本发明专利技术提供了一种改良玉米浆的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将玉米浆与水等体积混合，得玉米浆预处理液；(2)取步骤(1)中玉米浆预处理液，加入HNO3溶液混合充分反应后，再加入一定量CaCO3充分反应，得玉米浆处理液；(3)取步骤(2)中玉米浆处理液，调pH至7.0‑7.5，得改良玉米浆；步骤(2)所述HNO3添加量为4％～6％(w/v)，所述CaCO3的添加量是10％～15％(w/v)。本发明专利技术可在不显著影响玉米浆营养成分的情况下，延长玉米浆的可保存时间，应用前景良好。
A Modified Corn Milk for Erythromycin Fermentation and Its Preparation and Application
The invention provides a method for preparing improved corn pulp, which is characterized by the following steps: (1) mixing corn pulp with water in equal volume to obtain corn pulp pretreatment solution; (2) taking steps: (1) mixing corn pulp pretreatment solution with HNO3 solution to react sufficiently, then adding a certain amount of CaCO3 to react sufficiently to obtain corn pulp treatment solution; (3) taking steps (2) adjusting corn pulp treatment solution to adjust P. The improved corn syrup is obtained from H to 7.0 7.5. The addition of HNO3 is 4%-6%(w/v) and the addition of CaCO3 is 10%-15%(w/v) in step (2). The invention can prolong the storage time of corn syrup without significantly affecting the nutrient composition of corn syrup, and has good application prospect.
【技术实现步骤摘要】
一种红霉素发酵生产用的改良玉米浆及其制备方法和应用
本专利技术涉及发酵工程领域，具体涉及一种红霉素发酵生产用的改良玉米浆及其制备方法和应用。
技术介绍
红霉素(英文：Erythromycin，Er)是1952年在菲律宾Panay岛土壤中分离的红霉素链霉菌(Streptomyceserythreus)经发酵培养所产生一种碱性抗生素，是大环内酯(macrolide)系的代表性的抗生素。红霉素具有广谱抗菌作用，对革兰阳性菌，如葡萄球菌、化脓性链球菌、绿色链球菌、肺炎链球菌、粪炭疽杆菌等有较强的抑制作用。现有红霉素发酵多采用多级发酵模式，其中红霉素种子、发酵、补料培养基主要组成原辅料有：玉米浆、玉米淀粉、糊精、黄豆饼粉、硫酸铵、碳酸钙、植物油。玉米浆是指玉米粒经亚硫酸浸泡后浓缩而成的黄褐色液体，其中含有丰富的可溶性蛋白、氨基酸、生长因子和一些前体物质，含有大约40％～50％固体物质，能够促进红霉素生物代谢和生物合成。由于组分复杂，pH过低，溶磷不稳定，玉米浆是红霉素发酵原辅料中最不稳定的组成成分之一，其易长有腐败性细菌、不易储存。因此，为实现将玉米浆作为发酵培养基稳定组分，其预处理方法研究显得十分重要。目前尚未见对红霉素发酵中使用的玉米浆进行预处理的方法的报道。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术提供了一种改良玉米浆的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将玉米浆与水按体积比1∶(0.5～2)混合，得玉米浆预处理液；(2)取步骤(1)中玉米浆预处理液，加入HNO3溶液混合充分反应后，再加入CaCOa充分反应，得玉米浆处理液；(3)取步骤(2)中玉米浆处理液，调pH至7.0-7.5，得改良玉米浆；步骤(2)所述HNO3溶液中HNO3的质量为玉米浆预处理液的4％～6％(w/v)；步骤(2)所述CaCO3的添加量是玉米浆预处理液的10％～15％(w/v)。如前述的制备方法，步骤(2)所述HNO3溶液浓度是10％～15％(w/v)。如前述的制备方法，步骤(2)中加入CaCO3后反应时间为15～20分钟。如前述的制备方法，步骤(3)所述pH值为7.5。如前述的制备方法，步骤(3)调pH的物质为氢氧化钠或氢氧化钠的溶液。本专利技术还提供了前述方法制备得到的改良玉米浆。本专利技术还提供了前述改良玉米浆在培养产红霉素的真菌培养中的用途。进一步地，所述产红霉素的真菌为红霉素链霉菌。本专利技术还提供了前述改良玉米浆在红霉素发酵生产中的用途。本专利技术还提供了前述改良玉米浆在制备产红霉素的真菌的培养基中的用途。本专利技术具有以下有益效果：1)对玉米浆的营养成分改变小，其可溶性蛋白、氨基酸含量与原玉米浆无显著差别。2)可使玉米浆中溶解的磷元素沉淀，降低玉米浆滋生腐败性细菌的风险，延长玉米浆的可储存时限。3)改良后的玉米浆适合红霉素发酵生产。实验证明，放瓶发酵得到的红霉素效价可达8023u/ml，放罐发酵得到的红霉素效价9500u/ml。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过具体实施方式对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。