一种阿斯青霉菌及其菌剂和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种阿斯青霉菌，其分类命名为阿斯青霉菌(Penicillium asturianum)，菌株号为XK‑12，已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏时间为2019年3月28日，保藏编号为CGMCC No.17198。本发明专利技术还公开了上述阿斯青霉菌的应用。本发明专利技术菌株具有耐高温、耐盐碱、产纤维素酶、促进铁吸收和溶磷等优异性能，可应用于贫瘠、盐碱地和石灰性土壤修复，秸秆腐熟和堆肥菌剂接种等。本发明专利技术的P.asturianumXK‑12菌株产孢量多、高效且具有广谱植物病害生防能力、能促进植物生长并适于工业化生产。

A Penicillium Aspiricum and its fungicides and Applications

【技术实现步骤摘要】
一种阿斯青霉菌及其菌剂和应用
本专利技术涉及微生物菌剂领域，具体涉及一种P.asturianum及其菌剂和应用。
技术介绍
P.asturianumXK-12属于子囊菌门(Ascomycota)，散囊菌纲(Eurotiomycetes)，散囊菌目(Eurotiales)，发菌科(Trichocomaceae)。该菌株生物安全风险等级为1级，且拥有耐盐碱，高溶磷，高产纤维素酶腐熟秸秆，对广谱植物病害有显著拮抗效果等优异特性，在盐碱地和石灰性土壤改良，秸秆腐熟作为有机肥原位还田，微生物抗病菌剂及其代谢物在生物农药等方面应用前景广阔。该菌株产孢量高，边生长边产孢，固态发酵和液体发酵产菌水平高，且工艺简单，适合工业化生产，对充分发挥微生物菌剂的生物防治、土壤生态肥力及保持农业生态环境的平衡等具有极其重要意义和应用价值。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种阿斯青霉菌以解决植物病害、盐渍化和石灰性土壤等问题。为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案如下：一种阿斯青霉菌，其分类命名为阿斯青霉菌(Penicilliumasturianum)，属于子囊菌门(Ascomycota)，散囊菌纲(Eurotiomycetes)，散囊菌目(Eurotiales)，发菌科(Trichocomaceae)，缩写为P.asturianum，菌株号为XK-12，已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏时间为2019年3月28日，保藏编号为CGMCCNo.17198。保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所保藏中心，邮编100101。该菌株是专利技术人于2018年5月23日从呼伦贝尔草原选育的菌株。P.asturianumXK-12具有下述性质：1、菌落形态学特征在PDA培养基28℃培养5天后，菌落为紧紧互相编制的近球形，菌病直径长5.0-8.0cm。属于属于子囊菌门(Ascomycota)，散囊菌纲(Eurotiomycetes)，散囊菌目(Eurotiales)，发菌科(Trichocomaceae)。在上述培养基中28℃培养，第二天开始形成孢子，菌落呈蓝绿色，圆形，表面光滑，疏水。其生长的温度范围是7-70℃，最适温度为25-35℃，生长的pH范围是4.0-11，最适pH为6.5-7.5。能在PDA、PSA、PDB、CZA、YDA、CMA、CDA、YMG、NA、YpSs、查氏等培养基中正常生长。2、保守序列分析ITS序列长度534bp，核苷酸序列见SEQIDNO.1；β-tubulin序列长度667bp，核苷酸序列见SEQIDNO.2；translationelongationfactor1-alpha序列长度585bp，核苷酸序列见SEQIDNO.3。将ITS序列、β-tubulin序列和translationelongationfactor1-alpha序列分别与GeneBank/EMBL/DDBJ等数据库中的相关种进行比较，构建系统发育树。结果表明：菌株XK-12与Penicilliumasturianum达到99％同源。所以认定本专利技术的菌株为Penicilliumasturianum，命名为P.asturianumXK-12。所述P.asturianumXK-12可以分生孢子、厚垣孢子、菌丝或含有分生孢子和菌丝的菌丝体的形式存在。所述P.asturianumXK-12适用的液体发酵培养基配方如下：碳源10-100g/L，氮源1-30g/L，无机盐0.01-50g/L，pH5.0-9.0，所述溶剂为水。所述碳源为葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、木糖、果糖、乳酸、柠檬酸、甘油、淀粉和糖蜜中的任意一种几种的组合，优选为葡萄糖、乳糖、木糖、柠檬酸和淀粉中的任意一种或几种的组合；所述氮源为土豆浸出液、酵母粉、牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、玉米浆、豆饼粉、棉籽饼粉、尿素、(NH4)2SO4、NH4Cl、(NH4)2HPO4和NH4NO3中的任意一种或几种的组合，优选为蛋白胨、土豆浸出液、酵母膏、玉米浆、(NH4)2SO4、NH4Cl、(NH4)2HPO4和NH4NO3中的任意一种或几种的组合；所述无机盐为硫酸盐、磷酸盐、磷酸二氢盐、磷酸氢二盐和盐酸盐中的任意一种或几种的组合。