一种利用干冰运输胚胎的方法及运输装置制造方法及图纸

本发明专利技术公开了一种利用干冰运输胚胎的方法及运输装置。其中，方法包括：S1、将获取的胚胎置于平衡液中，然后取出并置于保存液中；S2、向无菌麦管中顺序地置入的蔗糖培养液、间隔空气柱、混合有胚胎的保存液、间隔空气柱和蔗糖培养液；S3、将经密封处理的无菌麦管封装于传热保护容器内，再将传热保护容器置于无菌保温箱中，最后将干冰填充于无菌保温箱与传热保护容器之间并使干冰包覆传热保护容器，直至被运输至目的地。本发明专利技术通过对保存液和平衡液的改进，使胚胎能够在干冰温度下保持玻璃化稳定状态，从而利用价格相对低廉的干冰即可完成整个胚胎的临时保存及运输的过程，有效地解决了因采用液氮或其他冷冻介质进行临时保存及运输而产生的系列问题。

A Method and Transport Device for Transporting Embryos by Dry Ice

The invention discloses a method for transporting embryos by using dry ice and a transporting device. Among them, the methods include: S1, putting the obtained embryos in the equilibrium solution, then taking them out and putting them in the preservation solution; S2, sequentially putting sucrose culture medium, spaced air column, mixed embryo storage liquid, spaced air column and sucrose culture medium into sterile wheat tube; S3, encapsulating the sealed sterile wheat tube in the heat transfer protection container, and then putting the heat transfer protection container in the heat transfer protection container. In the sterile incubator, the dry ice is filled between the sterile incubator and the heat transfer protection container, and the dry ice is coated with the heat transfer protection container until it is transported to the destination. By improving the preservation solution and balance solution, the embryo can keep the vitrification stable state at the dry ice temperature, so that the whole embryo can be temporarily preserved and transported by using relatively low-cost dry ice, effectively solving a series of problems arising from the use of liquid nitrogen or other refrigerants for temporary preservation and transportation.

