【技术实现步骤摘要】
用于扩增夜蛾科昆虫HSC70CDS区的引物及其扩增方法
本专利技术涉及生物领域,具体涉及一种用于扩增夜蛾科昆虫HSC70CDS区的引物及其扩增方法。
技术介绍
热激蛋白(Heatshockproteins,HSPs)又称热休克蛋白,是生物体受多种胁迫因子刺激后新合成的一类高度保守的蛋白质,广泛存在于真核和原核生物中。HSPs是一个蛋白质超家族,依据分子量大小和序列同源性可分为HSP100、HSP90、HSP70、HSP60、HSP40和sHSPs。在众多的HSPs中HSP70家族保守性最高,是目前为止研究最多最深入的热休克蛋白家族成员之一。编码HSP70蛋白的基因一般分为2类,第一类为诱导型HSP70,参与两种伴侣功能,该基因在受到胁迫时可以迅速上调,当胁迫消失的时候便回归至正常的表达水平,一般认为其与细胞应激保护相关;第二类为高度保守的组成型HSC70(HeatShockCognate70,HSC70),该基因在正常情况下编码组成型蛋白,在环境胁迫下可被诱导表达成诱导型HSP70。两种蛋白在基因结构上最主要的区别是组成型表达的HSC70含有内含子,而诱导型表达的 ...
【技术保护点】
1.用于扩增夜蛾科昆虫HSC70 CDS区的引物,其特征在于:包括:正向引物F:5’‑GTCAACGACTGAGATAGTT‑3;反向引物R:5’‑GTACTGTAGTTGAATACTGC‑3。
【技术特征摘要】
1.用于扩增夜蛾科昆虫HSC70CDS区的引物,其特征在于:包括:正向引物F:5’-GTCAACGACTGAGATAGTT-3;反向引物R:5’-GTACTGTAGTTGAATACTGC-3。2.一种利用权利要求1所述的引物扩增夜蛾科昆虫HSC70CDS区的方法,其特征在于:包括如下步骤:S1、cDNA的合成采用FastQuantRTKit进行,以1μg的总RNA为模板,体积为20μL,具体方法如下:S11、按照5×gDNABuffer2μL、TotalRNA1μL、RNase-FreeddH2O7μL的配方配制基因组DNA去除体系混合液,混匀并短暂离心,并置于42℃下孵育3min,然后置于冰上;S12、按照10×FastRTBuffer2μL、RTEnzymeMix1μL、FQ-RTPrimerMix2μL、RNase-FreeddH2O5μL的配方配制反转录体系配制混合液;S13、将反转录反应中的混合液加入步骤S11所得的反应液中,充分混匀,在42℃孵育15min,95℃孵育3...
【专利技术属性】
技术研发人员:李鸿波,戴长庚,胡阳,
申请(专利权)人:贵州省植物保护研究所,
类型:发明
国别省市:贵州,52
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