一种肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统及其制备方法技术方案

本发明专利技术提供了一种肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统及其制备方法。本发明专利技术递药系统包括：靶向头基，基础载体，以及抗癌药物；其中，所述靶向头基为A54多肽，所述基础载体为两亲性聚合物，所述抗癌药物为人参皂苷CK；所述靶向头基通过连接基团与基础载体的疏水端连接形成递药载体；所述递药载体包载人参皂苷CK，形成肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统。本发明专利技术所制备的递药系统能明显提高人参皂苷CK的水溶性，并主动靶向肝癌细胞，对肝癌的临床治疗有重要意义。

A novel drug delivery system for hepatocellular carcinoma targeting ginsenoside CK-chitosan polymer micelles and its preparation method

The invention provides a liver cancer targeting drug delivery system of ginsenoside CK chitosan polymer micelle and a preparation method thereof. The drug delivery system of the present invention includes: targeting cephalic group, basic carrier and anticancer drug; among them, the targeting cephalic group is A54 polypeptide, the basic carrier is amphiphilic polymer, and the anticancer drug is ginsenoside CK; the targeting cephalic group forms a drug delivery carrier by connecting the hydrophobic end of the base carrier and the drug delivery carrier carries ginsenoside CK to form a liver cancer target. Drug delivery system to chitosan polymer micelles containing ginsenoside CK. The drug delivery system prepared by the invention can obviously improve the water solubility of ginsenoside CK and actively target hepatocellular carcinoma cells, which is of great significance for clinical treatment of hepatocellular carcinoma.

