一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺制造技术

本发明专利技术公开了一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，属于松茸菌丝体生产领域，一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，包括以下步骤：一、斜面菌种培养；二、液体种子培养；三、发酵培养；四、菌丝干重。该利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，经实验证明采用该工艺生产出的菌丝体干物质发酵最高得率均在24.82g/L以上，而现有技术中菌丝体干物质得率仅在18g/L左右，因此较现有技术的菌丝体干物质的生产工艺有显著进步，可见本发明专利技术适合松茸菌的发酵培养，菌丝干物质得率稳定且产量高，可规模化生产，值得推广。

A Production Technology of Tricholoma Matsutake Mycelium by Corn Flour Fermentation

【技术实现步骤摘要】
一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺
本专利技术涉及松茸菌丝体生产领域，更具体地说，涉及一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺。
技术介绍
松茸菌，又名松口蘑，是一种珍贵的真菌。味道鲜美，营养丰富，具有很高的药用食疗作用。松茸菌秋季生于松林或针阔混交林地上，在我国东北地区和西南地区都有分布，国外日本和朝鲜也有分布，松茸不可以进行人工培植，是一种纯天然的珍稀名贵食用菌。由于松茸菌丝体的营养价值和药用价值极高，年产量逐年递减，因此需要加强对松茸保育促繁技术的研究，特别是菌种的繁育通过液体发酵获得的松茸菌丝体在气味和成分上与野生松茸很相近，并且发酵培养具有生产周期短，条件易控制等优点，用液体发酵的方式生产松茸菌丝体，并将其提取物应用于食品、化妆品行业中具有很大的开发前景，同时还有利于对松茸的保护,现有技术中松茸菌丝体干物质得率仅在18g/L左右，提高单位体积培养基菌丝体干物质的产量，仍有较大空间。
技术实现思路
1.要解决的技术问题针对现有技术中存在的问题，本专利技术的目的在于提供一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，具备松茸菌丝体干物质得率高的优点，解决了现有技术中松茸菌丝体干物质得率仅在18g/L左右，提高单位体积培养基菌丝体干物质的产量，仍有较大空间的问题。2.技术方案为解决上述问题，本专利技术采用如下的技术方案。一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，包括以下步骤：一、斜面菌种培养：取菌膜未破裂松茸菌子实体，用质量份数为70％乙醇反复进行表面灭菌后，用无菌镊子和刀子取下一小块，接入于斜面培养基中密封好，放入培养箱，在25℃恒温条件下培养，待菌丝长满斜面后，转入下一步培养；二、液体种子培养：将步骤一中培养好的斜面菌种接入摇瓶玉米粉液体种子培养基中，于25℃，190r/min摇床培养8天，无菌过滤得菌丝体，用无菌水冲洗干净，加四倍体积生理盐水及少量玻璃珠稀释、打碎菌丝球、摇匀，得液体种子。三、发酵培养：将发酵罐高压灭菌,在无菌的条件下将灭菌后的玉米粉液体发酵培养基加入到发酵罐中,接着将步骤二培养好的液体种子转接入发酵罐中，通入经过0.45μm的无菌滤膜过滤的空气进行培养，进行发酵培养一周。四、菌丝干重：将培养液用40目滤网过滤，分离得到菌丝体和发酵液，菌丝体经去离子水冲洗数次后，真空抽滤，于60℃烘箱中，烘干至恒重，用分析天平称重，得松茸菌丝体干物质。优选的，所述斜面培养基包括：玉米粉40g/L、葡萄糖10g/L、琼脂20g/L及余量水，PH自然。优选的，所述摇瓶玉米粉液体种子培养基包括：玉米粉20g/L、葡萄糖5g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸镁0.5g/L、维生素B0.15g/L及余量水。优选的，所述玉米粉液体发酵培养基包括：玉米粉40g/L、麸皮15g/L、蔗糖10g/L、葡萄糖10g/L、蛋白胨5g/L、磷酸二氢钾2.5g/L、维生B0.05～0.1g/L、硫酸镁0.5g/L、维生素B0.15g/L及余量水。优选的，所述斜面培养基的制备方法为：先将玉米粉在60℃水浴条件下溶解1h，经细筛过滤后取其滤液，并向滤液中加入琼脂，再次加热煮沸，并不断搅拌至琼脂完全溶解，接着将加入葡萄糖，不断搅拌至葡萄糖完全溶解，最后加水定容，即成为制备好的培养基，将其趁热分装入试管内，灭菌后摆放斜面，即得斜面培养基。优选的，所述摇瓶玉米粉液体种子培养基的制备方法为：先将玉米粉在60℃水浴条件下溶解1h，经细筛过滤后取其滤液，称取蔗糖、葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B，加入到滤液中，搅拌至溶解，并加水定容；接着在摇瓶中放一粒转子，培养基冷却后放入摇瓶中，将瓶口和胶皮管口用棉塞塞紧，并用牛皮纸包扎，将摇瓶放入高压锅灭菌将摇瓶放入高压锅灭菌中，在温度121℃，压力在0.15MPa灭菌40min，待培养基冷却后接种。优选的，所述玉米粉液体发酵培养基的制备方法为：先将玉米粉和麸皮在60℃水浴条件下溶解1h，经细筛过滤后取其滤液，称取蔗糖、葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B，加入到滤液中，搅拌至溶解，将溶解后的液体加入发酵罐中，再加入热的消泡剂消泡，打开气泵搅拌，加水至视镜中线定容，即得玉米粉液体发酵培养基，所述消泡剂为豆油。优选的，所述发酵罐转速为150r/min，通气率0.8V/V·min，内罐压力稳定在0.08～0.1MPa,恒温25℃的条件下培养。优选的，所述发酵培养过程中采用PHS-3型酸度计测定PH并进行pH控制发酵，即起始pH为5.4～5.8，当发酵液pH下降到4.2～4.5时，补加碱性物质，控制发酵pH维持在4.5～4.8范围。优选的，所述液体种子接种量体积与发酵罐的体积比为1:10，所述玉米粉液体发酵培养基与发酵罐的体积比为7:10。3.有益效果相比于现有技术，本专利技术的优点在于：(1)该利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺：经实验证明采用该工艺生产出的菌丝体干物质发酵最高得率均在24.82g/L以上，而现有技术中菌丝体干物质得率仅在18g/L左右，因此较现有技术的菌丝体干物质的生产工艺有显著进步，可见本专利技术适合松茸菌的发酵培养，菌丝干物质得率稳定且产量高，可规模化生产，值得推广。(2)该利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺：采用液体种子在发酵罐中经玉米粉液体发酵培养基发酵培养的方法，有效提高松茸菌丝体干物质得率，且以玉米粉为主料，葡萄糖为辅料制备的斜面培养基、摇瓶玉米粉液体种子培养基和玉米粉液体发酵培养基工艺简单，成本低，值得推广。(3)该利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺：经实验证明采用该工艺本方案较现有技术相比，菌丝干重提高了33.05％，发酵时间缩短了1天，且每天的菌丝干重都高于现有技术的菌丝干重，故本方案菌丝发酵速度快，生产周期短，为松茸菌丝体的规模化生产和利用提供可靠依据，值得推广。附图说明图1为本专利技术的流程图；图2为本专利技术实验例一结果数据图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述；显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。在本专利技术的描述中，需要说明的是，术语“上”、“下”、“内”、“外”“顶/底端”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本专利技术和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本专利技术的限制。此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。在本专利技术的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“设置有”、“套设/接”、“连接”等，应做广义理解，例如“连接”，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本专利技术中的具体含义。实施例一：请参阅图1，一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，包括以下步骤：一、斜面菌种培养：取菌膜未破裂松茸菌子实体，用质量份数为70％乙醇本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，其特征在于：包括以下步骤：一、斜面菌种培养：取菌膜未破裂松茸菌子实体，用质量份数为70％乙醇反复进行表面灭菌后，用无菌镊子和刀子取下一小块，接入于斜面培养基中密封好，放入培养箱，在25℃恒温条件下培养，待菌丝长满斜面后，转入下一步培养；二、液体种子培养：将步骤一中培养好的斜面菌种接入摇瓶玉米粉液体种子培养基中，于25℃，190r/min摇床培养8天，无菌过滤得菌丝体，用无菌水冲洗干净，加四倍体积生理盐水及少量玻璃珠稀释、打碎菌丝球、摇匀，得液体种子。三、发酵培养：将发酵罐高压灭菌,在无菌的条件下将灭菌后的玉米粉液体发酵培养基加入到发酵罐中,接着将步骤二培养好的液体种子转接入发酵罐中，通入经过0.45μm的无菌滤膜过滤的空气进行培养，进行发酵培养一周。四、菌丝干重：将培养液用40目滤网过滤，分离得到菌丝体和发酵液，菌丝体经去离子水冲洗数次后，真空抽滤，于60℃烘箱中，烘干至恒重，用分析天平称重，得松茸菌丝体干物质。

