一种检测广州管圆线虫的纳米金及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种检测广州管圆线虫的纳米金及其应用，涉及广州管圆线虫检测技术领域。具体而言，该纳米金由纳米金基质包被广州管圆线虫抗原制成，该纳米金能够有效检测广州管圆线虫，具有良好的检测早期性和敏感度，且检测效率高，检测结果精准度好。

A Kind of Nanogold for Detecting Angiostrongylus cantonensis and Its Application

The invention discloses a nanogold for detecting Angiostrongylus cantonensis and its application, which relates to the technical field of Angiostrongylus cantonensis detection. Specifically, the nano-gold was prepared by coating the antigen of Angiostrongylus cantonensis with nano-gold matrix. The nano-gold can effectively detect Angiostrongylus cantonensis, with good early detection and sensitivity, high detection efficiency and high accuracy.

【技术实现步骤摘要】
一种检测广州管圆线虫的纳米金及其应用
本专利技术涉及广州管圆线虫检测
，具体而言，涉及一种检测广州管圆线虫的纳米金及其应用。
技术介绍
广州管圆线虫(Angiostrongyluscantonensis)是由我国陈新陶教授首次在广州褐家鼠及黑色鼠肺部血管内发现的一种食源性人兽共患寄生虫病，又称嗜酸粒细胞增多性脑膜炎或脑膜脑炎。在分类上属线型动物门、尾感器纲、原线目、管圆科、管圆线虫属。该虫的终宿主是啮齿动物，主要以褐家鼠和黑家鼠为主。从感染广州管圆线虫终宿主的鼠类粪便内分离出一期幼虫，感染中间宿主软体动物，主要以福寿螺、褐云玛瑙螺、蛞蝓、蜗牛为主。经两次蜕皮后发育成感染期幼虫，人类因生食或半生食含感染期幼虫的中间宿主或转续宿主而感染。随着人们饮食习惯的改变及中间宿主褐云玛瑙螺和福寿螺的不断繁殖，使该病的流行趋势逐年上升。1945年在台湾发现第一例人患广州管圆线虫病，1961年第二例患者由Horio和Alicata报道。之后，在太平洋、印度洋地区的部分岛屿和东南亚各国也相继发现了散在和爆发病例。1984年，在暨南大学医学院收治了一例“酸脑”病例，也是我国大陆首例确诊病例，随后在我国上海、广东、浙江、福建、辽宁、江苏、天津、牡丹江、温州等地有病例报道并有死亡病例出现。2006年在北京因食用半熟的螺肉暴发了160个病例，在云南大理地区一直存在散在病例，2010～2016年共报告63例广州管圆线虫病例，60例为临床诊断病例，据报道2017年在大理古城一游客感染该病，导致流产，这些患者多因半生食凉拌螺肉而感染。迄今为止，全世界患病人数已超过3000例。因此，2004年，国家卫生部将广州管圆线虫病列为一种严重危害人类健康的新发传染病。广州管圆线虫病的主要临床表现为剧烈头疼，伴有撕裂感，疼痛先有间歇性随后发作频繁，最后疼痛加剧且持续时间延长，药物一般仅对45％的患者在短时间内有效，其次还有颈项强直的特征，表现为恶心、呕吐、颈部活动疼痛、低中度发热。一些患者头、躯干或四肢有异常感，比如，针刺感、麻木、烧灼感、疼痛，有时还伴有自主神经功能紊乱，一过性的面部或肢体麻木。个别患者眼内发现虫体寄生，严重者出现视力障碍甚至失明。第Ⅴ期幼虫通过脑静脉经右心移行至肺部引起咳嗽、咳痰。当幼虫移行至消化系统时，患者会出现腹痛、腹泻或便秘，部分患者出现肝肿大。感染严重的患者出现昏迷，伴有后遗症，甚至死亡。广州管圆线虫病早期诊断成为预防和治疗的关键，目前，诊断该病的金标准是从患者的脑脊液、眼部、肺部或其他部位找到IV期、V期幼虫或成虫才可确诊。大多数病人经临床治疗愈后良好，很少有神经系统症状和体征异常的表现。导致大部分患者未做腰穿，即便做了脑脊液检查也会忽视对嗜酸性粒细胞的检查，因此漏诊或误诊率极高。免疫学检测对该病的诊断有一定的辅助价值，目前常采用ELISA检测患者血清或脊液中的抗体。IgM在感染III期幼虫后1周左右出现，IgG出现的稍晚一些，该方法不能做到早期检测。且免疫学检测除不能做到早期检测外，特异性比较低，容易与其他寄生虫感染血清抗体产生交叉反应，因此，如何快速早期诊断该病成为临床急需解决的问题之一。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种检测广州管圆线虫的纳米金，其由纳米金基质包被广州管圆线虫抗原制成，该纳米金能够检测广州管圆线虫，具有良好的检测早期性和敏感度，且检测效率高，检测结果精准度好。本专利技术的第二目的在于提供一种检测广州管圆线虫的试剂盒，其包括有上述检测广州管圆线虫的纳米金，具有能够快速准确检测广州管圆线虫的优点。本专利技术的第三目的在于提供一种制备上述纳米金的方法，该方法能够制备出可以快速精确检测广州管圆线虫的纳米金。本专利技术的第四目的在于提供一种检测广州管圆线虫的方法，该方法能够快速高效检测广州管圆线虫，具备更好的早期性和敏感度。本专利技术是这样实现的：一种检测广州管圆线虫的纳米金，其由纳米金基质包被抗原制成，该抗原为广州管圆线虫抗原。进一步地，广州管圆线虫抗原为以下一种或多种抗原的组合：广州管圆线幼虫抗原、广州管圆线成虫抗原以及广州管圆线虫排泄分泌抗原。具体地，上述广州管圆线幼虫抗原为广州管圆线V期幼虫粗抗原或广州管圆线V期幼虫纯化抗原。需要说明的是，在其他实施例中，广州管圆线幼虫抗原也可以是广州管圆线IV期幼虫粗抗原或广州管圆线IV期幼虫纯化抗原。V期幼虫粗抗原为广州管圆线幼虫全虫抗原；广州管圆线V期幼虫纯化抗原选自如下分子量的抗原：34kD、43kD、45kD以及55kD；优选地，广州管圆线幼虫纯化抗原为分子量43kD的抗原。具体地，广州管圆线成虫粗抗原为广州管圆线成虫全虫抗原；广州管圆线成虫纯化抗原选自如下分子量的抗原：36kD、43kD、45kD、90kD以及120kD；优选地，成虫纯化抗原为分子量45kD的抗原。上述广州管圆线排泄分泌抗原为V期幼虫排泄分泌抗原。需要说明的是，在其他实施例中，该广州管圆线排泄分泌抗原为IV期幼虫排泄分泌抗原。经本申请专利技术人研究，上述抗原均能够作为检测广州管圆线幼虫的抗原包被于纳米金基质上，且该检测相较于传统检测广州管圆线虫的方法具备更好的早期性和敏感度。具体地，纳米金颗粒，其具有良好的生物相容性，其合成方法简单、化学稳定性好易于抗原或抗体等生物大分子结合。纳米金表面易修饰，其含有巯基基团的有机化合物可通过Au-S共价键的形式结合到纳米金粒子表面，与药物或生物大分子结合，作为高效载体，例如，纳米金可以与抗原耦合，通过主动和被动的形式与抗体特异性结合。纳米金表面等离子共振效应(Surfaceplasmonresonance，SPR)是指金的自由电子的振动频率与入射光的波长发生共振耦合时，纳米金颗粒在紫外可见光区域内产生表面等离子共振现象。此外，纳米金颗粒间的相互作用会使SPR的波长发生变化，并伴随颜色的改变。Kamat等发现当纳米金颗粒聚集时，表面纵向等离子共振带变宽，且大幅度红移，颜色由原来的红色变成蓝色或紫色；分散时，由紫色或蓝色变成红色，常用于生物传感器制备、肿瘤热疗以及影像学研究等。纳米金颗粒表面具有独特的光学性质，导致纳米金颗粒在分散或聚集时出现不同的颜色变化，肉眼可见，受其本身大小、形状、组成以及颗粒间相互作用的影响。纳米金颗粒还具有吸附特性，因其表面具有很多悬空结合位点，易与其他原子结合，大大提高了纳米金表面的活性。可将其负载在其他物质表面以制备高效性能的纳米金催化剂，加速反应过程，缩短检测时间。纳米金标记技术的出现，使其成为继酶免疫标记、放射性同位素免疫标记以及荧光免疫标记物质之后又一标记技术。但在寄生虫病检测方面研究较少，尤其是对于广州管圆线虫并没有相关的研究，特别是组织脏器寄生虫病取材定点困难、有创伤，不易被患者接受，确诊率极低，血清学诊断在感染早期灵敏度不高，导致这类寄生虫病检出率低，影响患者的治愈率。本专利技术实施例将广州管圆线虫各类型抗原包被纳米金基质，以检测感染广州管圆线虫的血清抗体(待测样品)中是否存在广州管圆线虫。具体地，上述纳米金基质可以为纳米金基质为纳米金棒、纳米金球、纳米金管、纳米金链、纳米金壳、纳米金星等不同形状的纳米金颗粒；优选地，纳米金基质为纳米金棒。在本专利技术实施例中，广州管圆线虫各类型抗原包括有：广州管圆线幼虫粗抗原、广州管圆本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测广州管圆线虫的纳米金，其特征在于，其由纳米金基质包被抗原制成，所述抗原为广州管圆线虫抗原。

