黄芪提取物在制备淡水鱼抗应激剂中的应用及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种黄芪提取物在抑制淡水鱼养殖应激方面的应用及饲料和饲料制备方法。黄芪提取物的制备方法为：将黄芪的根烘干粉碎，依次用环己烷和乙酸乙酯提取黄芪粉末，过滤后将乙酸乙酯滤液减压蒸馏至恒重制得。本发明专利技术还提供了此黄芪提取物在抗应激饲料中所占比例和饲料的制备方法。本发明专利技术将黄芪提取物作为淡水鱼抗应激剂应用在饲料中，能抑制淡水鱼在养殖中因高密度、硫酸铜和敌百虫导致的应激反应，提高淡水鱼的抗应激能力，降低其发病率和死亡率，同时开发黄芪新用途，有效利用了黄芪资源。

Application of astragalus extract in preparation of freshwater fish anti-stress agent and its preparation method

【技术实现步骤摘要】
黄芪提取物在制备淡水鱼抗应激剂中的应用及其制备方法
本专利技术属于鱼类养殖
，具体涉及一种黄芪提取物在制备淡水鱼抗应激剂中的应用及其制备方法。
技术介绍
高密度集约化是当前水产养殖的重要特征。高密度养殖使投饲量提高，水体中养殖废物增多，使水质变差，表现为水中溶氧量降低，氨氮和亚硝酸盐含量超标。已有报道显示：这些因素会导致鱼的氧化应激损伤，进而降低鱼对饲料的消化吸收，降低鱼的生长和免疫功能，提高鱼的发病率和死亡率。高密度养殖也导致化学消毒剂和杀虫剂的超量使用。硫酸铜为水产养殖中最常使用的金属类消毒杀虫剂之一，其在水中的有效使用浓度一般为0.5～1.0mg/L。已有研究证实，养殖水体使用硫酸铜能诱导鱼的氧化应激进而降低鱼的摄食、消化吸收、生长和免疫功能。敌百虫为水产养殖中最常使用的有机磷类杀虫剂之一，是一种胆碱酯酶抑制剂。敌百虫中毒能导致动物肌肉机能紊乱，而失去平衡。已有报道显示，敌百虫可诱导养殖鱼类发生氧化应激并对鱼的消化吸收、呼吸和免疫功能造成不利影响。当鱼类受到这些应激因子的刺激时，副肾皮质肥大，体内糖皮质激素和甾类皮质激素等水平上升，由此引起血淋巴细胞、巨噬细胞和嗜中性粒细胞和溶菌酶的活性急剧下降，动物的免疫系统受到抑制；从而导致鱼的发病率和死亡率升高，化学药品使用量增加，鱼肉药物残留升高，严重影响了养殖的经济效益和生态效益。黄芪(Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bunge.)是药食两用植物，作为传统中药组方中的重要成分有上千年的使用历史。在我国，黄芪资源丰富，但利用并不充分，例如入药黄芪加工过程中产生的下脚料，黄芪须和黄芪渣以及非道地黄芪等，利用十分有限。开发黄芪新用途，改善传统的黄芪利用结构，发挥黄芪的综合利用潜力，提高黄芪经济和社会效益，具有十分重要的意义。
技术实现思路
针对现有技术中存在的上述问题，本专利技术提供了一种利用黄芪提取物抑制淡水鱼养殖应激的方法及饲料和饲料制备方法。为实现上述目的，本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：黄芪提取物在制备淡水鱼抗应激剂中的应用。现代药学研究结果显示，黄芪具有多种药理活性，具有清除体内和细胞ROS的功能。我们前期的研究显示，黄芪提取物能较好的抑制饲料的脂质氧化。试验发现，黄芪提取物具有抗鱼应激的功能，但目前没有用黄芪提取物作为鱼抗应激剂的报道。具体地，将黄芪提取物添加到饲料中使用，添加后黄芪提取物与饲料总量的质量比例为4.79～7.00‰。将黄芪提取物作为抗应激剂应用在饲料中，抑制淡水鱼养殖应激反应，降低高密度、硫酸铜和敌百虫等应激因素的影响，降低其发病率和死亡率，同时开发黄芪新用途，有效利用了黄芪资源。进一步地，所述黄芪提取物为黄芪乙酸乙酯提取物。一种黄芪提取物的制备方法，包括下述步骤：1)将黄芪的根烘干、粉碎、过40目筛，将黄芪粉末与环己烷按质量比1：7～9的比例混合，700～900r/min搅拌提取5～7h后过滤得滤液和滤渣；2)将步骤1)所得滤渣与乙酸乙酯按质量比1：7～9的比例混合，700～900r/min搅拌提取5～7h后过滤得滤液和滤渣；将所得滤液减压蒸馏至恒重，制得黄芪乙酸乙酯提取物。进一步地，所述步骤1)中，将所得滤渣按照黄芪粉末与环己烷的混合比例和提取方法，再重复提取1～2次。该方法能够大大降低下一步骤所得的黄芪乙酸乙酯提取物中的低极性提取成分，提高提取活性成分的纯度。所述步骤2)中，将所得滤渣按照步骤1)所得滤渣与乙酸乙酯的混合比例和提取方法，再重复提取1～2次，合并滤液，将所得滤液减压蒸馏至恒重，制得黄芪乙酸乙酯提取物。该方法能够进一步提高提取活性成分的纯度，提取效果更好。一种淡水鱼抗应激剂，包括上述黄芪提取物或上述制备方法所得的黄芪乙酸乙酯提取物。一种饲料，包括基础饲料、上述黄芪提取物或上述制备方法所得的黄芪乙酸乙酯提取物。具体地，所述基础饲料包括以下重量份组分：鱼粉23.00～25.00份、豆粕31.00～33.00份、DL-蛋氨酸0.60～0.80份、面粉36.00～38.00份、鱼油1.30～1.50份、葵花籽油1.70～1.90份、维生素添加剂0.50～1.00份和矿物质添加剂0.50～1.00份。饲料中，黄芪提取物占饲料总重量的4.79～7.00‰，5.23‰为最佳用量。其中，维生素添加剂包括以下重量份组分：视黄醇0.80份、维生素D30.48份、DL-α-生育酚20.00份、维生素K30.43份、维生素B10.11份、核黄素0.63份、吡哆醇0.92份、氰钴胺0.10份、D-泛酸钙2.73份、烟酸2.82份、D-生物素5.00份、肌醇52.33份和叶酸0.52份。矿物质添加剂包括以下重量份组分：FeSO4·7H2O69.70份、CuSO4·5H2O1.20份、ZnSO4·7H2O21.64份、MnSO4·H2O4.09份、Na2SeO3·5H2O2.50份和KI2.90份。上述饲料的制备方法，包括以下步骤：将黄芪提取物溶于基础饲料的油脂中，然后与基础饲料混匀，制粒，制得。基础饲料的油脂为鱼油、葵花籽油、大豆油、玉米油、菜籽油、花生油等油脂中的一种或多种构成。综上所述，本专利技术具有以下优点：1.本专利技术在鱼饲料中添加黄芪提取物作为鱼抗应激剂，抑制养殖高密度、硫酸铜和敌百虫对淡水鱼产生的应激反应，提高淡水鱼的抗应激能力，抑制淡水鱼侧翻，使其摄食量和增重恢复，提高淡水鱼养殖的经济效益。2.本专利技术确定了黄芪乙酸乙酯提取物在抗应激饲料中的最佳添加量为5.23g/kg，其中，抗养殖高密度、硫酸铜和敌百虫应激效果最佳的黄芪乙酸乙酯提取物浓度分别为5.23g/kg、4.79g/kg和5.12g/kg。3.本专利技术提供了黄芪提取物的提取方法，采用了二步提取，先使用环己烷进行初步提取，再使用乙酸乙酯进一步提取，获得黄芪乙酸乙酯提取物；大大降低了黄芪乙酸乙酯提取物中的低极性提取成分，提取活性成分纯度高，提取效果好。4.本专利技术确定了黄芪提取物中抗淡水鱼养殖应激的活性成分为黄酮类化合物，黄芪提取物的螯合金属离子(MCA)、恢复鲫鱼摄食和提高其肠道抗超氧阴离子活性(ASA)和抗羟自由基活性(AHR)及降低其肠道丙二醛(MDA)含量的作用与其黄酮类物质含量存在密切关系，其抗应激的机制是黄酮类物质提高了机体抗氧化功能。其中，黄芪乙酸乙酯提取物的黄酮含量最高，为40.36～43.66g/kg。5.本专利技术提供了将黄芪提取物做为淡水鱼抗应激剂添加到饲料中的方法，即通过将其溶解到鱼油、大豆油、玉米油、菜籽油、花生油和/或葵花籽油等油脂中，然后再和其他原料混合、制粒，得到；有效利用了黄芪资源，丰富了黄芪的用途，提高了其经济利用价值。附图说明图1为不同极性黄芪提取物体外螯合金属离子活性(MCA)和投喂后鲫鱼摄食恢复率示意图；图2为不同极性黄芪提取物黄酮类含量与其螯合金属离子活性(MCA)和鲫鱼摄食恢复率关系示意图；图3为养殖密度对鲫鱼增重影响的示意图；图4为养殖密度对鲫鱼饲料效率影响的示意图；图5为养殖密度对鲫鱼死亡率影响的示意图；图6为投喂不同极性黄芪提取物的鲫鱼肠道抗超氧阴离子活性(ASA)、抗羟自由基活性(AHR)和丙二醛(MDA)含量的示意图；图7为黄芪各提取物黄酮类含量与鲫鱼肠道抗超氧阴离子活性(ASA)、抗羟自本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.黄芪提取物在制备淡水鱼抗应激剂中的应用。

