绿原酸在制备预防和阻断肺癌脑转移和/或骨转移的药物中的用途制造技术

本发明专利技术提供了绿原酸在制备预防和阻断肺癌脑转移和/或骨转移的药物中的用途。本发明专利技术绿原酸可以有效预防和阻断肺癌包括小细胞肺癌、肺鳞癌、肺腺癌患者的肿瘤细胞在体内的转移，在提高患者生活质量的同时有效地延长了患者的生命，临床应用前景良好。

Application of chlorogenic acid in the preparation of drugs for preventing and blocking brain and/or bone metastasis of lung cancer

The invention provides the use of chlorogenic acid in the preparation of drugs for preventing and blocking brain and/or bone metastasis of lung cancer. The chlorogenic acid of the invention can effectively prevent and block the metastasis of cancer cells of lung cancer patients including small cell lung cancer, squamous cell lung cancer and lung adenocarcinoma in vivo, improve the quality of life of patients and effectively prolong the life of patients, and has good clinical application prospect.

【技术实现步骤摘要】
绿原酸在制备预防和阻断肺癌脑转移和/或骨转移的药物中的用途
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及绿原酸在制备预防和阻断肺癌脑转移和/或骨转移的药物中的用途。
技术介绍
肺癌是起源于支气管上皮的人类发生率和病死率均较高的恶性疾病之一。其中，非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer，NSCLC)占80％，其5年生存率为15％，而小细胞肺癌(smallcelllungcancer，SCLC)占15％～20％，其恶性程度较高，往往发现时已经恶化甚至转移，并且肺癌转移是治疗失败和病人死亡的主要原因。肺癌晚期可出现各个不同脏器的转移，可引起相应的症状，常给病人带来极大的痛苦甚至威胁到生命，临床最常见的转移有肺癌脑转移、肺癌骨转移等。肺癌脑转移是进展期的NSCLC常见的转移部位，占病人的30％-55％，肺癌病人出现无原因的头疼、呕吐、视觉障碍以及性格、脾气改变，可能为肺癌转移到脑部引起的颅内高压或脑神经受损所致，是小细胞肺癌病人死亡的主要原因之一。骨转移在晚期肺癌患者中，大约有30％～40％的肺癌病人发生，骨转移并非威胁肺癌病员生命的直接原因，但如肿瘤转移到机体承重骨如颈椎、胸椎、腰椎等部位则可造成瘫痪的严重后果，患者出现的骨痛及一系列骨相关事件是降低患者生活质量和影响患者生存的重要因素。肿瘤转移是一个多步骤、多阶段、多途径、涉及多基因变化的一系列复杂过程，包括肿瘤细胞从原发灶脱落，侵入血管或淋巴管，迁移、黏附于适宜部位诱导肿瘤血管形成，对抗宿主抗肿瘤免疫，最终在远处形成转移灶。研究表明，肿瘤细胞的浸润和转移过程中，不仅有多种基因的参与，而且还有一些相关因子、酶类和蛋白质等的共同作用。Che等首次提出YWHAZ的增强与肺癌的恶性程度有关，他们发现YWHAZ基因是β-连环蛋白的电位调节器，阻止β-连环蛋白泛素化和降解并促进其后的EMT表型和增强癌细胞侵袭能力。Jan等指出腺苷酸激酶4基因(adenylatekinase4，AK-4)能增强人肺癌转移能力，降低AK4表达可降低癌细胞系侵袭能力，而AK4高表达在体内体外实验均显著提高癌细胞侵袭能力。研究发现转录激活因子3(activatingtranscriptionfactor3，ATF3)是AK4调控的中枢靶点，具有AK4高表达和ATF3低表达的病人预后不良。AK4通过ATF一3依赖方式提高肿瘤恶性进程和复发，AK4抑制ATF3表达同时激活下游效应器MMP2，促进了肺癌侵袭一转移级联反应，增强肺癌细胞转移。Li等指出，白细胞介素17(interleukinl7，IL-17)能够直接提高肺癌转移能力，是部分通过IL-6-Stat3通路实现的。Kuramoto等最新报道：D114-Notch信号通路在小细胞肺癌肝转移过程中起到了重要作用，通过下调NF-KB信号通路Notchl的活性来实现的。Song等研究发现下调CAV-1表达抑制NCI-H460细胞系增殖但却显著提高其在体外的转移能力，这一表型与抑制E-钙黏蛋白通路以及下调细胞周期蛋白Dl和PNCA有关。肿瘤转移是恶性肿瘤治疗失败和患者死亡的主要原因，现有治疗方法仍不能有效提高病人的生存率；因此抗肺癌转移这一研究策略为肺癌治疗提供了新的方向和思路。
