上端开凿有放置槽(2)，所述放置槽(2)内固定连接有电动滑台(3)，所述电动滑台(3)左右两端均滑动连接有电动滑块(4)，所述电动滑块(4)上端固定连接有支撑块(5)，两个所述支撑块(5)相互靠近的一端均固定连接有夹板(6)。3.根据权利要求2所述的一种牙髓干细胞原代提取方法，其特征在于：所述提取装置台(1)内端固定连接有电钻(7)，所述电钻(7)上端固定连接有钻头(12)，所述电钻(7)外端设有牙髓组织采集机构(8)，所述牙髓组织采集机构(8)包括半环形滑块(801)、竖直块(803)和限位块(804)，所述半环形滑块(801)与电钻(7)卡接，所述半环形滑块(801)左端开凿有竖直槽(802)，所述竖直块(803)与竖直槽(802)滑动连接，所述竖直块(803)下端壁与限位块(804)固定连接，所述限位块(804)与电钻(7)滑动连接，所述限位块(804)与半环形滑块(801)形状相互匹配，所述竖直块(803)上端固定连接有多个齿块(805)。4.根据权利要求3所述的一种牙髓干细胞原代提取方法，其特征在于：所述半环形滑块(801)左端固定连接有两个辅助块(9)，两个所述辅助块(9)之间转动连接有转杆(901)，所述转杆(901)外端开凿有多个齿槽(902)，所述齿槽(902)与齿块(805)相互匹配，所述转杆(901)远离电钻(7)的一端固定连接有连接板(903)，所述连接板(903)远离转杆(901)的一端固定连接有采集盒(904...
【专利技术属性】
技术研发人员：张喻，
申请(专利权)人：华夏源上海细胞基因工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31
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