【技术特征摘要】
1.黄芪提取物在制备淡水鱼抗应激剂中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，将黄芪提取物添加到饲料中使用，添加后黄芪提取物与饲料总量的质量比例为4.79～7.00‰。3.如权利要求1或2所述的黄芪提取物在抑制淡水鱼养殖应激方面的应用，其特征在于，所述黄芪提取物为黄芪乙酸乙酯提取物。4.一种黄芪提取物的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：1)将黄芪的根烘干、粉碎、过40目筛，将黄芪粉末与环己烷按质量比1：7～9的比例混合，700～900r/min搅拌提取5～7h后过滤得滤液和滤渣；2)将步骤1)所得滤渣与乙酸乙酯按质量比1：7～9的比例混合，700～900r/min搅拌提取5～7h后过滤得滤液和滤渣；将所得滤液减压蒸馏至恒重，制得黄芪乙酸乙酯提取物。5.如权利要求4所述的黄芪提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中，将所得滤渣按照黄芪粉末与环己烷的混合比例和提取方法，再重复提取1～2次。6.如权利要求4所述的黄芪提取物的制备方法，其特征在于，所述步...

【专利技术属性】
技术研发人员：李华涛，梁琪，吴敏，董婷婷，王均，覃川杰，谢碧文，
申请(专利权)人：内江师范学院，
类型：发明
国别省市：四川,51