【技术实现步骤摘要】
一种利用干冰运输胚胎的方法及运输装置
本专利技术涉及生物工程
，尤其是一种利用干冰运输胚胎的方法及运输装置。
技术介绍
辅助生殖技术是一种集胚胎分割、嵌合、移植、体外受精、转基因等技术于一体的综合性技术，不但是动物繁殖领域的重要技术革命，也是治疗人类不孕不育的重要技术手段，利用此技术可以充分挖掘动物的遗传和繁殖能力、增加纯种家畜和优秀个体的后代数量、缩短家畜的改良周期以及保存具有优良遗传特性的胚胎和基因，在生物学及医学领域的被广泛地研究和应用。其中，胚胎移植技术(又称受精卵移植技术)是整个辅助生殖技术中不可或缺的一个环节，所谓的胚胎移植技术主要是指将通过各种技术得到的胚胎(如自然胚胎、体外受精胚胎、克隆胚胎等等)，经手术操作移植到同种的受体雌性动物体内，后期发育并能得到后代的新技术。在实际应用的过程中，胚胎的获取工作通常是在实验室内进行的，而胚胎移植操作则通常是在养殖场内(或其他专用实验室内)进行的。因此，在胚胎生产后到移植前的这段周期内，则必然会存在一个对胚胎进行临时保存和输送的过程，而此过程往往会对胚胎在受体动物体内的发育以及妊娠率起到至关重要的影响。目前，业内在对胚胎进行临时保存及运输时所主要采用的方式是液氮保存运输，即：通过将获取的胚胎放在液氮运输罐中来完成保存和运输；然而，此种方式却存在如下缺陷：1、利用液氮进行胚胎保存实质上是使胚胎处于玻璃化状态，这种状态一般在液氮温度(即：-196摄氏度)会保持稳定，但当保存温度高于-130摄氏度时，胚胎的玻璃化状态就无法保持稳定或者显现出不稳定的状况，容易导致胚胎内部细胞内的冰晶再一次形成(即：重结晶)，从而伤害胚胎细胞。2、液氮运输罐本身价格昂贵，而且运输过程胚胎必须放置在液氮中，在胚胎运输到目的地后还需要返还空置的液氮运输罐，不但操作极为繁琐，而且运输及保存的费用极为高昂。
技术实现思路
针对上述现有技术存在的不足，本专利技术的第一个目的在于提供一种利用干冰运输胚胎的方法；本专利技术的第二个目的在于提供一种适用于此方法的运输装置。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种利用干冰运输胚胎的方法，它包括以下步骤：S1、胚胎预处理：将获取的胚胎置于平衡液中处理至少2min，取出并置于保存液中，其中，按质量摩尔浓度计，平衡液以HTF培养基为基础液由11.0mol/kg乙二醇、0.7mol/kg蔗糖和0.0062mol/kg聚蔗糖混合而成；按质量摩尔浓度计，保存液以HTF培养基为基础液由24.6mol/kg乙二醇、3.1mol/kg蔗糖和0.0062mol/kg聚蔗糖混合而成；S2、胚胎入管：按一定长度分别向无菌麦管中顺序地置入的蔗糖培养液、间隔空气柱、混合有胚胎的保存液、间隔空气柱和蔗糖培养液，然后将无菌麦管的两个端口作密封处理；S3、装箱运输：首先将经过密封处理的无菌麦管封装于传热保护容器内，随后再将传热保护容器置于无菌保温箱中，最后将干冰填充于无菌保温箱与传热保护容器之间，并保持干冰始终包覆传热保护容器直至被运输至目的地；S4、胚胎复苏：取出无菌麦管并对无菌麦管作室温水浴处理，即可复苏胚胎。优选地，在完成步骤2后并执行步骤3之前的期间内，将无菌麦管置于液氮中作临时保存处理。优选地，在完成步骤S3后并执行步骤S4之前的期间内，取出无菌麦管并将无菌麦管置于液氮中作临时保存处理。优选地，在步骤S3中，在48h内将无菌保温箱运输至目的地；随后取出无菌麦管并对无菌麦管作临时保存处理或胚胎复苏处理。优选地，在步骤S2中，对容积为0.25ML的麦管作紫外线照射消毒处理以获得无菌麦管，置入的混合有胚胎的保存液的长度为2cm。优选地，在步骤S3中，对保温箱和传热保护容器分别作紫外线照射消毒处理。一种利用干冰运输胚胎的运输装置，它包括保温箱体、置于保温箱体内的传热保护容器、置于保温箱体的内壁与传热保护容器的外壁之间的干冰碎块层以及封装于传热保护容器内且内部填充有胚胎的无菌麦管，所述无菌麦管的两个端口作密封处理。优选地，所述保温箱体由聚乙烯泡沫材料制成，所述保温箱体与传热保护容器之间形成有真空保温空间，所述干冰碎块层位于真空保温空间内。优选地，所述传热保护容器为由铝合金材料制成且侧壁上具有镂空孔位的圆筒状结构体。优选地，无菌麦管内形成有经填充蔗糖培养液所形成的营养液段、经填充空气所形成的间隔空气段以及经填充保存液所形成以用于混合胚胎的保存液段，所述保存液段位于相邻的两个间隔空气段之间，且所述营养液段与间隔空气段相邻并位于无菌麦管的至少一端。由于采用了上述方案，本专利技术通过对保存液和平衡液的改进，使胚胎能够在干冰温度下保持玻璃化稳定状态，从而利用价格相对低廉的干冰即可完成整个胚胎的临时保存及运输的过程，有效地解决了因采用液氮或其他冷冻介质进行临时保存及运输而产生的诸如运输成本高、操作繁琐、胚胎玻璃化状态不稳定等系列问题。附图说明图1是本专利技术实施例的无菌麦管内所填充内容物的分布示意图；图2是本专利技术实施例的运输装置的截面结构示意图。具体实施方式以下结合附图对本专利技术的实施例进行详细说明，但是本专利技术可以由权利要求限定和覆盖的多种不同方式实施。本实施例提供的一种利用干冰运输胚胎的方法，包括以下步骤：S1、胚胎预处理：在室温状态下，将获取的胚胎(包括但不限于如自然胚胎、体外受精胚胎、克隆胚胎等)置于平衡液中处理至少2min后(最好为2-10min)，然后将胚胎从平衡液中取出并置于保存液中；其中，按质量摩尔浓度计，平衡液以HTF培养基为基础液由11.0mol/kg乙二醇、0.7mol/kg蔗糖和0.0062mol/kg聚蔗糖混合而成；按质量摩尔浓度计，保存液以HTF培养基为基础液由24.6mol/kg乙二醇、3.1mol/kg蔗糖和0.0062mol/kg聚蔗糖混合而成；S2、胚胎入管：如图1所示，按一定长度分别向无菌麦管中顺序地置入的蔗糖培养液a1(其基础成分主要有蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾、溴麝香草酚兰水溶液、琼脂、蒸馏水等)、间隔空气柱b1(即：由清洁空气充入无菌麦管中后所形成的具有一定长度距离的空气段)、混合有胚胎的保存液c、间隔空气柱b2和蔗糖培养液a2，然后将无菌麦管的两个端口作密封处理(在具体实施时，可将上述材料吸入的一端用密封塞塞住、相对端则可利用酒精等加热后作热压封口处理)，从而不但可以利用位于胚胎两侧的空气和蔗糖培养液实现对胚胎的隔离，而且保证胚胎在运输的过程中具有充足的营养和气体供给；S3、装箱运输：首先将经过密封处理的无菌麦管封装于传热保护容器(其可根据实际情况采用具有良好导热性能的材料制作而成)内，随后再将传热保护容器置于无菌保温箱中，最后将干冰填充于无菌保温箱与传热保护容器之间，并保持干冰始终包覆传热保护容器直至被运输至目的地；S4、胚胎复苏：取出无菌麦管并对无菌麦管作室温水浴处理，即可复苏胚胎；在将胚胎释放于培养皿中后即可为后续的胚胎移植做好准备工作。由此，基于目前胚胎保存及运输过程中只能通过液氮进行冷冻保存处理(因为只有液氮温度才能保证胚胎玻璃化的稳定状态)而容易导致胚胎运输成本高、操作繁琐的现状，以及若更换保存介质(即采用其他介质来替换液氮)则容易导致胚胎发生重结晶现象而损伤细胞的问题；从解决冷冻胚胎稳定性的角度出发，本专利技术实施例通过对现有的保存液本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用干冰运输胚胎的方法，其特征在于：它包括以下步骤：S1、胚胎预处理：将获取的胚胎置于平衡液中处理至少2min，取出并置于保存液中，其中，按质量摩尔浓度计，平衡液以HTF培养基为基础液由11.0mol/kg乙二醇、0.7mol/kg蔗糖和0.0062mol/kg聚蔗糖混合而成；按质量摩尔浓度计，保存液以HTF培养基为基础液由24.6mol/kg乙二醇、3.1mol/kg蔗糖和0.0062mol/kg聚蔗糖混合而成；S2、胚胎入管：按一定长度分别向无菌麦管中顺序地置入的蔗糖培养液、间隔空气柱、混合有胚胎的保存液、间隔空气柱和蔗糖培养液，然后将无菌麦管的两个端口作密封处理；S3、装箱运输：首先将经过密封处理的无菌麦管封装于传热保护容器内，随后再将传热保护容器置于无菌保温箱中，最后将干冰填充于无菌保温箱与传热保护容器之间，并保持干冰始终包覆传热保护容器直至被运输至目的地；S4、胚胎复苏：取出无菌麦管并对无菌麦管作室温水浴处理，即可复苏胚胎。