技术实现思路
本专利技术提供了绿原酸的新用途。本专利技术提供了绿原酸在制备预防和阻断肺癌转移的药物中的用途。其中，所述肺癌转移是肺癌脑转移和/或骨转移。其中，所述肺癌包括小细胞肺癌或者非小细胞肺癌。其中，所述非小细胞肺癌是肺鳞癌或者肺腺癌。其中，所述肺癌是中分化或者低分化的肺癌。其中，所述药物是以绿原酸为有效成分，加入药学上可接受的辅料制备成药学上常用的口服制剂或注射制剂。其中，所述的药物制剂中每制剂单位含有绿原酸1～3000mg。其中，所述的药物制剂中绿原酸的使用剂量为1～100mg/kg。其中，所述的药剂是口服制剂或者注射剂。其中，所述肺癌转移是肺癌淋巴结转移，优选药物的单位制剂中，绿原酸的含量为155.16mg。本专利技术证实了绿原酸可以有效预防和阻断肺癌转移，尤其是对肺癌的脑转移和骨转移的疗效明确，可以有效解决传统化疗药物治疗肺癌存在的癌细胞转移的问题，临床应用前景良好。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1绿原酸中剂量组(CHA)与模型对照组(Control)活体成像图图2绿原酸中剂量组与模型对照组的骨组织图照图3绿原酸中剂量组与模型对照组的脑组织图照具体实施方式试验例1绿原酸对LA795肺癌小鼠体内转移的抑制作用1.1材料(1)动物：T739小鼠,雌雄各半,体重18-22g，由四川大学实验动物中心提供。(2)肺癌细胞株：LA795，武汉普诺赛生命科技有限公司提供；胎牛血清，杭州四季青生物工程材料有限公司提供；质粒EGFP-C1，Clontech公司提供；脂质体转染试Lipofectamin2000,Invitrogen公司提供。1.2器材Nuance多光谱荧光倒置显微镜、Maestro多光谱活体动物成像系统(美国CRi公司)，FACSArray流式细胞仪(美国BD公司)。1.3细胞培养及转染将LA795细胞接种于6孔培养板1×107个/mL，用含10％胎牛血清的DMEM完全培养基37℃、5％CO2孵箱中培养,待细胞融合约70％时，用脂质体转染试剂Lipofectamin2000和质粒EGFP-C1转染LA795细胞。转染48h后传代，G418筛选，4周左右出现抗G418的荧光阳性克隆。荧光倒置显微镜观察下随机挑取1个抗性荧光细胞克隆移至96孔板培养，逐步扩增后常规培养传代，以400μg/ml的G418维持筛选，获得扩增的EGFP-LA795细胞。待EGFP-LA795细胞于对数生长期融合至80％-90％时，以0.25％胰酶消化，消化后离心，DMEM重悬细胞制成细胞悬液待种(细胞浓度1×107个/mL)。将贴壁生长的EGFP-LA795细胞用胰酶消化，制备单细胞悬液，并做适当稀释，细胞悬液与0.4％台盼蓝溶液混合，镜下计数，EGFP-LA795细胞存活率＞90％，倒置荧光显微镜下挑取阳性克隆，进行扩增培养，获得呈绿色荧光的LA795细胞。1.4模型建立取1.0×107个/ml的EGFP-LA795细胞悬液0.2ml对小鼠腋下注射后随机分组，每组10只，分别为绿原酸高剂量组、绿原酸中剂量组、绿原酸低剂量组、模型对照组。绿原酸组腹腔注射给药，高剂量组为40mg/kg、中剂量组为20mg/kg、低剂量组为10mg/kg，给药体积为1.0ml；模型对照组腹腔注射给予同等体积生理盐水，每天给药一次，连续给药20天。并分别与0天、10天、20天进行活体成像观察，试验结束后脱颈处死，取周围淋巴结及中轴骨、四肢长骨，观察、计数转移灶。1.5小鼠活体成像用10％水合氯醛按4ml/kg腹腔注射麻醉，仰放于活体成像仪配制的黑色胶垫上。照射条件为GFP，发射波长为520nm，激发波长本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.绿原酸在制备预防和阻断肺癌转移的药物中的用途。

【技术特征摘要】
2018.04.16 CN 20181033946391.绿原酸在制备预防和阻断肺癌转移的药物中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述肺癌转移是肺癌脑转移和/或骨转移。3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于：所述肺癌包括小细胞肺癌或者非小细胞肺癌。4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于：所述非小细胞肺癌是肺鳞癌或者肺腺癌。5.根据权利要求1～4任意一项所述的用途，其特征在于：所述肺癌是中分化或者低分化的肺癌。6.根据权利要求1～5任意一项所述的药...

【专利技术属性】
技术研发人员：张洁，陈晓光，黄望，
申请(专利权)人：四川九章生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51