干细胞和细胞因子的组合及其在改善精子活力的用途制造技术

本发明专利技术涉及本发明专利技术属于生物制药领域，具体涉及自体外周血干细胞联合细胞因子在改善精子活力低下中的用途。具体而言，本发明专利技术涉及含有外周血干细胞与细胞因子单核细胞趋化蛋白‑1(MCP‑1)和胶质细胞衍生神经营养因子(GDNF)的组合对改善精子活力低下具有协同的治疗或者抑制作用，进而为精子活力低下提供了新的组合物或药盒。

Combination of Stem Cells and Cytokines and Their Use in Improving Sperm Vitality

【技术实现步骤摘要】
干细胞和细胞因子的组合及其在改善精子活力的用途
本专利技术属于生物制药领域，具体涉及干细胞和细胞因子联合在改善精子活力中的用途。
技术介绍
人们对骨髓移植的研究启动于第二次世界大战后，这与原子弹爆炸引致的大量放射性损伤的急迫治疗需求有关。在六十年代期间，骨髓移植被用于治疗白血病、何杰金氏病等病患。但实践表明，由于排斥现象，大多数的移植均失败。在七十年代期间，对HLA研究的进展给骨髓移植的悲观结果带来了转机，开始使用经HLA配型的亲属骨髓移植治疗再生障碍性贫血和白血病，同时采用了血小板输注技术、新抗菌药物等多种配合措施，保证了骨髓移植成功率的上升。八十年代，骨髓移植开展地区扩大到全世界，若干国家建立了供髓者登记库，开始世界性合作。由于化疗方案的趋于完善和冷冻技术的提高，自身骨髓移植的例数呈指数上升。近年来开始使用采集的外周血中造血祖细胞作静脉回输，这种方便安全的移植方式可作为骨髓移植的替代物。干细胞注入人体后，机体损伤的环境产生某种细胞因子，刺激干细胞聚集到受损的器官和相应的部位，并分化为这些器官和部位的特异性细胞；干细胞也可以通过分泌出各种蛋白质、酶与多种因子(如神经营养因子、抗凋亡因子等各种生长因子、细胞因子)以及调节肽和气体信号分子等多种生物活性因子，作用于周围细胞，发挥旁分泌作用。可以促进细胞增殖，抑制功能细胞的凋亡，使现有组织祖细胞分化成组织细胞修复受损组织与生长新的组织。干细胞移植技术已经被单独应用于一些适应症或与其他治疗方法(例如化疗)组合应用于一些适应症。干细胞的广泛应用是因为当其被施用于受试者后，在受试者体内能重新产生一种或多种组织特异性细胞。很多干细胞移植是使用相匹配的供体(异体)提供的干细胞。然而，异体移植存在很多弊端，例如免疫排斥反应和移植物抗宿主疾病。并且，异体移植的经济成本也较高。自体移植方法的优点在于，自体细胞(包括外周血干细胞)被重新引入受试者体内，进而降低了细胞被免疫系统排斥的风险。来自异体的干细胞可能会导致移植排斥反应，并有所谓的移植物抗宿主疾病的风险，即移植的细胞攻击被移植者体内的细胞。这一风险通常只能通过免疫抑制药物来抑制。干细胞的来源通常包括胚胎干细胞、从脐带血收集的干细胞和成体干细胞。对于胚胎干细胞，虽然其比较容易在培养基中生长，但这些细胞很少存在于成体组织中并且在细胞培养中扩增其数量的方法还不成熟，而且其细胞来源不能匹配干细胞移植治疗中需要的大量细胞这一实际需求。此外，如果异体胚胎干细胞被输入到受试者体内，会增加移植排斥反应的风险。另一方面，从脐带血收集的干细胞可用于一些治疗，但其细胞不成熟和细胞数量少。目前临床上应用需经过HLA配型及培养扩增的技术。成体干细胞或体干细胞，是一种在组织或器官中的分化细胞间发现的未分化细胞。成体干细胞可以自我更新，并能够分化产生所在组织或器官的主要的特异性细胞类型。在生物体中，成体干细胞的主要功能是维持和修复它们所在的组织。成体干细胞是干细胞自体移植的一个来源，能最大限度地降低移植排斥反应的风险。利用受试者自身的成体干细胞将意味着细胞不会被免疫系统所排斥。这一优点是异体移植无法比拟的。因此，利用成体干细胞的自体转移具有重要的现实意义。外周血中经过动员剂注射后也存在着多种干细胞成分，如造血干细胞、循环成纤维细胞、血管内皮祖细胞、间充质干细胞等。与身体其他部位来源的成体干细胞相比，它们的最大优点是取材方便、细胞数量庞大对病人造成的痛苦少、不会有病毒感染和免疫排斥等，是较理想的干细胞来源。正常育龄夫妇如果不采取任何避孕措施，女方有正常受孕能力。但是，近年来，因男方原因而导致女方不能怀孕的一类疾病呈现高发态势。究其原因，弱精子症即特发性弱精子症占较大比例。另外，据资料显示，精子活力低下所致的不育占整个男性不育的60％-80％，其中有三分之一病因不明。CN107693624A公开了一种临床治疗特发性弱精子症及男性不育症的中药组合物，包括熟地黄、菟丝子、黄芪、淫羊藿、丹参、川牛膝、水蛭、鸡血藤和路路通。