一种光合细菌菌液的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种光合细菌菌液的制备方法，属于菌液制备技术领域。针对现有技术中制备光合细菌成本较高且制得的光合细菌活性较低的问题，本发明专利技术提供一种光合细菌菌液的制备方法，它包括光合细菌基础培养液的制备；豆粕糊浆的制备以及在制备的基础培养液上接种光合细菌，并添加豆粕糊浆，将基础培养液置于光照条件下进行培养，待光合细菌基础培养液呈深红色后，补加豆粕糊浆，待光合细菌呈稠状时，培养完成。本发明专利技术制备光合细菌所需的原料较少，避开了使用酵母膏的高成本及多种化合物制作培养基的繁琐之处；采用豆粕为原料，豆粕含有较高的蛋白质，能够为光合细菌的培养提供营养，且成本较低；所得产品光合细菌菌液中活菌数超高，呈血液般稠状。

Preparation of a Photosynthetic Bacterial Solution

The invention discloses a preparation method of photosynthetic bacteria bacterial liquid, which belongs to the technical field of bacterial liquid preparation. In order to solve the problem of high cost of preparing photosynthetic bacteria and low activity of photosynthetic bacteria, the invention provides a preparation method of photosynthetic bacteria bacterial liquid, which includes preparation of basic culture liquid of photosynthetic bacteria, preparation of soybean meal paste and inoculation of photosynthetic bacteria on the prepared basic culture liquid, and addition of soybean meal paste, and introduction of basic culture liquid under light conditions. When the basic culture medium of photosynthetic bacteria was dark red, soybean meal paste was added, and when the photosynthetic bacteria were thick, the culture was completed. The invention needs fewer raw materials to prepare photosynthetic bacteria, avoids the high cost of using yeast extract and the tedious aspects of making culture medium with various compounds; uses soybean meal as raw material, which contains higher protein, can provide nutrition for the cultivation of photosynthetic bacteria, and has lower cost; the number of living bacteria in the obtained product photosynthetic bacteria liquid is super high and is as thick as blood.

【技术实现步骤摘要】
一种光合细菌菌液的制备方法
本专利技术属于菌液制备
，更具体地说，涉及一种光合细菌菌液的制备方法。
技术介绍