【技术特征摘要】
1.一种利用干冰运输胚胎的方法，其特征在于：它包括以下步骤：S1、胚胎预处理：将获取的胚胎置于平衡液中处理至少2min，取出并置于保存液中，其中，按质量摩尔浓度计，平衡液以HTF培养基为基础液由11.0mol/kg乙二醇、0.7mol/kg蔗糖和0.0062mol/kg聚蔗糖混合而成；按质量摩尔浓度计，保存液以HTF培养基为基础液由24.6mol/kg乙二醇、3.1mol/kg蔗糖和0.0062mol/kg聚蔗糖混合而成；S2、胚胎入管：按一定长度分别向无菌麦管中顺序地置入的蔗糖培养液、间隔空气柱、混合有胚胎的保存液、间隔空气柱和蔗糖培养液，然后将无菌麦管的两个端口作密封处理；S3、装箱运输：首先将经过密封处理的无菌麦管封装于传热保护容器内，随后再将传热保护容器置于无菌保温箱中，最后将干冰填充于无菌保温箱与传热保护容器之间，并保持干冰始终包覆传热保护容器直至被运输至目的地；S4、胚胎复苏：取出无菌麦管并对无菌麦管作室温水浴处理，即可复苏胚胎。2.如权利要求1所述的一种利用干冰运输胚胎的方法，其特征在于：在完成步骤2后并执行步骤3之前的期间内，将无菌麦管置于液氮中作临时保存处理。3.如权利要求1所述的一种利用干冰运输胚胎的方法，其特征在于：在完成步骤S3后并执行步骤S4之前的期间内，取出无菌麦管并将无菌麦管置于液氮中作临时保存处理。4.如权利要求1所述的一种利用干冰运输胚胎的方法，其特征在于：在步骤S3中，在48h内...

【专利技术属性】
技术研发人员：金波，刘湘娟，
申请(专利权)人：力盟低温医学深圳有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44