【技术实现步骤摘要】
一种检测抗OX40抗体的方法及其应用
本专利技术属于生物医药领域,涉及一种检测抗OX40抗体的方法及其应用。
技术介绍
OX40(CD134)是TNFR超家族成员之一,为I型跨膜糖蛋白,相对分子质量约为48~50kD。人的OX40基因位于第1号染色体上,并与其他TNF受体家族成员如CD30、4-1BB、TNFR-II和DR3成簇排列在人染色体h36的远侧带。不同于CD28的组成性表达,OX40属活化后诱导表达,即只表达于活化的T细胞表面,且主要是CD4+T细胞,CD8+T细胞表面有少量表达,CD4+CD25十Foxp3十Treg及中性粒细胞表面均有表达。其与受体OX40L(CD252)共同作用,不仅可以刺激T细胞扩增,促进分化及抗原特异性T淋巴细胞形成,还可以调节CD4十CD25十Foxp3十Treg抑制功能,除此之外研究表明OX40共刺激信号可显著影响T细胞存活。OX40L主要表达于成熟的树突状细胞(DC)、活化的B细胞、血管内皮细胞(VEC)、脐带静脉血管内皮细胞(HUVEC)、巨噬细胞以及某些组织器官包括心、骨骼肌、睾丸和肺等。OX40/OX40L相互作用在 ...
【技术保护点】
1.一种测定抗OX40抗体生物活性的细胞株的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:a.将连接有OX40的载体转染到细胞中,加压筛选出高表达OX40的细胞株;b.以含荧光素酶报告基因的质粒为载体,连接NF‑κB的反应元件,构建含NF‑κB基因的重组质粒;c.将b中的重组质粒转染到a中筛选出的高表达OX40的细胞株中,加压筛选出高表达荧光素酶的细胞株。
【技术特征摘要】
1.一种测定抗OX40抗体生物活性的细胞株的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:a.将连接有OX40的载体转染到细胞中,加压筛选出高表达OX40的细胞株;b.以含荧光素酶报告基因的质粒为载体,连接NF-κB的反应元件,构建含NF-κB基因的重组质粒;c.将b中的重组质粒转染到a中筛选出的高表达OX40的细胞株中,加压筛选出高表达荧光素酶的细胞株。2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述细胞株包括Jurkat细胞、HUVEC细胞、293细胞、COS7细胞、L929细胞、HepG2细胞、CHO细胞、3T3细胞;优选的,所述细胞为Jurkat细胞。3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,a中所述的载体为pLVX-OX40。4.一种单克隆细胞株,其特征在于,所述细胞株由权利要求1-3任一项所述的方法构建而成。5.一种检测抗OX40抗体的生物活性的产品,其特征在于,所述产品包括权利要求4所述的细胞株。6.如下任一项所述的应用:a.权利要求1-3任一项所述的构建方法在制备检测抗OX...
【专利技术属性】
技术研发人员:王军志,王兰,于传飞,李萌,郭允籣,
申请(专利权)人:中国食品药品检定研究院,信达生物制药苏州有限公司,
类型:发明
国别省市:北京,11
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