生物标志物在诊断骨科疾病中的应用制造技术

本发明专利技术提供LINC01127作为诊断男性骨质疏松症的分子标志物的用途。本发明专利技术的研究表明LINC01127在健康对照和在男性骨质疏松症患者血液中的表达存在显著差异，据此认为LINC01127可以作为诊断男性骨质疏松症的分子标志物。根据上述研究成果开发了可用于早期诊断男性骨质疏松症的产品，该产品检出率好，适合在临床推广。

Application of biomarkers in diagnosis of orthopaedic diseases

【技术实现步骤摘要】
生物标志物在诊断骨科疾病中的应用
本专利技术属于生物医学领域，涉及生物标志物在诊断骨科疾病中的应用，具体涉及LINC01127作为诊断男性骨质疏松症的分子标志物的应用。
技术介绍
骨质疏松症是中老年人的常见病，男性骨质疏松的发病率呈上升趋势，与女性相比，男性骨质疏松发生较早、速度更快。酗酒、性腺功能减退和吸烟是男性骨质疏松的主要危险因素。骨质疏松引起的临床症状有躯干缩短、驼背、腰背疼痛；四肢骨容易发生骨折，且以股骨颈骨折最为常见。早期这些症状不是很明显，如果任其发展下去，所造成的不良后果是非常严重的，50％的人会终生残疾。疼痛是原发性骨质疏松症最常见的症状，以腰背痛多见，但不少中年男人平时有腰腿不适的感觉时常常误以为是劳累造成的，还有人误认为是人老化的正常表现，容易忽略该病，所以骨质疏松症也被称为“寂静之病”。很多人发现自己腰背疼痛甚至骨折了才去诊治，往往已经错过了最佳治疗时机，因此步入中年的男人要引起高度注意。男性骨质疏松诊断与PMOP相同。低骨量(低于同性别正常人群的峰值骨量的1～2.5个标准差)、骨质疏松(低于峰值骨量的2.5个标准差以上)或严重PMOP(骨质疏松伴一处或多处自发性骨折)。目前没有直接测定骨强度的临床方法，常常采用下列诊断指标：骨密度低下及(或)脆性骨折。对于继发性骨质疏松，还需要具有引起骨质疏松的明确病因。DXA的缺点是不能测得真实的骨密度，而且无法将皮质骨和小梁骨区别开来，用外周定量CT(peripheralquantitativecomputedtomography，pQCT)测量桡骨超远端BMD，可得到总体骨密度、小梁骨骨密度、总体骨矿含量、小梁骨骨矿含量、皮质骨骨密度、皮质骨骨矿含量。当BMD测量与临床诊断不符时，为明确骨病变性质，应进一步做骨扫描、骨活检组织形态计量及QCT、μCT、QMR等检查。单光子、单能X线、定量计算机断层照相、定量超声检查等对诊断有一定的参考价值。分析结果时应更注重Z值(Z值即为与同年龄、同性别正常人相比较)。根据原发病表现和BMD测定及脆性骨折诊断继发性低骨量/骨质疏松。脆性骨折是骨强度下降的最终后果，故有过由明确疾病或药物引起的脆性骨折即可诊断继发性骨质疏松。骨矿盐密度测定详见原发性骨质疏松。X线平片对诊断骨质疏松的敏感性和准确性低，对骨质疏松的早期诊断帮助不大。但对于发现有无骨折，与骨肿瘤和关节病变相鉴别，有较大价值。目前尚无一项生化指标可作为骨质疏松的诊断标准，主要用于骨转换分型、判断骨丢失速率、监测病情、评价药物疗效。近年来，随着生物技术的发展，遗传因素的研究成为骨质疏松诊治领域的热门课题，已有研究表明骨质疏松与体内基因的变化相关，如专利201610115194.9、201610116151.2、201510627060.0、201510628024.6、201711483595.0、201510628081.4等报道了基因的差异表达与骨质疏松的发生发展相关，可见，利用基因进行骨质疏松的早期诊断成为未来发展的趋势。
技术实现思路
为了填补目前的技术空白，本专利技术的目的在于提供一种用于诊断骨质疏松症的长链非编码RNA标志物。本专利技术利用芯片和QPCR实验证明LINC01127在男性骨质疏松症患者血液中的表达水平明显高于健康男性血液中的水平，因此可以将LINC01127作为诊断男性骨质疏松症的分子标志物。为了实验上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：本专利技术提供了检测长链非编码RNA表达的试剂在制备骨质疏松症诊断产品的应用；所述长链非编码RNA的编码基因GeneID：100506328。本专利技术的长链非编码RNA在NCBI中的命名为LINC01127。属于基因ID：100506328编码产物的LINC01127转录本为NR_103791.1，序列如SEQIDNO.1所示。进一步，所述试剂包括利用SYBRGreen、TaqMan探针、分子信标、双杂交探针、或复合探针检测LINC01127表达量时使用的PCR扩增引物。在本专利技术的具体实施方案中，所述引物序列如SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示。