红螺菌科(Rhodospirillaceae)假单胞菌属的光合细菌如沼泽红假单胞菌、荚膜红假单胞菌、球形红假单胞菌，为水产、环保和饲料中经常使用的有益微生物，研究表明，光合细菌自身生长代谢会产生丰富的B族维生素，类胡萝卜素，辅酶Q10，叶酸等，因此，作为动物饲料添加剂具有非常高的营养价值。此外，光合细菌能有效去除废水中的有机物、以及氮、磷、硫化物，常被用在水产养殖领域来降低水塘中的氨氮、亚硝酸盐及有机物。其培养基配方也有很多种，但综合概览，商品培养基由于使用较多酵母提取物，成本都比较高，自制培养基菌的生长浓度不足，且最终产出的菌液中很少能够达到标识的菌数，通常标识中光合菌菌数为10～50亿cfu(菌液)100～200亿cfu(菌粉)，但终产品检测中发现很少有能超过20亿cfu的光合菌菌液产品，商品光合菌菌粉中，大部分活菌也已因干燥而丧失活力。针对上述问题也进行了相应的改进，如中国专利申请号CN201310036820.1，公开日为2013年6月12日，该专利公开了一种制备光合细菌菌液的方法，其步骤是：(1)将装有光合细菌菌种的冻存管进行溶解复苏，溶解后的菌液成为复苏菌液；(2)在超净工作台上，用复苏菌液在平板固体培养基上划线，将划线后的平板固体培养基在30℃恒温培养箱中静置培养24～36小时长出单菌落后，用接种环挑取平板固体培养基上的单菌落在斜面培养基上划线，划线后的斜面培养基在30℃培养箱中静置培养24～36小时菌落长出；(3)菌落长出后，用光合细菌液培养基将斜面培养基上的菌落洗脱下来成为菌落溶液，菌落溶液进行初次培养得到初次培养菌液，初次培养菌液进行转接培养得到转接培养菌液。本专利技术具有培养基配制及培养过程简单，菌液浓度高，质量好的特点。该专利的不足之处在于：虽然制备的菌液浓度高，但是制备的成本较高，并且在培养基上划线误差较大。又如中国专利申请号CN201210556654.3，公开日为2014年6月25日，该专利公开了一种光合细菌液固双重发酵高浓度微生态制剂的制备方法，包括平板培养基培养、试管培养，三角瓶培养，二级种子的制备、三级种子的制备，成品的制备等步骤。该专利的不足之处在于：虽然加工成本较低，不易染杂菌，但是制备步骤较多，效率较低。
技术实现思路
1.要解决的问题针对现有技术中制备光合细菌成本较高且制得的光合细菌活性较低的问题，本专利技术提供一种光合细菌菌液的制备方法。本专利技术制备光合细菌所需的原料较少，避开了使用酵母膏的高成本及多种化合物制作培养基的繁琐之处；采用豆粕为原料，豆粕含有较高的蛋白质，能够为光合细菌的培养提供营养，且成本较低；所得产品光合细菌菌液中活菌数超高，呈血液般稠状。2.技术方案为了解决上述问题，本专利技术所采用的技术方案如下：一种光合细菌菌液的制备方法，包括以下步骤：(1)制备光合细菌基础培养液：包括无水乙酸钠2.0～2.5g/L，碳酸氢铵2.0～2.5g/L，七水合硫酸镁0.3～0.5g/L，磷酸二氢钾0.5～1g/L；(2)制备豆粕糊浆：将豆粕打粉加入水中进行煮沸、冷却；(3)接种培养光合细菌：将制备好的光合细菌基础培养液装入透明的培养容器中，在培养容器中接种光合细菌菌种，并添加豆粕糊浆，待光合细菌菌种与豆粕糊浆都加入完成后，将培养容器置于光照条件下进行培养，待光合细菌基础培养液呈深红色后，补加豆粕糊浆，待光合细菌呈稠状时，培养完成。更进一步的，所述步骤(2)中豆粕打粉经80目筛孔过筛，筛后的豆粕粉加入水中进行煮沸、冷却。更进一步的，筛后的豆粕粉以80～100g/L的量加入到水中进行煮沸、冷却。更进一步的，所述步骤(3)中培养容器接种光合细菌的接种量为12.5％～25％。更进一步的，豆粕糊浆的加入量为20ml。更进一步的，培养容器内的液体不充满培养容器内的整个空间，在培养容器内上部留有空间。更进一步的，所述培养容器为塑料瓶或培养皿。更进一步的，光照强度为2000～3000lux。更进一步的，待光合细菌基础培养液呈深红色后每隔3～4天补加豆粕糊浆。3.有益效果相比于现有技术，本专利技术的有益效果为：(1)本专利技术制备光合细菌所需的原料较少，避开了商业光合菌培养液使用酵母膏的高成本及多种复杂的化合物制作培养基的繁琐之处；采用豆粕为原料之一，豆粕含有较高的蛋白质，能够为光合细菌的培养提供营养，且成本较低；整体光合细菌的制备方法步骤较为简单，可操作性高，所得产品光合细菌菌液中活菌数超高，呈血液般稠状；(2)本专利技术将豆粕进行打粉后经80目筛孔过筛，在豆粕进行打粉过程中容易混入较大颗粒的杂质，打粉后的豆粕进行80目筛孔过筛一方面有效避免了杂质进入到豆粕粉中影响后期豆粕粉的使用；另一方面能够得到较细的豆粕粉末，使得最终制得的豆粕糊浆较为均匀，方便后期的使用；(3)本专利技术将筛选后的豆粕粉以80～