具体实施方式实施例一红霉素发酵生产用的改良玉米浆的制备方法玉米浆购置于伊犁恒辉淀粉有限公司，生产日期为2017年10月13日。(一)改良玉米浆制备方法1.玉米浆预处理：取玉米浆原料与等体积的生产工艺水混合后，得玉米浆预处理液；2.玉米浆处理液：取玉米浆预处理液，加入玉米浆体积的40％(v/v)的10-15％(w/v)HNO3溶液混合充分反应后，再加入10-15％(w/v)CaCO3反应15-20分钟，待反应过程中的泡沫消散，得玉米浆处理液；3.改良玉米浆：取玉米浆处理液，使用氢氧化钠调pH至7.5，得改良玉米浆。(二)改良玉米浆主要成分检测利用高效液相色谱(HPLC)、紫外分光光度计等仪器设备检测改良前后玉米浆主要成分，结果如表1和表2所示，表中除了干物质以外的其它项目均显示上清液中的含量。表1玉米浆主要参数检测表2玉米浆中各氨基酸含量由于本专利技术在玉米浆处理过程中加入等体积的生产工艺用水和一定量硝酸，因此干物质和还原糖有一定差异，但改良后玉米浆的营养成分和氨基酸基本不受影响，化学方法改良玉米浆中的溶磷以沉淀形式稳定存在，显微镜观察玉米浆中活菌较少，可稳定长期储存。实施例二红霉素发酵生产用的改良玉米浆的制备方法1.玉米浆预处理：取玉米浆原料与等体积的生产工艺水混合后，得玉米浆预处理液；2.玉米浆处理液：取玉米浆预处理液，加入40％(v/v)的10-15％(w/v)HNO3溶液混合充分反应后，再加入10-15％(w/v)CaCO3反应15-20分钟，待反应过程中的泡沫消散，得玉米浆处理液；3.改良玉米浆：取玉米浆处理液，使用氢氧化钠调pH至7.0，得改良玉米浆。以下使用实验例对本专利技术进行进一步说明。下述实例中的红霉素菌株为红霉素链霉菌的生产菌株。下述实例中的斜面孢子是按常规方法将冷冻保存在砂土管中的红霉素链霉菌孢子接种至灭菌好的斜面培养基中，在温度34℃条件下培养8-9天，得红霉素斜面孢子。实验例一摇瓶中应用改良玉米浆发酵生产红霉素对比试验(一)方法1.种子培养：将斜面孢子接种于经灭菌的种子培养基中，放置于260rpm/min摇床上，培养温度34℃，培养60小时得红霉素种子液种子培养基组成：改良玉米浆3.0％、黄豆粉3.5％、淀粉3.5％、CaCO30.6％、NaCl0.5％、糊精3.5％、硫铵0.3％、适量消泡剂，其余为生产工艺用水，以重量百分比计，灭菌备用。2.发酵培养将过程1中红霉素种子液按20％比例接种于经灭菌的发酵培养基中，放置于260rpm/min摇床上，培养温度32-34℃，发酵40小时后补入50-60％正丙醇，培养至155-160小时停止发酵，得红霉素发酵液。发酵培养基组成：改良玉米浆4.4％、黄豆粉3.5％、淀粉5.5％、CaCO30.6％、NaCl0.5％、硫铵0.3％、消泡剂0.02％，其余为生产工艺用水，以重量百分比计，灭菌备用。3.红霉素效价检测由于红霉素与硫酸反应生成黄色物质，其最大吸收波长为483nm。因此用分光光度计进行比色测定，能够定量分析，具体方法如下：3.1标准曲线的绘制分别量取红霉素标准溶液1.0ml，1.5ml，2.0ml，2.5ml，30.ml3.5ml4.0ml于7个25ml容量瓶中(约64U/ml-256U/ml)，分别制得红霉素工作标准溶液。分别精密量取各红霉素工作标准溶液2.0ml于7支(30×200mm)试管中，精密加入混合显色溶液8ml，摇匀，放置80℃水浴中加热6min(从放入后开始计时)，取出后，立即用水冷至室温，使用分光光度计以纯化水为空白，在483nm波长处测定吸光度。以加入红霉素效价含量(U)对吸光度值绘制标准曲线，求得回归线方程。3.2化学效价的测定取经滤纸过滤或离心分离后的各工序提炼发酵液上清液适量，用稀释剂稀释使成约100-200U/ml红霉素的溶液，作为供试品溶液。精密量取供试液2.0ml，置30×200mm试管中，再精密加入混合显色本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种改良玉米浆的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将玉米浆与水按体积比1∶(0.5～2)混合，得玉米浆预处理液；(2)取步骤(1)中玉米浆预处理液，加入HNO3溶液混合充分反应后，再加入CaCO3充分反应，得玉米浆处理液；(3)取步骤(2)中玉米浆处理液，调pH至7.0‑7.5，得改良玉米浆；步骤(2)所述HNO3溶液中HNO3的质量为玉米浆预处理液的4％～6％(w/v)；步骤(2)所述CaCO3的添加量是玉米浆预处理液的10％～15％(w/v)。
【技术特征摘要】
1.一种改良玉米浆的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将玉米浆与水按体积比1∶(0.5～2)混合，得玉米浆预处理液；(2)取步骤(1)中玉米浆预处理液，加入HNO3溶液混合充分反应后，再加入CaCO3充分反应，得玉米浆处理液；(3)取步骤(2)中玉米浆处理液，调pH至7.0-7.5，得改良玉米浆；步骤(2)所述HNO3溶液中HNO3的质量为玉米浆预处理液的4％～6％(w/v)；步骤(2)所述CaCO3的添加量是玉米浆预处理液的10％～15％(w/v)。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述HNO3溶液浓度是10％～15％(w/v)。3...
【专利技术属性】
技术研发人员：周路，张云辉，冯雪贵，姜开亮，赵晓龙，袁彬青，
申请(专利权)人：伊犁川宁生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：新疆,65
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