【技术实现步骤摘要】
一种利用猕猴桃茎段形成层干细胞培育猕猴桃种苗的方法
本申请属于植物组培快繁
，具体地说，涉及一种利用猕猴桃茎段形成层干细胞培育猕猴桃种苗的方法。
技术介绍
猕猴桃为猕猴桃科，猕猴桃属的多年生藤本植物的果实。由于猕猴桃口感好、营养及保健功能明显，已成为世界上最流行的水果之一。猕猴桃培育品种也在逐年增多，目前已有150多个栽培品种。然而，猕猴桃属于雌雄异株植物，采用常规种子播种繁殖，容易造成品种退化，不利于优良性状的保持，而采用扦插、嫁接等方法，成活率、繁殖系数又低。与其他育苗方式相比，利用组培快繁，不仅可较好的保持优良品种的优良性状及其遗传稳定性，同时可缩短育苗周期、降低幼苗运输成本。目前有关猕猴桃的组培快繁中，所利用外材有叶片、代芽茎段，也有无芽茎段。利用叶片繁殖，由于叶片表面绒毛较多，组培快繁中污染率较高，不利于猕猴桃的组培快繁。利用代芽茎段繁殖，多为腋芽诱导，同时也存在组培过程的高污染难点。利用无芽茎段繁殖，虽为愈伤诱导，但猕猴桃茎段或有绒毛或裂缝，组培过程中污染率高。
技术实现思路
针对现有技术的上述缺陷，本申请提供一种利用猕猴桃茎段形成层干细胞培育猕猴桃...
【技术保护点】
1.一种利用猕猴桃茎段形成层干细胞培育猕猴桃种苗的方法，其特征在于，包括：步骤一、选择直径为0.2‑0.4cm，且在解剖镜下显示具有清晰的木质部、韧皮部的未木质化猕猴桃新梢，除去叶片后，先对猕猴桃新梢进行清洗、消毒处理，再将猕猴桃新梢切成长度为2‑3cm的茎段作为接种外植体茎段；步骤二、用镊子剥离接种外植体茎段的周皮及表皮，将接种外植体茎段两端各切除0.1‑0.2cm后，先置于防氧化处理液中处理30‑90分钟，再置于形成层干细胞诱导培养基中于温度为24℃～26℃的黑暗环境中培养；所述形成层干细胞诱导培养基是以MS为基本培养基，然后通过在基本培养基中添加琼脂粉、蔗糖及NAA或...
【技术特征摘要】
1.一种利用猕猴桃茎段形成层干细胞培育猕猴桃种苗的方法，其特征在于，包括：步骤一、选择直径为0.2-0.4cm，且在解剖镜下显示具有清晰的木质部、韧皮部的未木质化猕猴桃新梢，除去叶片后，先对猕猴桃新梢进行清洗、消毒处理，再将猕猴桃新梢切成长度为2-3cm的茎段作为接种外植体茎段；步骤二、用镊子剥离接种外植体茎段的周皮及表皮，将接种外植体茎段两端各切除0.1-0.2cm后，先置于防氧化处理液中处理30-90分钟，再置于形成层干细胞诱导培养基中于温度为24℃～26℃的黑暗环境中培养；所述形成层干细胞诱导培养基是以MS为基本培养基，然后通过在基本培养基中添加琼脂粉、蔗糖及NAA或IBA制备而成；步骤三、将经形成层干细胞诱导培养基培养25-30天后的接种外植体茎段再次切短，形成长度为0.8-1.5cm的小段或0.2-0.3cm的薄片，转入形成层细胞诱导愈伤培养基中于1800-2200Lux、25±2℃的环境中培养25-35天，表面形成愈伤；所述形成层细胞诱导愈伤培养基是以以MS为基本培养基，然后通过在基本培养基中添加琼脂粉、蔗糖、NAA、6-BA、Kinetin、Zeatin制备而成；步骤四、对于分化成苗的愈伤，当苗长至高度为1.0cm时，切下幼苗接种至生根培养基中于1800-2200Lux、25±2℃的环境中进行生根培养35d；所述生根培养基是以1/2MS为基本培养基，然后通过在基本培养基中添加琼脂粉、蔗糖、6-BA、及NAA或IBA制备而成；步骤五、对于无幼苗分化的愈伤，将愈伤转入幼苗分化培养基中于1800-2200Lux、25±2℃的环境中进行继代及分化培养，培养25d；若愈伤表面分化成幼苗，则重复步骤四，进行生根诱导；若愈伤表面无幼苗分化，则重复本步骤五；所述幼苗分化培养基是以MS为基本培养基，然后通过在基本培养基中添加琼脂粉、蔗糖、NAA、6-BA、kenetin、Zeatin制备而成。2.如权利要求1所述的利用猕猴桃茎段形成层干细胞培育猕猴桃种苗的方法，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：张云峰，严胜柒，马关雪，钟万高，谢紫逊，
申请(专利权)人：云南师范大学，
类型：发明
国别省市：云南,53
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