【技术特征摘要】
1.一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，其特征在于：包括以下步骤：一、斜面菌种培养：取菌膜未破裂松茸菌子实体，用质量份数为70％乙醇反复进行表面灭菌后，用无菌镊子和刀子取下一小块，接入于斜面培养基中密封好，放入培养箱，在25℃恒温条件下培养，待菌丝长满斜面后，转入下一步培养；二、液体种子培养：将步骤一中培养好的斜面菌种接入摇瓶玉米粉液体种子培养基中，于25℃，190r/min摇床培养8天，无菌过滤得菌丝体，用无菌水冲洗干净，加四倍体积生理盐水及少量玻璃珠稀释、打碎菌丝球、摇匀，得液体种子。三、发酵培养：将发酵罐高压灭菌,在无菌的条件下将灭菌后的玉米粉液体发酵培养基加入到发酵罐中,接着将步骤二培养好的液体种子转接入发酵罐中，通入经过0.45μm的无菌滤膜过滤的空气进行培养，进行发酵培养一周。四、菌丝干重：将培养液用40目滤网过滤，分离得到菌丝体和发酵液，菌丝体经去离子水冲洗数次后，真空抽滤，于60℃烘箱中，烘干至恒重，用分析天平称重，得松茸菌丝体干物质。2.根据权利要求1所述的一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，其特征在于：所述斜面培养基包括：玉米粉40g/L、葡萄糖10g/L、琼脂20g/L及余量水，PH自然。3.根据权利要求1所述的一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，其特征在于：所述摇瓶玉米粉液体种子培养基包括：玉米粉20g/L、葡萄糖5g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸镁0.5g/L、维生素B0.15g/L及余量水。4.根据权利要求1所述的一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，其特征在于：所述玉米粉液体发酵培养基包括：玉米粉40g/L、麸皮15g/L、蔗糖10g/L、葡萄糖10g/L、蛋白胨5g/L、磷酸二氢钾2.5g/L、维生B0.05～0.1g/L、硫酸镁0.5g/L、维生素B0.15g/L及余量水。5.根据权利要求2所述的一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，其特征在于：所述斜面培养基的制备方法为：先将玉米粉在60℃水浴条件下溶解1h，经细筛过滤后取其滤...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈勇勇，张彦华，袁中信，刘德朋，安桂云，
申请(专利权)人：临沂信邦生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37