【技术实现步骤摘要】
沙蚕精液胞浆素及其制备方法与应用
本专利技术涉及一种沙蚕精液胞浆素及其制备方法与应用，属于生物制药
技术介绍
妇科炎症是临床上常见病、多发病，常见的妇科炎症主要有阴道炎、宫颈炎、盆腔炎等，多为细菌、真菌、念珠菌、衣原体等病原体的感染，少为几种病原体的混合感染，且患者多数伴有免疫能力降低，而目前临床上常用的妇科炎症治疗药物一般只对其中一种或两种病原体有作用。而本专利技术对几种病原菌均有作用，从而对治疗妇科炎症有着更好作用。精液胞浆素是精液中的一种杀菌物质，本质为一类具有杀菌活性的蛋白质。性成熟的沙蚕其体腔内为配子所充盈，外观十分饱满。在显微镜下可观察到体腔内的精子交错缠绕成束，在精子形成过程中，在精母细胞的细胞器中，高尔基体活性较低，多泡体有磷酸酶的活性，其在体外具有较强的溶菌活性，磷酸酶随精子逐渐释放到体外。目前临床上常用的阴道栓剂的抑菌物质主要为抗生素，滥用抗生素栓剂治疗，会使病情加重。比如急性滴虫、真菌感染时，不能用腐蚀性的阴道栓剂；如果是急性阴道炎，用抗生素栓剂可促使炎症扩散。过多使用抗生素会使病菌产生耐药性，破坏阴道菌群间平衡，使治疗周期不断延长...
【技术保护点】
1.一种沙蚕精液胞浆素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取沙蚕精液或雄性沙蚕匀浆，低温离心，获得上清液；向所得上清液中加入氯化钠解离，超滤，硫酸铵分级盐析沉淀；所述硫酸铵分级盐析沉淀为先向所得超滤液中加入硫酸铵，使其浓度达到25％‑30％，盐析，去除沉淀；保留上清液，继续加入硫酸铵，使其浓度达到40％‑50％，盐析，收集沉淀，得粗提物；将所得粗提物采用高速逆流色谱法分离，收集活性组分，添加硫酸铵盐析，收集沉淀，冷冻干燥，获得沙蚕精液胞浆素。
【技术特征摘要】
1.一种沙蚕精液胞浆素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取沙蚕精液或雄性沙蚕匀浆，低温离心，获得上清液；向所得上清液中加入氯化钠解离，超滤，硫酸铵分级盐析沉淀；所述硫酸铵分级盐析沉淀为先向所得超滤液中加入硫酸铵，使其浓度达到25％-30％，盐析，去除沉淀；保留上清液，继续加入硫酸铵，使其浓度达到40％-50％，盐析，收集沉淀，得粗提物；将所得粗提物采用高速逆流色谱法分离，收集活性组分，添加硫酸铵盐析，收集沉淀，冷冻干燥，获得沙蚕精液胞浆素。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，氯化钠解离时使所得上清液中氯化钠浓度达到3.0％-4.0％；解离时间优选为2.0-3.0h。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述超滤选用膜截留分子量为20-40kD的滤膜；优选进一步将超滤液用截留分子量为1-5kD的滤膜进行浓缩。4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，采用pH为8.5-9.0的14％-16％PEG1000和16％-18％磷酸钾组成的双水相体系进行高速逆流色谱法分离；优选在检测波长为280nm下收集保留时间为80-120min的活性组分。5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)选取生理阶段为性成熟的雄性沙蚕成虫进行饥饿处理后，消毒；2)向清洁海水中添加消毒后的雄性沙蚕，然后添加少量的性成熟的雌性沙蚕匀浆离心上清液，收集沙蚕精液，低温离心，获得上清液；3)搅拌条件下向步骤2)所得上清液加入氯化钠使其浓度达到3.0％-4.0％，解离；用膜截留分子量为20-40kD的滤膜超滤，收集超滤液；然后进一步用截留分子量为1-5kD的滤膜进行浓缩，得浓缩液；4)向步骤3)所得浓缩液中加入硫酸铵，使其浓度达到25％-30％，盐析，去除沉淀；保留上清液，继续加入硫酸铵，使其浓度达到40％-50％，盐析，收集沉淀，得粗提物；5)采用pH为8.5-9.0的14％-16％PEG1000和16％-18％磷酸钾组成的双水相体系，将所得粗提物采用高速逆流色谱法分离，在检测波长为280nm下收集保留时间为80-120min的活性组分，添加硫酸铵盐析，收集沉淀，冷冻干燥，获得沙蚕精液胞浆素；优选地，所述沙蚕精液胞浆素的制备，包括以下步骤：1)预处理：取鲜活性成熟沙蚕雄虫，置于清洁流动海水中饥饿培养10-12h；然后置于清洁海水中，充入臭氧使海水中臭氧浓度为0.3-0.4mg/L，消毒10-15min；2)精液胞浆素提取：在遮光的环境中，将经过预处理后的雄性沙蚕置于清洁海水中，添加性成熟的...
【专利技术属性】
技术研发人员：石清东，王正元，
申请(专利权)人：北京颢美细胞基因生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11
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