一种从绿豆中分离得到的化合物及其分离方法与用途技术

本发明专利技术公开了一种化合物的制备方法，具体是从绿豆中分离获得，所述化合物分子式为C24H38O4。所述化合物具有较好的抗炎作用，能有效减少炎症因子NO、TNFα和IL‑1β的释放，在抗炎药物、抗炎保健品和抗炎化妆品等多个领域均具有良好的应用前景。

A Compound Isolated from Mung Bean and Its Separation Method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种从绿豆中分离得到的化合物及其分离方法与用途
本专利技术涉及一种从绿豆中分离得到的化合物及其分离方法与用途。
技术介绍
绿豆(VignaradiataL.)别名青小豆、植豆等，是豆科草本植物绿豆的成熟种子。绿豆作为豆类中主要的粮食作物在各地被广泛种植，是我国传统的杂粮作物，其产量和出口量均居世界首位，至今已有两千多年的栽培史。绿豆属高蛋白、低脂肪、中淀粉作物，其营养丰富，经济利用价值高。同时，绿豆具有良好食用及药用价值，有“济世之食谷”之说。绿豆含有均衡的营养素，包括蛋白质和膳食纤维，以及含有大量的生物活性物质，如氨基酸、黄酮类、酚类、低聚糖等，是抗氧化、抗炎、抑菌和抗肿瘤的主要活性成分。绿豆的化学成分、生物活性物质和生理功能的研究已为绿豆的开发和利用奠定了良好的理论基础。结合绿豆的成分分析，在对绿豆某一方面或某几方面的生理功能进行更加深入探讨的基础上，提取纯化新的生理活性物质并探索在化妆品、保健食品和医学上的应用，是今后进一步研究的方向。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的在于提供一种从绿豆中分离的化合物及其制备方法。本专利技术的第二个目的在于提供一种所述化合物的用途。本专利技术通过实验发现，所述化合物具有良好的抗炎作用，可以降低炎症因子NO、TNF-α、IL-1β的产生。为实现其目的，本专利技术采取的技术方案为：一种化合物，其分子式为C24H38O4，结构式为：一种所述化合物的制备方法，其包括以下步骤：(1)绿豆与乙醇水溶液混合进行提取，过滤得到粗提液；(2)粗提液浓缩至浸膏状，加水混悬得到浓缩液；(3)用石油醚对浓缩液进行萃取，分离后石油醚相去溶剂，得到石油醚萃取物；(4)将石油醚萃取物进行硅胶柱层析，以二氯甲烷-甲醇溶液进行梯度洗脱，收集二氯甲烷-甲醇体积比为100:1～40:1的流分，得到流分1；(5)将流分1进行硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯溶液进行梯度洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯体积比为100:1～30:1的流分，得到流分1-1；(6)将流分1-1进行硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯溶液进行梯度洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯体积比为100:1～30:1的流分，得到流分1-1-1；(7)将流分1-1-1进行半制备液相色谱分离，以甲醇-水1:0为流动相分离，得到所述化合物。作为所述化合物的制备方法的一种实施方式，所述步骤(1)中，乙醇水溶液的体积分数为30％～90％，每批次的绿豆提取1～4次，每次提取的绿豆与乙醇水溶液的料液比为1:5～1:30kg/L，提取温度为40～80℃，提取时间为1～3小时。作为所述化合物的制备方法的一种优选实施方式，所述步骤(1)中，乙醇水溶液的体积分数为75％，每批次的绿豆提取2次，每次提取的绿豆与乙醇水溶液的料液比为1:10kg/L，提取温度为80℃，提取时间为2.5小时。该条件下，能够将绿豆提取得更充分，能够更高效地提取目标产物。作为所述化合物的制备方法的一种实施方式，所述步骤(2)中，将浓缩后的浸膏与同等质量的水进行混悬，得到浓缩液。作为所述化合物的制备方法的一种实施方式，所述步骤(3)中，用1～3倍量体积的石油醚对浓缩液进行萃取2～5次。作为所述化合物的制备方法的一种优选实施方式，所述步骤(3)中，用1.2倍量体积的石油醚对浓缩液进行萃取3次。该条件下，不仅能充分萃取，且较节省溶剂。作为所述化合物的制备方法的一种实施方式，所述步骤(4)中，梯度洗脱的方法为：用体积比为100:1～0:1的二氯甲烷-甲醇溶液进行洗脱，分8～12个不同比例的梯度，每个梯度的洗脱量为2～5倍的柱体积。作为所述化合物的制备方法的一种优选实施方式，所述步骤(4)中，梯度洗脱的方法为：用体积比为100:1～0:1的二氯甲烷-甲醇溶液进行洗脱，分11个梯度洗脱，11个梯度的二氯甲烷和甲醇的体积比例分别为100:1、80:1、60:1、40:1、20:1、10:1、8:1、5:1、2:1、1:1、0:1，每个梯度的洗脱量为3～4倍的柱体积。该条件下，能够较好地提高分离效率，减少分离时间，并且能使较难洗脱的组分更好地分离。作为所述化合物的制备方法的一种实施方式，所述步骤(5)中，梯度洗脱的方法为：用体积比为100:1～0:1的石油醚-乙酸乙酯溶液进行洗脱，分10～14个不同比例的梯度，每个梯度的洗脱量为2～5倍的柱体积。作为所述化合物的制备方法的一种优选实施方式，所述步骤(5)中，梯度洗脱的方法为：用体积比为100:1～0:1的石油醚-乙酸乙酯溶液进行洗脱，分12个梯度洗脱，12个梯度的石油醚和乙酸乙酯的体积比例分别为100:1、50:1、30:1、20:1、15:1、10:1、8:1、6:1、4:1、2:1、1:1、0:1，每个梯度的洗脱量为3～4倍的柱体积。该条件下，能够较好地提高分离效率，减少分离时间，并且能使较难洗脱的组分更好地分离。作为所述化合物的制备方法的一种实施方式，所述步骤(6)中，梯度洗脱的方法为：用体积比为100:1～0:1的石油醚-乙酸乙酯溶液进行洗脱，分6～10个不同比例的梯度，每个梯度的洗脱量为2～4倍的柱体积。作为所述化合物的制备方法的一种优选实施方式，所述步骤(6)中，梯度洗脱的方法为：用体积比为100:1～0:1的石油醚-乙酸乙酯溶液进行洗脱，分9个梯度洗脱，9个梯度的石油醚和乙酸乙酯的体积比例分别为100:1、50:1、30:1、20:1、10:1、5:1、2:1、1:1、0:1，每个梯度的洗脱量为3～4倍的柱体积。该条件下，能够较好地提高分离效率，减少分离时间，并且能使较难洗脱的组分更好地分离。本专利技术还提供了一种所述化合物在制备抗炎产品中的用途。优选地，所述抗炎产品包括抗炎药物、抗炎保健品和抗炎化妆品。本专利技术通过实验发现，所述化合物能够较好地减少炎症反应产生的NO、TNFα和IL-1β的释放，具有良好的抗炎效果。本专利技术还提供了一种抗炎产品，其含有所述化合物。优选地，所述抗炎产品为抗炎药物、抗炎保健品或抗炎化妆品。本专利技术的有益效果为：本专利技术开创性地从绿豆中分离出一种新化合物，其化学式为C24H38O4，经实验验证，该化合物能有效减少炎症因子NO、TNFα和IL-1β的释放，具有较好的抗炎作用，在抗炎药物、抗炎保健品和抗炎化妆品等多个领域均具有良好的应用前景。附图说明图1为本专利技术式Ⅰ所示化合物的高效液相色谱图；图2为本专利技术式Ⅰ所示化合物对细胞增殖的影响；图3为本专利技术式Ⅰ所示化合物对炎症因子NO的影响；图4为本专利技术式Ⅰ所示化合物对炎症因子TNFα的影响；图5为本专利技术式Ⅰ所示化合物对炎症因子IL-1β的影响。具体实施方式为更好的说明本专利技术的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本专利技术作进一步说明。应理解，本专利技术实施例仅用于说明本专利技术的技术效果，而非用于限制本专利技术的保护范围。实施例中，所用方法如无特别说明，均为常规方法。本专利技术提供了一种化合物的制备方法，所述化合物的分子式为C24H38O4，结构式如式(Ⅰ)所示：实施例1一种式(Ⅰ)所示化合物的制备方法，包括以下步骤：(1)将绿豆成熟种子(2kg)与一定比例的乙醇水溶液(75％)混合，加入至提取罐80℃提取，第一次加入20L的75％乙醇水溶液，提取2.5h，过滤得到滤液1，将残渣再加入20L的75％乙醇水溶液，提取2.5h，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种化合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)绿豆与乙醇水溶液混合进行提取，过滤得到粗提液；(2)粗提液浓缩至浸膏状，加水混悬得到浓缩液；(3)用石油醚对浓缩液进行萃取，分离后石油醚相去溶剂，得到石油醚萃取物；(4)将石油醚萃取物进行硅胶柱层析，以二氯甲烷‑甲醇溶液进行梯度洗脱，收集二氯甲烷‑甲醇体积比为100:1～40:1的流分，得到流分1；(5)将流分1进行硅胶柱层析，以石油醚‑乙酸乙酯溶液进行梯度洗脱，收集石油醚‑乙酸乙酯体积比为100:1～30:1的流分，得到流分1‑1；(6)将流分1‑1进行硅胶柱层析，以石油醚‑乙酸乙酯溶液进行梯度洗脱，收集石油醚‑乙酸乙酯体积比为100:1～30:1的流分，得到流分1‑1‑1；(7)将流分1‑1‑1进行半制备液相色谱分离，以甲醇‑水1:0为流动相分离，得到所述化合物，所述化合物的分子式为C24H38O4，结构为：

