【技术实现步骤摘要】
一种免疫检测试剂盒及其应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一种免疫检测试剂盒、均相免疫试剂盒及其在间接均相免疫检测人血清或血浆中的目标抗体中的应用。
技术介绍
间接法是测定抗体最常用的方法，其原理为利用标记的二抗检测与固相载体结合的受检抗体。将抗原连接到固相载体上，然后加入待测样本，使样本中的受检抗体与固相载体上的抗原结合形成免疫复合物，再用标记二抗与免疫复合物中的抗体结合形成固相抗原-受检抗体-标记二抗复合物，最后通过检测标记二抗来确定待测样本中受检抗体的含量。在传统的检测方法中，以酶联免疫吸附实验(ELISA)为例，以特异性抗原包被酶标板，二抗标记辣根过氧化物酶(HRP)，在加入待测样本和酶标二抗后分别进行洗涤。固相抗原和待测样本反应后的洗涤过程，将血清中非特异的抗体冲洗干净，只有特异性抗体与固相载体上的抗原形成免疫复合物而保留下来。这样在加入酶标二抗后就不会有非特异性抗体与特异性抗体竞争结合酶标二抗，从而干扰检测。均相免疫检测法作为新一代的免疫检测方法，与传统免疫检测方法相比具有速度快、通量高等优点，但由于平台反应特点的局限，目前并不适合用于间接法检测...
【技术保护点】
1.一种免疫检测试剂盒，其包括能够特异性识别人免疫复合物的第一抗体；所述第一抗体能够特异性识别人免疫复合物中与抗原结合后的目标抗体，但不识别游离的人IgG以及游离的目标抗体。
【技术特征摘要】
1.一种免疫检测试剂盒，其包括能够特异性识别人免疫复合物的第一抗体；所述第一抗体能够特异性识别人免疫复合物中与抗原结合后的目标抗体，但不识别游离的人IgG以及游离的目标抗体。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述第一抗体通过识别表位与人免疫复合物中与抗原结合后的目标抗体相结合；所述识别表位为构象表位和/或线性表位。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述识别表位位于所述人免疫复合物中与抗原结合后的目标抗体的恒定区。4.根据权利要求2或3所述的试剂盒，其特征在于，所述识别表位不位于所述人免疫复合物中与抗原结合后的目标抗体的轻链部分。5.根据权利要求2-4中任意一项所述的试剂盒，其特征在于，所述识别表位位于所述人免疫复合物中与抗原结合后的目标抗体的Fc段。6.根据权利要求2-5中任意一项所述的试剂盒，其特征在于，所述识别表位的氨基酸序列包含5～10个氨基酸。7.根据权利要求1-6中任意一项所述的试剂盒，其特征在于，所述第一抗体为多克隆抗体。8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述第一抗体的制备方法包括：用人免疫复合物对动物进行免疫，获取含有第一抗体的动物血清；然后所述动物血清经亲和层析纯化得到特异性识别人免疫复合物的第一抗体。9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述第一抗体的制备方法具体包括以下步骤：S1，用第一组人免疫复合物对动物进行免疫，免疫结束后，收集动物血清；S2，将所述动物血清上样至结合有第二组人免疫复合物的亲和层析柱上，经洗涤、洗脱后，获得含特异性识别人免疫复合物的第一抗体的洗脱液；S3，将所述洗脱液经透析后上样至抗人IgG亲和层析柱上，穿透液中获得特异性识别人免疫复合物的第一抗体。10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述结合有第二组人免疫复合物的亲和层析柱的制备方法为：将与免疫时不同的抗原固定在亲和层析柱上，然后将与所述抗原特异反应的阳性人血清上样至所述亲和层析柱上，使阳性人血清中的特异性抗体与所述抗原形成第二组人免疫复合物，获得结合有第二组人免疫复合物的亲和层析柱。11.根据权利要求9或10所述的试剂盒，其特征在于，步骤S2中，所述动物血清上样前通过盐析进行粗提。12.根据权利要求9-11中任意一项所述的试剂盒，其特征在于，所述动物对人IgG免疫耐受。13.根据权利要求1-6中任意一项所述的试剂盒，其特征在于，所述第一抗体为单克隆抗体。14.根据权利要求13所述的试剂盒，其特征在于，所述第一抗体的制备方法包括：将经人免疫复合物免疫后的小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后进行培养，对细胞培养上清液进行检测，并保留阳性细胞株。15.根据权利要求14所述的试剂盒，其特征在于，所述第一抗体的制备方法具体包括以下步骤：T1，用第一组人免疫复合物对小鼠进行免疫，免疫结束后，获取小鼠的脾脏细胞；T2，将小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后进行克隆培养，获得细胞培养上清液；T3，利用表面结合有第二组人免疫复合物的酶标板对所述细胞培养上清液进行间接法ELISA检测，获得阳性反应克隆；T4，将所述阳性反应克隆分别与表面结合有与步骤T3相同抗原的酶标板和表面结合有人IgG的酶标板进行间接法ELISA检测，舍弃有任意一项为阳性反应的所述阳性反应克隆；T5，剩余的阳性反应克隆的稳定细胞株经培养或制备腹水...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈英豪，赵卫国，刘宇卉，李临，其他发明人请求不公开姓名，
申请(专利权)人：博阳生物科技上海有限公司，北京科美生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31
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