【技术实现步骤摘要】
一种肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统及其制备方法
本专利技术涉及生物技术与纳米制药领域，具体而言，涉及一种肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统及其制备方法。
技术介绍
纳米递药系统是在纳米技术、药剂学及临床医学的基础上发展起来的新型药物递送系统，广泛应用于癌症的治疗。其中，聚合物纳米胶束递药系统是由两亲型聚合物在水介质中自组装形成的具有纳米尺寸的大分子有序聚集体，其疏水性内壳可用于包载疏水性抗癌药物，提高药物的水溶性和稳定性，延长体内循环时间，进一步提高癌症治疗效果。人参皂苷CK是人参皂苷的主要活性成分，具有很强的抗癌活性，对于肝癌、结肠癌、乳腺癌及肺癌等多种癌细胞具有显著的抑制作用。但人参皂苷CK的水溶性差，生物利用率低，严重影响了其在临床的应用。壳聚糖是一种安全无毒且具有生物相容性和生物可降解性的天然多糖，其化学结构式中的活性基团易于化学修饰，可用于制备多功能纳米药物载体。壳聚糖及其衍生物由于其独特的性质已被广泛用于生物技术和纳米制药等领域。虽然将人参皂苷CK通过纳米递送系统包载(例如以壳聚糖及其衍生物作为载体)所制备成纳米药物能够在一定程度上解决人参皂苷CK的水溶性问题。然而，此类纳米载药系统的癌细胞靶向性仍有待改善。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统，本专利技术所提供的递药系统能够主动靶向肝癌细胞，提高药物治疗的有效性。本专利技术的第二目的在于提供一种所述的肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统的制备方法。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：一种肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统，包括：靶向头基，基础载体，以及抗癌药物；其中，所述靶向头基为A54多肽，所述基础载体为两亲性聚合物，所述抗癌药物为人参皂苷CK；所述靶向头基通过连接基团与基础载体的疏水端连接形成递药载体；所述递药载体包载人参皂苷CK，形成肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统。同时，本专利技术还提供了所述的肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统的制备方法，包括：(a)向溶有A54多肽的溶液中加入保护剂后混合反应，然后加入偶联剂继续反应；(b)将溶有连接化合物的溶液加入步骤(a)反应液中，混合反应后，加入偶联剂继续反应；(c)将溶有基础载体的溶液加入步骤(b)反应液中，混合反应后，调节反应液pH；然后，将反应液透析后干燥，得到递药载体；(d)向分散有递药载体的溶液中，加入溶有人参皂苷CK的溶液，反应后进行超声和透析处理，然后过滤、干燥，得到肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术中，以A54多肽对基础载体进行肝癌细胞靶向修饰，从而提高了递药系统的靶向性能，使其能够主动靶向肝癌细胞，并选择性地在肿瘤区域积累，从而增强抗癌药物人参皂苷CK治疗的有效性；同时，通过采用递药载体负载递药的方式，也能够提高人参皂苷CK的生物利用度，同时还能够起到药物缓释的功效。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，以下将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。图1为本专利技术实施例1肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统原子力学显微镜图；图2为本专利技术实施例1肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统粒径分布图；图3为本专利技术实施例1肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统Zeta电位分布图。具体实施方式下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限制本专利技术的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。本专利技术所提供的新型递药系统，是以A54多肽对羧甲基壳聚糖-脱氧胆酸基础载体修饰以形成递药载体，然后再以该递药载体包覆抗癌药物人参皂苷CK，从而形成的纳米胶束递药系统；其中，A54是由噬菌体展示随机肽库体内筛选出来的一种包含12种氨基酸的多肽，具有相对分子量小、低细胞毒性和体内可降解性等特点。肝癌细胞中A54受体表达率显著高于正常细胞，已有研究发现，A54能特异性靶向肝癌细胞。基础载体可以参照如下方法得到：将脱氧胆酸在有机溶剂(例如DMSO)中溶解，然后加入偶联剂(例如EDC(1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimidehydrochloride，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)和NHS(N-Hydroxysuccinimide，N-羟基丁二酰亚胺)，优选均为脱氧胆酸1.5倍摩尔比的用量)，室温下避光反应，得到脱氧胆酸NHS活性酯溶液；然后，将羧甲基壳聚糖在有机溶剂(例如甲醇)中溶解后，加入(优选采用滴加的方式)，室温条件下避光反应后，将反应液透析、干燥(优选为冷冻干燥)后，得到脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖聚合物基础载体。具体的，如上所述的递药系统中，A54多肽通过连接基团PEG(polyethyleneglycol，聚乙二醇)与两亲性聚合物基础载体(即羧甲基壳聚糖-脱氧胆酸基础载体)的疏水端连接，以形成递药载体；其中，递药载体中，PEG的两端分别与A54多肽和基础载体键合(通过反应所形成的化学键共价结合)。如上所形成的递药载体进一步包载疏水性抗癌药物人参皂苷CK后，形成能够靶向肝癌细胞的递药系统。本专利技术中，通过以具有肝癌细胞靶向特性的A54多肽对基础载体进行修饰，从而使得所得到的载人参皂苷CK壳聚糖聚合物纳米胶束递药系统具有良好的肝癌靶向性，使其能够主动靶向肝癌细胞，并选择性的在肿瘤区域积累，从而增强抗癌药物人参皂苷CK的治疗有效性。进一步的，本专利技术所提供的肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物(纳米)胶束递药系统的制备主要包括如下步骤：(a)将A54多肽溶于有机溶剂(例如DMF等)中，然后加入保护剂(Boc)2O(Di-tert-butyldicarbonate，二叔丁基二碳酸酯)，室温条件下避光搅拌反应(6-18h，优选12h)后，加入偶联剂EDC和NHS继续反应(1～3h)；此步骤中，A54多肽，保护剂((Boc)2O)，EDS和NHS的摩尔比为：1：(1.1～1.5)：(1.3～1.8)：(1.3～1.8)；优选的，此步骤中，A54多肽，(Boc)2O，EDS和NHS的摩尔比为：1：1.3：1.5：1.5。(b)将NH2-PEG-NH2在有机溶剂(例如DMF等，其摩尔用量与A54多肽的比例优选为1:1)中溶解后，加入步骤(a)反应液中，室温条件下搅拌反应(6-18h，优选12h)；然后，向反应液中加入DSC(N-Succinimidylcarbonate，N,N'-琥珀酰亚胺基碳酸酯)，搅拌反应9～12h。(c)将脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖聚合物基础载体溶于水中，然后将所得溶液加入步骤(b)反应液中，搅拌反应(6-18h，优选12h)；然后，加入酸(优选为盐酸)调节反应液pH至1.5-2.0，以进行脱保护(即除去保护基Boc)。然后，将反应液以纯水透析后干燥(优选冷冻干燥)，得到递药载体。(d)将递药载体分散于水本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统，其特征在于，包括：靶向头基，基础载体，以及抗癌药物；其中，所述靶向头基为A54多肽，所述基础载体为两亲性聚合物，所述抗癌药物为人参皂苷CK；所述靶向头基通过连接基团与基础载体的疏水端连接形成递药载体；所述递药载体包载人参皂苷CK，形成肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统。

【技术特征摘要】
1.一种肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统，其特征在于，包括：靶向头基，基础载体，以及抗癌药物；其中，所述靶向头基为A54多肽，所述基础载体为两亲性聚合物，所述抗癌药物为人参皂苷CK；所述靶向头基通过连接基团与基础载体的疏水端连接形成递药载体；所述递药载体包载人参皂苷CK，形成肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统。2.根据权利要求1所述的肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统，其特征在于，所述连接基团包括聚乙二醇基。3.根据权利要求1所述的肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统，其特征在于，所述基础载体为：以羧甲基壳聚糖为骨架偶联脱氧胆酸形成的两亲性聚合物；优选的，所述基础载体主要由以下方法得到：向溶有脱氧胆酸的溶液中加入偶联剂反应后，加入溶有羧甲基壳聚糖的溶液继续反应，所得反应液透析干燥后，得到基础载体。4.根据权利要求1所述的肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统，其特征在于，所述肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统的胶束粒径为100～250nm，多分散指数为0.10～0.35，Zeta电位为-25～-15mV，包封率为60-80％。5.权利要求1-4中任一项所述的肝癌靶向载人参皂苷CK壳聚糖聚合物胶束递药系统的制备方法，其特征在于，包括：(a)向溶有A54多肽的溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡卫成，张建梅，沈婷，张迹，
申请(专利权)人：淮阴师范学院，
类型：发明
国别省市：江苏,32