本专利技术提供了一种用于骨质疏松症诊断的产品，所述产品包括检测LINC01127表达水平的试剂。进一步，所述试剂包括SYBRGreen、TaqMan探针、分子信标、双杂交探针、或复合探针检测LINC01127表达量时使用的PCR扩增引物。在本专利技术的具体实施方案中，所述引物序列如SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示。进一步，前面所述的产品包括但不限于芯片、试剂盒、试纸、或高通量测序平台；高通量测序平台是一种特殊的诊断骨质疏松症的工具，随着高通量测序技术的发展，对一个人的RNA表达谱的构建将成为十分便捷的工作。通过对比疾病患者和正常人群的RNA表达谱，容易分析出哪个RNA的异常与疾病相关。因此，在高通量测序中获知LINC01127表达异常与骨质疏松症相关也属于LINC01127的用途，同样在本专利技术的保护范围之内。所述试剂盒包括检测LINC01127表达量的试剂，所述试剂包括与LINC01127或其DNA序列结合的核酸，所述核酸包括SYBRGreen、TaqMan探针、分子信标、双杂交探针、或复合探针检测LINC01127表达量时使用的PCR扩增引物。所述芯片包括检测LINC01127表达量的试剂，所述试剂包括与LINC01127或其DNA序列结合的核酸，所述核酸包括能够检测LINC01127表达量的探针。所述试纸包括检测LINC01127表达量的试剂，所述试剂包括与LINC01127或其DNA序列结合的核酸，所述核酸包括能够检测LINC01127表达量的探针。本专利技术提供了一种用于治疗骨质疏松症的药物组合物，所述药物组合物包括LINC01127的抑制剂。进一步，所述抑制剂不受限制，只要是可以抑制LINC01127表达水平或抑制LINC01127功能活性即可。所述抑制剂包括siRNA、shRNA、抑制型miRNA、或抑制型靶向小分子化合物。本专利技术的药物组合物可以作为医药单独施用或与其它药物一起施用。可以与本专利技术的药物组合物一起施用的其它药物不受限制，只要它不损害本专利技术的治疗性或预防性药物组合物的效果即可。本专利技术的药物组合物可根据需要制备成各种剂型。包括但不限于，经皮、粘膜、鼻、口颊、舌下或经口使用的片剂、溶液剂、颗粒剂、贴剂、膏剂、胶囊剂、气雾剂或栓剂。本专利技术的药物组合物的施用途径不受限制，只要它能发挥期望的治疗效果或预防效果即可，包括但不限于静脉内，腹膜内，眼内，动脉内，肺内，口服，小泡内，肌肉内，气管内，皮下的，通过皮肤，通过胸膜，局部的，吸入，通过粘膜，皮肤，肠胃，关节内，心室内，直肠，阴道，颅骨内，尿道内，肝内，瘤内。在某些情况下，可以系统地给药。在某些情况下是局部地给药。本专利技术的药物组合物的剂量不受限制，只要获得期望的治疗效果或者预防效果即可，可以依据症状、性别、年龄等来恰当的确定。本专利技术的治疗药物组合物或预防药物组合物的剂量可以使用例如对疾病的治疗效果或者预防效果作为指标来确定。本专利技术还提供了前面所述的长链非编码RNA在制备治疗骨质疏松症的药物中的应用。本专利技术还提供了前面所述的抑制剂在制备治疗骨质疏松症的药物中的应用。本专利技术还提供了一种诊断骨质本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测长链非编码RNA表达的试剂在制备男性骨质疏松症的诊断产品中的应用；所述长链非编码RNA的编码基因Gene ID：100506328。

【技术特征摘要】
1.检测长链非编码RNA表达的试剂在制备男性骨质疏松症的诊断产品中的应用；所述长链非编码RNA的编码基因GeneID：100506328。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述长链非编码RNA是LINC01127。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述试剂包括利用SYBRGreen、TaqMan探针、分子信标、双杂交探针、或复合探针检测所述长链非编码RNA表达量时使用的PCR扩增引物。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述引物序列如SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示。5.一种用于男性骨质疏松症诊断的产品，其特征在于，所述产品包括检测权利要求1或2所述的长链非编码RNA表达的...

【专利技术属性】
技术研发人员：邢光杰，吴韦强，田清松，
申请(专利权)人：昌乐县人民医院，
类型：发明
国别省市：山东,37