所述固体发酵培养基配方如下的稻草30％-70％，15％-45％的麦麸，10％-25％玉米秸秆，0.5-5％的玉米面，0.5-5％的黄豆粉和0.5-2％的(NH4)2SO4等的一种或者几种，加入自来水至湿度为100％-500％，搅匀后装入聚丙烯菌袋或浅盘，使用透气性盖子封口，然后于121℃灭菌20min，获得灭菌后的发酵料；优选为50％稻草，45％麦麸，4.5％黄豆粉和0.5％(NH4)2SO4,加入自然税湿度为300％，搅匀后装入长40cm*宽20cm聚丙烯菌袋，150g/袋，于121℃灭菌20min，接种P.asturianum5mL107CFU/ml,在温度为25～32℃，相对湿度为60％～80％的条件下培养15天，获得6*109CFU/gP.asturianum孢子。所述阿斯青霉菌耐受20wt％NaCl以下(如5wt％、10wt％、20wt％)NaCl盐引起的盐胁迫。所述阿斯青霉菌耐受pH11以下(如pH9、pH10、pH11)的碱胁迫。一种阿斯青霉菌剂，包含上述阿斯青霉菌，可应用于微生物肥料或者生物农药。其中，所述的菌剂包括聚赖氨酸、甲霜灵、多菌灵、吡唑醚菌酯、咪鲜胺、春雷霉素、链霉素中的任意一种或几种的组合。本专利技术更进一步提供所述菌剂的制备方法，步骤如下：将所述骆驼刺泛菌接种于上述PDA培养基中25～32℃活化12-24h，将活化的P.asturianum转接于上述液体或固体发酵培养基中，30-35℃培养5-15天得到发酵液，发酵液或发酵物后处理得到的体系即为菌剂，即所述分生孢子、厚垣孢子、菌丝或含有分生孢子和菌丝的菌丝体制备得到的悬浮液。所述菌剂的剂型为溶液、悬浮液、颗粒剂、粉剂或棒剂，所述菌剂中菌体浓度为1×105-9×109CFU/g。本专利技术菌剂通过灌根或喷施处理，菌剂可与有机肥混合使用，也可以单独使用，改善根际微生物环境，促进植物生长，增强植物抗干旱能力，减少化肥使用量。上述阿斯青霉菌或上述阿斯青霉菌剂在防治植物病害中的应用也在本专利技术保护范围之内。P.asturianumXK-12不仅能有效抑制病菌的生长，并且能刺激植物生长和诱导植物防御反应，改善根系的微环境，增强植物的长势和抗病能力，提高作物的产量和收益。其中，所述的植物为果蔬植物，例如草莓、黄瓜、梨树、苹果树等，所述的病害包括但不限于茄形镰刀菌(Fusariumsolani)、旋柄腐霉(Phytopythiumhelicoide)、尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)、胶孢炭疽病菌(Colletotrichumgioeosporioides)、镰形枝顶孢菌(XenoacremoniumFalcatus)或丝核菌(Ceratobasidiumsp.)引起的真菌病害。P.asturianumXK-12可与赖氨酸、甲霜灵、多菌灵、嘧菌酯、醚菌酯、吡唑醚菌酯、肟菌酯、啶氧菌酯、苯氧菌胺等中的一种或几种，组合成一种高效杀菌组合物，可通过复配的方式减少作物对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种阿斯青霉菌，其分类命名为阿斯青霉菌(Penicillium asturianum)，菌株号为XK‑12，已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏时间为2019年3月28日，保藏编号为CGMCC No.17198。

【技术特征摘要】
1.一种阿斯青霉菌，其分类命名为阿斯青霉菌(Penicilliumasturianum)，菌株号为XK-12，已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏时间为2019年3月28日，保藏编号为CGMCCNo.17198。2.根据权利要求1所述的阿斯青霉菌，其特征在于，所述阿斯青霉菌耐受20wt％NaCl以下NaCl盐引起的盐胁迫和耐受pH11以下的碱胁迫。3.一种阿斯青霉菌剂，其特征在于，包含权利要求1所述的阿斯青霉菌。4.根据权利要求4所述的阿斯青霉菌剂，其特征在于，所述的菌剂包括聚赖氨酸、甲霜灵、多菌灵、吡唑醚菌酯、咪鲜胺、春雷霉素、链霉素中的任意一种或几种的组合。5.权利要求1-2中任意一项所述的阿斯青霉菌或权利要求3-4中任意一项所述的阿斯青霉菌剂在防治植物病害中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的植物为果蔬植物，所述的病害为茄形...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐虹，詹伊婧，彭雯杰，冯小海，许宗奇，王明轩，
申请(专利权)人：南京工业大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32