一种基于RPA快速检测南方水稻黑条矮缩病毒的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于RPA快速检测南方水稻黑条矮缩病毒的方法。本发明专利技术提供的引物对由序列表的序列1和序列2所示的两条引物组成。本发明专利技术保护利用所述引物对检测南方水稻黑条矮缩病毒的方法。本发明专利技术提供的方法无需依赖于精密实验仪器，操作方法简单，引物可有效扩增靶基因，具有高度的特异性，灵敏度更高，可以实现该病毒的早期快速检测，对于防控该病毒的发生与流行具有重要意义。

A Rapid Detection Method of Southern Rice Black Stripe Dwarf Virus Based on RPA

【技术实现步骤摘要】
一种基于RPA快速检测南方水稻黑条矮缩病毒的方法
本专利技术涉及植物保护领域，具体涉及一种基于RPA快速检测南方水稻黑条矮缩病毒的方法。
技术介绍
南方水稻黑条矮缩病毒(Southernriceblack-streakeddwarfvirus，SRBSDV)隶属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)斐济病毒属(Fijivirus)第2组的一个新种，通过白背飞虱进行持久型传播。该病毒不仅导致水稻黑条矮缩病，还可侵染玉米导致粗缩病并造成严重产量损失。水稻、玉米、小麦、大麦及其它多种禾本科杂草是其主要天然寄主。病毒侵染植物后都被限制在韧皮部。感病稻株严重矮化，不能拔节，叶片颜色浓绿，叶尖卷曲，拔节期的病株茎节部有倒生气生须根及高节位分蘖，病株茎秆出现条状乳白色或深褐色瘤状突起。感病植株的根系生长也受到影响，须根少而短，感病严重时根系呈黄褐色。近年来该病毒蔓延之势迅猛，在我国华南、西南等稻区流行和危害，给我国南方广大稻区安全生产构成了严重威胁。随着现代分子生物学技术的不断发展，各种基于PCR的分子检测技术由于具有灵敏、快速及特异等特点，被学者们广泛应用于病原物检测和植物病害鉴定领域。目前检测本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.引物对，由引物SRBSDV‑F和引物SRBSDV‑R组成；所述引物SRBSDV‑F为如下(a1)或(a2)：(a1)序列表的序列1所示的单链DNA分子；(a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子；所述引物SRBSDV‑R为如下(a3)或(a4)：(a3)序列表的序列2所示的单链DNA分子；(a4)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子。

【技术特征摘要】
1.引物对，由引物SRBSDV-F和引物SRBSDV-R组成；所述引物SRBSDV-F为如下(a1)或(a2)：(a1)序列表的序列1所示的单链DNA分子；(a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子；所述引物SRBSDV-R为如下(a3)或(a4)：(a3)序列表的序列2所示的单链DNA分子；(a4)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子。2.权利要求1所述的引物对的应用，为如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4):(b1)鉴定或辅助鉴定待测病毒是否为南方水稻黑条矮缩病毒；(b2)制备用于鉴定或辅助鉴定待测病毒是否为南方水稻黑条矮缩病毒的试剂盒；(b3)检测待测生物样本中是否含有南方水稻黑条矮缩病毒；(b4)制备用于检测待测生物样本中是否含有南方水稻黑条矮缩病毒的试剂盒。3.含有权利要求1所述引物对的试剂盒；所述试剂盒的用途为如下(c1)或(c2)：(c1)鉴定或辅助鉴定待测病毒是否为南方水稻黑条矮缩病毒；(c2)检测待测生物样本中是否含有南方水稻黑条矮缩病毒。4.权利要求3所述试剂盒的制备方法，包括将各条引物单独包装的步骤。5.一种鉴定或辅助鉴定待测病毒是否为南方水稻黑条矮缩病毒的方法，包括如下步骤：(1)提取待测病毒的总RNA，并反转录为cDNA；(2)以步骤(1)提取的cDNA为模板，采用权利要求1所述的引物对进行重组酶聚合酶扩增，如果PCR扩增产物中含有152bp±5bp的DNA片段、待测病毒为或候选为南方水稻黑条矮缩病毒，如果...

【专利技术属性】
技术研发人员：范在丰，马文娣，田逸英，焦志远，任彬元，杨普云，周涛，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11