用于生肉和加工肉类产品的肉种鉴定的LC/MS/MS分析制造技术

本发明专利技术涉及用于检测肉类样品被另一类型的肉类污染的设备、方法和试剂盒，其使用鉴定特异性针对特定类型的肉类的肽的母离子‑子离子跃迁监测。检测的肉类类型可包括猪肉、牛肉、羔羊肉、鸡肉、鸭肉和/或马肉和其一或多种组合。

LC/MS/MS Analysis for Meat Species Identification of Raw Meat and Processed Meat Products

The present invention relates to a device, method and kit for detecting contamination of meat samples by another type of meat, which uses the mother ion and daughter ion transition monitoring for identifying specific peptide for a particular type of meat. The meat types detected may include pork, beef, lamb, chicken, duck and/or horse meat and one or more of their combinations.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于生肉和加工肉类产品的肉种鉴定的LC/MS/MS分析相关申请本申请要求2016年9月8日提交的美国临时申请第62/384,925号的优先权，其全部内容以引用的方式并入本文中。
本案涉及肉类样品中的污染的分析和鉴定。
技术介绍
食品标准局(FSA)(英国的独立政府部门)在2013年1月宣布已在由若干连锁超市出售的牛肉产品中鉴定出马和/或猪的脱氧核糖核酸(DNA)分子。跨越和超出欧洲的随访测试已显示此类污染广泛发生。其它肉种存在于假设纯的特定肉类产品样品中已引起普遍关注。污染可能是肉类产品中存在非所需量的猪肉、牛肉、羔羊肉、鸡肉、鸭肉和/或马肉中的一或多种的结果。但是，大部分现有测试方法基于使用聚合酶链反应(PCR)来检测肉类中的物种特异性DNA，其为费时的且不检测或鉴定蛋白质。这是一个问题，因为DNA可以在标准肉类加工和食品制造期间容易地破坏或去除。结果是马肉组织或其它污染物仍未在食物样品中被发现，尽管强有力地存在污染性蛋白质。替代性的基于蛋白质的方法，酶联免疫吸附分析(ELISA)可用于补充DNA测试。但是，ELISA方法仅检测蛋白质的一部分且不检测多种蛋白质标记物。已提出若干检测本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测牛肉样品被选自由猪肉、羔羊肉、鸡肉和鸭肉组成的群组的一或多种肉类污染的方法，所述方法包含：将蛋白水解酶添加至所述样品以将所述样品中除了牛肉以外的任何一或多种肉类的至少一部分溶解为多种肽；和使用液相色谱串联质谱LC‑MS/MS来分析所述多种肽以确定是否存在除了牛肉以外的一或多种肉类，其通过监测具有与选自由以下组成的群组的特定氨基酸序列相关的指定m/z值的至少一个母离子‑子离子对跃迁：i)SEQ ID NO:1，约453/581或453/480的m/z值；SEQ ID NO:2，约879/777或879/981的m/z值；或SEQ ID NO:3，约564/784或564/393的m/...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.09.08 US 62/384,9251.一种检测牛肉样品被选自由猪肉、羔羊肉、鸡肉和鸭肉组成的群组的一或多种肉类污染的方法，所述方法包含：将蛋白水解酶添加至所述样品以将所述样品中除了牛肉以外的任何一或多种肉类的至少一部分溶解为多种肽；和使用液相色谱串联质谱LC-MS/MS来分析所述多种肽以确定是否存在除了牛肉以外的一或多种肉类，其通过监测具有与选自由以下组成的群组的特定氨基酸序列相关的指定m/z值的至少一个母离子-子离子对跃迁：i)SEQIDNO:1，约453/581或453/480的m/z值；SEQIDNO:2，约879/777或879/981的m/z值；或SEQIDNO:3，约564/784或564/393的m/z值，针对猪肉；ii)SEQIDNO:9，约718/1037或718/745的m/z值；SEQIDNO:10，约623/523或623/823的m/z值；SEQIDNO:11，约515/659或515/832的m/z值；或SEQIDNO:12，约431/589或431/862的m/z值，针对羔羊肉；iii)SEQIDNO:13，约482/213或482/750的m/z值；SEQIDNO:14，约768/923或768/1037的m/z值；SEQIDNO:15，约789/890或789/213的m/z值；或SEQIDNO:16，约684/1136或684/1006的m/z值，针对鸡肉；iv)SEQIDNO:17，约677/1122或677/992的m/z值；SEQIDNO:18，约977/946或977/1442的m/z值；SEQIDNO:19，约550/820或550/473的m/z值；SEQIDNO:20，约693/954或693/826的m/z值，针对鸭肉；以及v)SEQIDNO:22，约888/1030或888/973的m/z值；或SEQIDNO:23，约818/948或818/847的m/z值，针对马肉。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述蛋白水解酶包含胰蛋白酶。3.根据权利要求1所述的方法，其中在溶解所述样品之前，如下制备所述样品：a)冷冻所述样品；b)研磨所述样品；c)将所述样品的蛋白质提取至提取溶剂中，所述提取溶剂包含tris、脲和硫脲；d)还原所提取蛋白质中的二硫键；以及e)阻断所还原蛋白质中的半胱氨酸和其它巯基。4.一种检测样品中的猪肉的方法，其包含：将蛋白水解酶添加至所述样品以将所述样品中的任何猪肉的至少一部分溶解为多种肽；以及使用液相色谱串联质谱LC-MS/MS来分析所述多种肽以确定是否存在猪肉，其通过监测具有与选自由以下组成的群组的特定氨基酸序列相关的指定m/z值的至少一个母离子-子离子对跃迁：SEQIDNO:1，约453/581或453/480的m/z值；SEQIDNO:2，约879/777或879/981的m/z值；或SEQIDNO:3，约564/784或564/393的m/z值。5.一种检测样品中的牛肉的方法，其包含：将蛋白水解酶添加至所述样品以将所述样品中的任何牛肉的至少一部分溶解为多种肽；以及使用液相色谱串联质谱LC-MS/MS来分析所述多种肽以确定是否存在牛肉，其通过监测具有与选自由以下组成的群组的特定氨基酸序列相关的指定m/z值的至少一个母离子-子离子对跃迁：SEQIDNO:5，约462/722或462/575的m/z值；SEQIDNO:6，约582/951或582/708的m/z值；SEQIDNO:7，约595/974或595/215的m/z值；或SEQIDNO:8，约583/703或583/759的m/z值。6.一种检测样品中的羔羊肉的方法，其包含：将蛋白水解酶添加至所述样品以将所述样品中的任何羔羊肉的至少一部分溶解为多种肽；以及使用液相色谱串联质谱LC-MS/MS来分析所述多种肽以确定是否存在羔羊肉，其通过监测具有与选自由以下组成的群组的特定氨基酸序列相关的指定m/z值的至少一个母离子-子离子对跃迁：SEQIDNO:9，约718/1037或718/745的m/z值；SEQIDNO:10，约623/523或623/823的m/z值；SEQIDNO:11，约515/659或515/832的m/z值；或SEQIDNO:12，约431/589或431/862的m/z值。7.一种检测样品中的鸡肉的方法，其包含：将蛋白水解酶添加至所述样品以将所述样品中的任何鸡肉的至少一部分溶解为多种肽；以及使用液相色谱串联质谱LC-MS/MS来分析所述多种肽以确定是否存在鸡肉...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭立海，刘华芬，斯蒂芬·洛克，牟思，覃培斌，熊蕾，
申请(专利权)人：DH科技发展私人贸易有限公司，
类型：发明
国别省市：新加坡,SG