抗凝血鼠药半抗原和人工抗原及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及抗凝血鼠药半抗原和人工抗原及其制备方法与应用。所述抗凝血鼠药半抗原的结构如式(I)所示：

Anticoagulant hapten and artificial antigen of rodenticide and their preparation and Application

The invention relates to anticoagulant rat drug hapten and artificial antigen, and a preparation method and application thereof. The structure of the anticoagulant mouse drug hapten is shown in formula (I):

【技术实现步骤摘要】
抗凝血鼠药半抗原和人工抗原及其制备方法与应用
本专利技术属于生物化工
，具体地说，涉及抗凝血鼠药半抗原和人工抗原及其制备方法与应用。
技术介绍
抗凝血类鼠药(anticoagulantrodenticide，AR)是一类可以竞争性地与维生素K结合，从而导致鼠的凝血功能障碍，直至内脏出血致死的一类杀鼠剂。此类鼠药具有高效、低毒、安全的优点，是目前较理想的并且使用最为广泛的杀鼠剂。但由抗凝血剂鼠药造成的非靶标物中毒事件频繁发生，其中包括误食，恶意投毒和二次中毒等导致的群体或个体中毒事件，严重威胁了公共卫生安全。因此，在发生中毒事件后有必要对生物样本中多种抗凝血剂鼠药进行同时检测，为病因的确证和临床治疗奠定基础。目前，生物样品中抗凝血剂鼠药的检测方法主要有高效液相色谱法，液质联用等仪器分析方法。但仪器分析方法是确证方法，存在检测成本高，一起价格高昂，需要专门人员进行操作，样品处理复杂等缺点，无法满足大批量样本快速筛查。免疫分析技术，具有较高的灵敏度和特异性，在大量样本的现场快速检测时更受欢迎。免疫分析技术依托于核心试剂抗体，而抗体的性质又取决于半抗原的结构。因此，研发一种通用型抗凝血本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.抗凝血鼠药半抗原，其特征在于，其结构如式(I)所示：

【技术特征摘要】
1.抗凝血鼠药半抗原，其特征在于，其结构如式(I)所示：2.权利要求1所述半抗原的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)苄基溴化镁与4-溴苯甲醛反应得到化合物3；2)化合物3与三溴化磷反应得到化合物4；3)化合物4与丙二酸二乙酯反应得到化合物5；4)化合物5与多聚磷酸反应得到化合物6；5)化合物6与NaBH4反应得到化合物7；6)化合物7与对甲苯磺酸和4-羟基香豆素反应得到化合物9；7)5-炔基己酸与溴苄反应得到化合物11；8)化合物11与化合物9反应得到化合物12；9)化合物12发生氢化反应得到化合物13；10)化合物13发生水解反应得到所述抗凝血鼠药半抗原；其中，所述化合物3、4、5、6、7、9、11、12、13的结构分别如下：3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)在氮气气氛下，1M苄基溴化镁溶液316mL用四氢呋喃170mL稀释冷却到-15℃，1h内向该溶液中加入含45.1g4-溴苯甲醛的THF溶液100mL，该体系在-10℃搅拌1h，用饱和氯化铵溶液淬灭；该体系用水稀释，乙酸乙酯萃取三次；合并有机相，依次用水、食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后得到化合物3；2)向冰盐浴的含80.0g化合物3的二氯甲烷溶液450mL中，在30min内加入三溴化磷11.4mL；该混合物在0-5℃搅拌2h，用冰水淬灭；所得混合物用二氯甲烷提取三次；合并有机相，依次用水、食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤；滤液浓缩后得到化合物4；3)在氮气气氛下，向冰水浴的含12.661g氢氧化钠的DMF500mL悬浮液中依次加入48mL丙二酸二乙酯和97.7g化合物4；反应混合物加热到90℃反应16h；冷却到室温，用饱和氯化铵溶液淬灭，用水稀释，乙酸乙酯提取三次；合并有机相，依次用水、食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤；滤液浓缩得到黄色油状物；将156.0g所述油状物溶解在600mL乙醇中，向其中加入300mL水和59.5gNaOH；该体系在90℃加热23h；冷却到室温，有浅黄色固体析出，过滤弃掉固体；减压浓缩滤液，得到残渣，该残渣用水打浆，用甲基叔丁基醚洗涤；水相用3MHCl酸化到pH<3，乙酸乙酯提取两次；合并有机相，依次用水、食盐水洗涤，然后过滤，干燥，得到化合物5；4)向加热到140℃的多聚磷酸270.0g中，在1h内加入41.5g化合物5；反应体系加热到170℃搅拌1h；体系冷却到80-90℃，加入甲苯400mL，然后加水550mL进行淬灭；分离甲苯层，水层用乙酸乙酯萃取两次；合并有机相，依次用水、食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤浓缩至干，所得残留物在二氯甲烷和石油醚1:3体积比的混合液中重结晶，得到化合物6；5)化合物6溶解在100mLTHF和200mL乙酸乙酯中，在0℃下向其中加入3.392gNaBH4；反应体系升至室温搅拌16h；加入氯化铵淬灭反应；所得混合物浓缩后用水稀释，二氯甲烷萃取两次；合并有机相，依次用饱和碳酸氢钠溶液、水、食盐水洗涤，干燥浓缩，所得残留物在二氯甲烷...

【专利技术属性】
技术研发人员：王战辉，沈建忠，温凯，江海洋，于雪芝，余文博，李红芳，段长飞，史为民，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11