CN105395841A公开了一种治疗少弱精症的药物组合及其制备方法；其原料以重量份计，包括仙茅20～50份、地稔15～30份、桃金娘15～30份、黄精10～30份、肉苁蓉10～30份、山药15～50份、熟地15～40份、女贞子10～30份、韭菜子10～30份、仙灵脾10～30份、甘草15～30份。其剂型为汤剂。其制备过程包括：按重量份分别称取上述原料药材，加水浸泡；头煎：武火煎煮至沸腾，改用文火再煎煮20～25分钟，二煎：头煎结束后，将药汁滤出，重新加入水，武火煎煮至沸腾后改为文火煎煮15～20分钟，将头煎与二煎药液合并即得，混合物为汤剂保存。但是中草药由于其原材料的生长环境不同导致其药效差异较大，进而导致中药方剂在治疗效果上大打折扣。WO2011048806A1公开了一种用于提高精子活力和用于提高生育能力的药剂，其包含γ-亚麻酸。当向男性施用这一药剂并且用来自男性的精液对雌性进行授精时，可以提高雌性的生育能力。该药剂可以改善雄性的精子活力，并且可以改善由雄性精液授精的雌性的繁殖力。但是，这一方案主要是用于改善家畜的生育状况，至于是否适用于人类，仍是未知的。
技术实现思路
为了更好地改善精子活力提供另一种可行的选择，本专利技术的专利技术人经过大量、坚持不懈的筛选，发现自体外周血干细胞和特定细胞因子的组合对改善精子活力具有显著的效果，进而为治疗精子活力低下提供了新的疗法或手段。为此，本专利技术的专利技术人提供了一种对于弱精症或精子活力低下的治疗或改善具有显著效果的药物组合物或药盒，该药物组合物或药盒副作用小，且没有免疫排斥反应。具体地，本专利技术一方面提供了一种药物组合物或药盒，其包含成体干细胞(优选为自体干细胞)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和胶质细胞衍生神经营养因子(GDNF)。优选地，本专利技术的组合还进一步包含OPG(骨保护素)。胶质细胞衍生神经营养因子(GDNF)是一种重要的神经营养因子，专利文献CN105861427A公开了GDNF能够通过在培养液中添加GDNF因子提高卵母细胞成熟率和早期胚胎发育率，比常规培养液培养下的成熟率和发育率提高10％，能够为体外受精-胚胎移植(IVF-ET)技术提供高质量的成熟卵母细胞和早期胚胎。单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)是趋化因子家族CC的成员，其能吸引单核细胞和活化的T细胞。MCP-1通过与其受体CCR2的相互作用发挥其生物活性。通过MCP-1基因缺失的小鼠模型发现，该细胞因子在许多疾病模型中的重要性(GerardC.和RollinsB.J.Nat.Immunol。20012：108)。因此，认为MCP-1是涉及与单核细胞浸润相关的病理学的疾病的重要治疗靶标。OPG(骨保护素)通常用于治疗骨质疏松。PCT公开第WO97/23614号描述了Osteoprotegerin(OPG)并发现它在体外和体内负调节破骨细胞的形成。在表达OPG多肽的转基因小鼠中，OPG显著地增加骨密度。分析OPG在体外破骨细胞形成中的活性揭示，OPG阻断来自单核细胞/巨噬细胞前体的破骨细胞的分化。OPG在调节破骨细胞形成的程度方面具有特异性。OPG是阻断骨吸收的有效因子，可以用于预防和治疗骨质量的丢失。但还没见含有单核细胞趋化蛋白本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于改善受试者的精子活力低下的药物组合物或药盒，其包含成体干细胞、单核细胞趋化蛋白‑1(MCP‑1)和胶质细胞衍生神经营养因子(GDNF)。

【技术特征摘要】
1.用于改善受试者的精子活力低下的药物组合物或药盒，其包含成体干细胞、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和胶质细胞衍生神经营养因子(GDNF)。2.根据权利要求1所述的药物组合物或药盒，其还进一步包含OPG(骨保护素)。3.根据权利要求1或2所述的药物组合物或药盒，其中所述MCP-1、GDNF和OPG是重组蛋白。4.根据权利要求1或2所述的药物组合物或药盒，其中所述外周血干细胞是受试者自体外周血干细胞。5.外周血干细胞在制备用于在受试者中改善受试者的精子活力低下的药物组合物或药盒中的用途，其中所述药物组合物或药盒含有成体干细胞和选自MCP-1、GDNF和OPG中的一种、两种或三种的细胞因子，以及任选的药学上可接受的载体。6.根据权利要求5所述的用途，其中所述药物组合物或药盒含有M...

【专利技术属性】
技术研发人员：芦福建，刘玫，
申请(专利权)人：美亚宜彬生物科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11