一种增强基因表达的增强子多肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种增强目的基因蛋白表达的增强子多肽。所述增强子多肽信息包括增强子多肽对应的cDNA序列，RNA序列和蛋白序列。本发明专利技术还提供了一种增强基因表达的蛋白多肽的方法，将蛋白多肽作为一个增强剂来进行与靶基因的共转染使用，进而增强目的基因的表达水平。本多肽作为增强剂，可以显著增强目的基因的表达水平，尤其对于一些低表达的蛋白与增强子多肽联用后，可以比较容易的进行功能研究。蛋白多肽作为一个增强剂与目的基因共转染的方式多样化，不局限于脂质体转染、磷酸钙转染及电转法等，都能达到增强目的基因表达的目的。本发明专利技术首次使用蛋白多肽来增强目的基因表达，效果显著且适用范围广泛。该增强子多肽可以通过体外和体内合成得到，无需构建复杂载体，方便快速，为今后增强目的基因表达提供了新的途径和方法。

An Enhancer Polypeptide Enhancing Gene Expression and Its Application

【技术实现步骤摘要】
一种增强基因表达的增强子多肽及其应用
本专利技术涉及基因工程
，特别涉及一种增强基因表达的蛋白多肽的应用。
技术介绍
分子生物学时代的基因工具在细菌和细胞中的应用，尤其是真核细胞中的应用，大大推动了生命科学的发展。特别是基因工程在真核细胞中的应用，为研究基因和蛋白质的功能提供了很好的平台。传统的转染方法大体分为三类：生物、物理和化学方式。现有的生物转染如病毒转染会产生插入突变，具有免疫原性和细胞毒性并且会对实验室人员造成潜在的危害。现有的物理转染如机械法经常会造成细胞死亡并且会损害样本。现有的电转方法有的需要的细胞量比较大（如伯乐的电转仪），有的需要繁琐的操作步骤及转染试剂（如lonza的aAmaxa），同样会因为攻击目的基因片段使得表达量降低。实验室常规的转染方法一直是以脂质体，DEAE-葡聚糖法和polybrene法的化学方法为主。该方法具有细胞毒性小，操作相对简单，不需要对细胞进行额外处理等优点。不过，现有的化学方法的转染效率在不同类型细胞中存在差异，对于稳定的细胞株，如Hela，HEK293等，转染效率可以达到90%以上，但是对其它细胞株或者原代细胞转染效率较低，导致转本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种增强基因表达的方法，其特征在于：通过利用多肽作为增强剂与目的基因进行共转染，增强目的基因的转录/表达水平，所述多肽包括SEQ ID NO:1 所示的cDNA序列和/或如SEQ ID NO:2所示的RNA序列 和/或如 SEQ ID NO:3 所示的蛋白序列和/或与如SEQ ID NO:1 所示的cDNA序列同源性高于60%的同源序列和/或与如SEQ ID NO:2所示的RNA序列同源性高于60%的同源序列和/或与如 SEQ ID NO:3 所示的蛋白序列同源性高于60%的同源序列。

【技术特征摘要】
1.一种增强基因表达的方法，其特征在于：通过利用多肽作为增强剂与目的基因进行共转染，增强目的基因的转录/表达水平，所述多肽包括SEQIDNO:1所示的cDNA序列和/或如SEQIDNO:2所示的RNA序列和/或如SEQIDNO:3所示的蛋白序列和/或与如SEQIDNO:1所示的cDNA序列同源性高于60%的同源序列和/或与如SEQIDNO:2所示的RNA序列同源性高于60%的同源序列和/或与如SEQIDNO:3所示的蛋白序列同源性高于60%的同源序列。2.根据权利要求1所述的增强基因表达的方法，其特征在于：所述同源序列为与如SEQIDNO:1所示的cDNA序列同源性高于80%的同源序列和/或与如SEQIDNO:2所示的RNA序列同源性高于80%的同源序列和/或与如SEQIDNO:3所示的蛋白序列同源性高于80%的同源序列。3.根据权利要求1所述的一种增强基因表达的方法，其特征在于：所述共转染方法为脂质体法和/或磷酸钙法/电穿孔法/DEAE-葡聚糖法/polybrene法/机械法。4.根据权利要求1-3中任意一项所述的增强基因表达的方法，其特征在于：共转染对象为真核细胞。5.一种检测基因表达水平的方法，其特征在于：通过利用权利要求1-2所述的多肽作为增强剂与目的基因进行共转染，通过蛋白免疫印迹法/荧光检测法检测目的基因...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹秀山，李根，李学龙，
申请(专利权)人：拜澳泰克生物医学科技沈阳有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁,21