【技术特征摘要】
1.一种化合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)绿豆与乙醇水溶液混合进行提取，过滤得到粗提液；(2)粗提液浓缩至浸膏状，加水混悬得到浓缩液；(3)用石油醚对浓缩液进行萃取，分离后石油醚相去溶剂，得到石油醚萃取物；(4)将石油醚萃取物进行硅胶柱层析，以二氯甲烷-甲醇溶液进行梯度洗脱，收集二氯甲烷-甲醇体积比为100:1～40:1的流分，得到流分1；(5)将流分1进行硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯溶液进行梯度洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯体积比为100:1～30:1的流分，得到流分1-1；(6)将流分1-1进行硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯溶液进行梯度洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯体积比为100:1～30:1的流分，得到流分1-1-1；(7)将流分1-1-1进行半制备液相色谱分离，以甲醇-水1:0为流动相分离，得到所述化合物，所述化合物的分子式为C24H38O4，结构为：2.如权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，乙醇水溶液的体积分数为30％～90％，每批次的绿豆提取1～4次，每次提取的绿豆与乙醇水溶液的料液比为1:5～1:30kg/L，提取温度为40～80℃，提取时间为1～3小时。3.如权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，将浓缩后的浸膏与...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟晓明，许梦捷，
申请(专利权)人：广州华玺生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44