【技术特征摘要】
1.一种检测广州管圆线虫的纳米金，其特征在于，其由纳米金基质包被抗原制成，所述抗原为广州管圆线虫抗原。2.根据权利要求1所述的纳米金，其特征在于，所述广州管圆线虫抗原为以下一种或多种抗原的组合：广州管圆线幼虫抗原、广州管圆线成虫抗原以及广州管圆线虫排泄分泌抗原；优选地，所述广州管圆线幼虫抗原为广州管圆线幼虫粗抗原或广州管圆线幼虫纯化抗原，所述广州管圆线成虫抗原为广州管圆线成虫粗抗原或广州管圆线成虫纯化抗原，所述广州管圆线虫排泄分泌抗原为广州管圆线V期幼虫排泄分泌抗原。3.根据权利要求2所述的纳米金，其特征在于，所述广州管圆线幼虫纯化抗原选自如下分子量的抗原：34kD、43kD、45kD以及55kD，所述广州管线圆成虫纯化抗原选自如下分子量的抗原：36kD、43kD、45kD、90kD以及120kD；优选地，所述广州管圆线幼虫纯化抗原为分子量43kD的抗原，所述广州管圆线成虫纯化抗原为分子量45kD的抗原。4.根据权利要求1～3任一项所述的纳米金，其特征在于，所述纳米金基质为纳米金棒、纳米金球、纳米金管、纳米金链或纳米金壳；优选地，所述纳米金基质为纳米金棒。5.一种检测广州管圆线虫的试剂盒，其特征在于，其包括有权利要求1～4任一项所述的纳米金...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨毅梅，吕跃军，巫秀美，孔玉芳，刘衡，
申请(专利权)人：大理大学，
类型：发明
国别省市：云南,53