一种能够增强蛋白质合成效率的串联DNA元件制造技术

本发明专利技术提供了一种能够增强蛋白质合成效率的串联DNA元件，具体地，本发明专利技术的核酸构建物由真核细胞（如酵母）来源的IRES增强子（如ScBOI1、ScFLO8、ScNCE102、ScMSN1、KlFLO8、KlNCE102、KlMSN1、KlBOI1）、Ω序列以及酵母特异性的Kozak序列串联而成。在酵母体外生物合成体系（如酵母体外蛋白合成体系）中应用本发明专利技术的核酸构建物，可显著提高蛋白合成效率。

A Series DNA Element Enhancing the Efficiency of Protein Synthesis

The present invention provides a tandem DNA element capable of enhancing protein synthesis efficiency. Specifically, the nucleic acid construct of the present invention is composed of IRES enhancers (such as ScBOI1, ScFLO8, ScNCE102, ScMSN1, KlFLO8, KlNCE102, KlMSN1, KlBOI1), Omega sequences and yeast-specific Kozak sequences) derived from eukaryotic cells (such as yeast). The application of the nucleic acid construct of the present invention in the yeast in vitro biosynthesis system (such as the yeast in vitro protein synthesis system) can significantly improve the protein synthesis efficiency.

【技术实现步骤摘要】
一种能够增强蛋白质合成效率的串联DNA元件
本专利技术涉及生物
，具体地，涉及一种能够增强蛋白质合成效率的串联DNA元件。
技术介绍
蛋白质是细胞中的重要分子，几乎参与了细胞所有功能的执行。蛋白的序列和结构不同，决定了其功能的不同。在细胞内，蛋白可以作为酶类催化各种生化反应，可以作为信号分子协调生物体的各种活动，可以支持生物形态，储存能量，运输分子，并使生物体运动。在生物医学领域，蛋白质抗体作为靶向药物，是治疗癌症等疾病的重要手段。在细胞中，蛋白质翻译的调节在应对营养缺失等外界压力，细胞发育与分化等很多过程中发挥重要作用。蛋白质翻译的四个过程包括翻译起始、翻译延伸、翻译终止和核糖体再循环，其中翻译起始是受调控最多的一个过程。真核细胞的翻译起始可以分为两大类：“帽子结构”依赖的传统途径和“帽子结构”非依赖的途径(图1)。“帽子结构”依赖的翻译起始是一个非常复杂的过程，涉及十几种翻译起始因子和核糖体的40S小亚基。“帽子结构”非依赖的翻译起始则多是由位于mRNA5′端非翻译区的内部核糖体进入序列(internalribosomeentrysites,IRESs)介导的。IRESs最本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核酸构建物，其特征在于，所述核酸构建物含有结构如式I所示的核酸序列：Z1‑Z2‑Z3‑Z4‑Z5    (I)式中，Z1－Z5分别为用于构成所述构建物的元件；各“‑”独立地为键或核苷酸连接序列；Z1为增强子元件，所述增强子元件包括IRES元件；Z2为烟草花叶病毒的5’端前导序列(leading sequence)‑Ω序列；Z3为腺嘌呤脱氧核苷酸的寡聚链[oligo(A)]n；Z4为翻译起始密码子；Z5为丝氨酸密码子；其中，所述Z3、Z4和Z5组成了Kozak序列，所述Kozak序列来源于酵母。

【技术特征摘要】
1.一种核酸构建物，其特征在于，所述核酸构建物含有结构如式I所示的核酸序列：Z1-Z2-Z3-Z4-Z5(I)式中，Z1－Z5分别为用于构成所述构建物的元件；各“-”独立地为键或核苷酸连接序列；Z1为增强子元件，所述增强子元件包括IRES元件；Z2为烟草花叶病毒的5’端前导序列(leadingsequence)-Ω序列；Z3为腺嘌呤脱氧核苷酸的寡聚链[oligo(A)]n；Z4为翻译起始密码子；Z5为丝氨酸密码子；其中，所述Z3、Z4和Z5组成了Kozak序列，所述Kozak序列来源于酵母。2.一种核酸构建物，其特征在于，所述的构建物具有从5′至3′的式II结构：Z1-Z2Z3-Z4-Z5-Z6(II)式中，Z1－Z6分别为用于构成所述构建物的元件；各“-”独立地为键或核苷酸连接序列；Z1为增强子元件，所述增强子元件包括IRES元件；Z2为烟草花叶病毒的5’端前导序列(leadingsequence)-Ω序列；Z3为腺嘌呤脱氧核苷酸的寡聚链[oligo(A)]n;Z4为翻译起始密码子；Z5为丝氨酸密码子；Z6为外源蛋白的编码序列；其中，所述Z3、Z4和Z5组成了Kozak序列，所述Kozak序列来源于酵母。3.一种核酸构建物，其特征在于，所述的构建物具有从5’至3’的式III结构：Z0-Z1-Z2Z3-Z4-Z5-Z6(III)式中，Z0－Z6分别为用于构成所述构建物的元件；各“-”独立地为键或核苷酸连接序列；Z0为启动子元件，所述启动子元件选自下组：T7启动子、T3启动子、SP6启动子、或其组合；Z1为增强子元件，所述增强子元件包括IRES元件；Z2为烟草花叶病毒的5’端前导序列(leadingsequence)-Ω序列；Z3为腺嘌呤脱氧核苷酸的寡聚链[oligo(A)]n;Z4为翻译起始密码子；Z5为丝氨酸密码子；Z6为外源蛋白的编码序列；其中，所述Z3...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭敏，王海鹏，柴智，徐开，周子鉴，章小玲，陈鉴冰，王静，于雪，
申请(专利权)人：康码上海生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31