一种提高辣根过氧化物酶稳定性的固定化酶方法及应用技术

本发明专利技术属于环境监测技术领域，提供一种提高辣根过氧化物酶稳定性的固定化酶方法及应用。在常温常压下，利用共沉淀的方法，在水相中合成沸石咪唑酯骨架‑8/石墨烯固定化天然辣根过氧化物酶的生物复合材料。ZIF‑8/GO复合材料的包埋保留HRP优异的过氧化物酶催化活性，同时增强HRP的稳定性。相对于单独的ZIF‑8矿化HRP材料来说，GO的引入增加了HRP对抗高温、有机溶剂和变性剂等复杂环境的耐受性，同时增强了HRP的存储稳定性和回收利用能力。利用DNA分子调控HRP@ZIF‑8/GO生物复合材料的过氧化物酶催化活性，建立了无标记的比色传感方法，实现了卡那霉素的特异性检测。

An Immobilized Enzyme Method for Improving the Stability of Horseradish Peroxidase and Its Application

【技术实现步骤摘要】
一种提高辣根过氧化物酶稳定性的固定化酶方法及应用
本专利技术属于环境监测
，涉及一种提高辣根过氧化物酶稳定性的固定化酶方法及应用。
技术介绍
天然酶是由活细胞产生的、对其底物具有高度特异性和高度催化效能的蛋白质或RNA。天然酶具有来源广泛、种类繁多、底物亲和力好、催化效率高等优点，广泛地应用于催化分析、疾病诊断、临床治疗等生产生活的各个方面。但是作为一类典型的生物分子，天然酶的稳定性相对较差，易受外界环境的影响，而且对存储条件有严格的要求。例如天然酶极易受到高温、强酸、强碱等极端外界条件的破坏而丧失部分功能甚至失去原有活性。随着纳米技术的迅速发展，近些年，结合纳米材料的稳定性，利用纳米材料固定化天然酶等生物分子已经成为新的研究热点(Small,2017,13(32):1700880)。固定化酶是指酶在物理上被限制或定位于一定的空间区域内，其催化活性保持不变。固定化酶技术能更有效地控制反应过程，提高酶的存储能力和在极端操作条件下的稳定性。此外，固定化酶的多级结构使其更容易分离，最大限度地减少污染，实现回收利用等，以降低生产成本。目前，常用的纳米材料固定化酶手段有溶胶-凝胶基质、水本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高辣根过氧化物酶稳定性的固定化酶方法，其特征在于，步骤如下：(1)制备氧化石墨烯：石墨烯氧化物采用改进的Hummers化学法制备；(2)制备沸石咪唑酯骨架‑8/石墨烯复合材料固定化辣根过氧化物酶HRP@ZIF‑8/GO：GO与Zn(NO3)2在水中充分超声混合，形成混合液A；HRP和2‑甲基咪唑溶于水中，形成混合液B；之后，将混合液B快速倒入混合液A中，得到的混合液在室温下搅拌12‑24h；其中GO和HRP的质量比为0:50‑1:1，HRP质量、Zn(NO3)2的摩尔和2‑甲基咪唑的摩尔三者比例为5g:100mol:7000mol；将得到的混合物用高纯水离心清洗3‑5次，冷冻干燥12...

【技术特征摘要】
1.一种提高辣根过氧化物酶稳定性的固定化酶方法，其特征在于，步骤如下：(1)制备氧化石墨烯：石墨烯氧化物采用改进的Hummers化学法制备；(2)制备沸石咪唑酯骨架-8/石墨烯复合材料固定化辣根过氧化物酶HRP@ZIF-8/GO：GO与Zn(NO3)2在水中充分超声混合，形成混合液A；HRP和2-甲基咪唑溶于水中，形成混合液B；之后，将混合液B快速倒入混合液A中，得到的混合液在室温下搅拌12-24h；其中GO和HRP的质量比为0:50-1:1，HRP质量、Zn(NO3)2的摩尔和2-甲基咪唑的摩尔三者比例为5g:100mol:7000mol；将得到的混合物用高纯水离心清洗3-5次，冷冻干燥12-24h后得到粉末状物质，将其研磨并置于-4～-20℃的条件下冷冻保存；得到的不同GO含量的产物命名为HRP@ZIF-8/GO-x，其中x代表加入的GO在最终产物中的质量百分...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵慧敏，谭冰，
申请(专利权)人：大连理工大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21