The invention discloses a method for rapid DNA extraction from fish scales for high-throughput microsatellite analysis. The method can extract fish DNA quickly by taking fish scales, adding denaturing liquid, boiling, and finally adding neutral liquid. Compared with traditional DNA extraction method, the method has the advantages of convenient sampling, simple operation, rapid extraction and economic benefit. The template of high throughput microsatellite analysis has the same effect as DNA extracted by traditional methods.
【技术实现步骤摘要】
用于高通量微卫星分析的鱼鳞DNA快速提取方法
本专利技术属于分子生物学
,涉及一种DNA提取方法,具体为用于高通量微卫星分析的鱼鳞DNA快速提取方法。
技术介绍
在鱼类种群遗传学的研究中,以鱼类基因组DNA为研究对象,运用SSR等分子标记对种群进行遗传多样性分析以及种群鉴定。而在DNA提取过程中,通常以血液、肌肉、鳍条等组织为样品,应用酚-仿、磁珠富集、DNA提取试剂盒等方法提取DNA,DNA长度能达到100Kb以上,质量稳定可靠,可直接应用于PCR、Q-PCR、Southern杂交等分子生物学实验。但在分子标记应用上,PCR扩增模板不需要长链DNA,质量不高的短片段DNA也能扩增目的条带,获得相同效果。另外,血液样品的采集虽然是一种非伤害性取样,但费时费力,而且还需要熟练操作的技术人员,准确快速的从尾静脉抽取血液。肌肉、鳍条等组织的取样则是一种伤害性取样,影响鱼类的生理功能,而且极易引起鱼类伤口感染,导致病害发生,最终引起鱼类死亡。鱼类鳞片取样则简便易行,既可从鱼体表取样,也可收集鱼自身脱落的鳞片。虽然鳞片取样也是一种伤害性取样,但1至2片鳞片的缺失显然不 ...
【技术保护点】
1.用于高通量微卫星分析的鱼鳞DNA快速提取方法,其特征在于,所述方法包含以下步骤:(1)用镊子从鲤鱼尾部取鳞片1至2片,剪碎,放入1.5mL的EP管中;(2)向EP管中加入75μL碱性裂解液,放入95℃水浴锅中加热20~60分钟;(3)将步骤(2)中的反应液迅速置于冰水中冷却2~5分钟;(4)向步骤(3)中的加入中和缓冲液75μL;(5)收集步骤(4)中的DNA,直接取1~3μL作为模板,用于高通量微卫星PCR扩增。
【技术特征摘要】
1.用于高通量微卫星分析的鱼鳞DNA快速提取方法,其特征在于,所述方法包含以下步骤:(1)用镊子从鲤鱼尾部取鳞片1至2片,剪碎,放入1.5mL的EP管中;(2)向EP管中加入75μL碱性裂解液,放入95℃水浴锅中加热20~60分钟;(3)将步骤(2)中的反应液迅速置于冰水中冷却2~5分钟;(4)向步骤(3)中的加入中和缓冲液75μL;(5)收集步骤(4)中的DNA,直接取1~3μL作为模板,用于高通量微卫星PCR扩增。2.根据权利要求1所述的用于高通量微卫星分析的鱼鳞DNA快速提取方法,其特征在于,所述碱...
【专利技术属性】
技术研发人员:唐永凯,
申请(专利权)人:中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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