100g/L的量加入到水中进行煮沸、冷却；使得制得的豆粕糊浆较为均匀，不易发生内部粘结的现象；方便后期豆粕糊浆向培养容器中添加，使得添加的过程较为顺利；(4)本专利技术在培养容器内上部留有占整个培养容器体积3～8％的空间，留有空气，方便微好氧的光合细菌能够实现较长时间快速生长，保证了光合细菌生长环境的友好，对光合细菌的生长起到促进作用；(5)本专利技术采取的光照强度为2000～3000lux，光照强度过低不利于光合细菌的生长，光照强度过高不利于光合细菌的快速扩散，并过强的光照强度可能会使得光合细菌发生死亡；在光照强度为2000～3000lux之间时，使得光合菌的生长代谢加快，促进光合菌的生长；(6)本专利技术采用的光照在白天主要为日照，让光合细菌更能适应白天和黑夜的自然环境，提高其对环境的适应性，更有利于后续的使用，使光合细菌的培养回归到自然，最原始的状态，可以有效地避免光合细菌培养过程中可能会出现的变异或退化现象。附图说明图1为专利技术的过程示意图。具体实施方式现如今，光合细菌为水产、环保和饲料中经常使用的有益微生物，但是其培养基配方由于使用较多酵母提取物，成本都比较高，自制培养基菌的生长浓度不足，且最终产出的菌液中很少能够达到标识的菌数，通常标识中光合菌菌数为10～50亿cfu(菌液)100～200亿cfu(菌粉)，但终产品检测中发现很少有能超过20亿cfu的光合菌菌液产品，商品光合菌菌粉中，大部分活菌也已因干燥而丧失活力。专利技术人经历不断的实验与分析，提供了一种光合细菌菌液的制备方法。如图1所示，一种光合细菌菌液的制备方法，包括以下步骤：(1)制备光合细菌基础培养液：包括无水乙酸钠2.0～2.5g/L，碳酸氢铵2.0～2.5g/L，七水合硫酸镁0.3～0.5g/L，磷酸二氢钾0.5～1g/L；为光合细菌的培养提供全面的营养物质基础，本实施例所述的光合细菌基础培养液无需有机氮源，且乙酸钠能够有效抑制杂菌的生长，整体光合细菌基础培养液营养物质全面且环境友好，原料简单且成本较低；(2)制备豆粕糊浆：将豆粕打粉加入水中进行煮沸、冷却；优选的，所述豆粕打粉经80目筛孔过筛，筛后的豆粕粉加入水中进行煮沸、冷却；在豆粕进行打粉过程中容易混入较大颗粒的杂质，打粉后的豆粕进行80目筛孔过筛一方面有效避免了杂质进入到豆本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种光合细菌菌液的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)制备光合细菌基础培养液：包括无水乙酸钠2.0～2.5g/L，碳酸氢铵2.0～2.5g/L，七水合硫酸镁0.3～0.5g/L，磷酸二氢钾0.5～1g/L；(2)制备豆粕糊浆：将豆粕打粉加入水中进行煮沸、冷却；(3)接种培养光合细菌：将制备好的光合细菌基础培养液装入透明的培养容器中，在培养容器中接种光合细菌菌种，并添加豆粕糊浆，待光合细菌菌种与豆粕糊浆都加入完成后，将培养容器置于光照条件下进行培养，待光合细菌基础培养液呈深红色后，补加豆粕糊浆，待光合细菌呈稠状时，培养完成。

【技术特征摘要】
1.一种光合细菌菌液的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)制备光合细菌基础培养液：包括无水乙酸钠2.0～2.5g/L，碳酸氢铵2.0～2.5g/L，七水合硫酸镁0.3～0.5g/L，磷酸二氢钾0.5～1g/L；(2)制备豆粕糊浆：将豆粕打粉加入水中进行煮沸、冷却；(3)接种培养光合细菌：将制备好的光合细菌基础培养液装入透明的培养容器中，在培养容器中接种光合细菌菌种，并添加豆粕糊浆，待光合细菌菌种与豆粕糊浆都加入完成后，将培养容器置于光照条件下进行培养，待光合细菌基础培养液呈深红色后，补加豆粕糊浆，待光合细菌呈稠状时，培养完成。2.根据权利要求1所述的一种光合细菌菌液的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中豆粕打粉经80目筛孔过筛，筛后的豆粕粉加入水中进行煮沸、冷却。3.根据权利要求2所述的一种光合细菌菌液的制备方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏梦宁，何业俊，王栋，
申请(专利权)人：安徽黄河水处理科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34