一种胰岛素或胰岛素衍生物前体制备方法技术

本发明专利技术公开了一种胰岛素或胰岛素衍生物前体制备方法，包括以下步骤：S1、向胰岛素前体蛋白的发酵液中添加蛋白酶；S2、调节所述步骤S1处理后的溶液的pH值和温度使蛋白酶进行酶切，酶切后得到含有胰岛素或胰岛素衍生物前体的溶液。所述制备方法还可以包括步骤S3、对酶切后的含有胰岛素或胰岛素衍生物前体的溶液进行等电点沉淀回收操作，得到纯度更高的胰岛素或胰岛素衍生物前体。与现有技术相比，通过本发明专利技术方案制备胰岛素或胰岛素衍生物前体操作简便、设备投入低且工艺过程收率高，具有良好的工业应用前景。

A Method for Preparing Insulin or Insulin Derivative Precursors

The invention discloses a method for preparing insulin or insulin derivative precursors, which comprises the following steps: S1, adding protease to the fermentation broth of insulin precursor protein; S2, adjusting the pH value and temperature of the solution after treatment to enable the protease to be digested, and the solution containing insulin or insulin derivative precursor is obtained after digestion. The preparation method can also include isoelectric point precipitation recovery of the solution containing insulin or insulin derivative precursor after enzymatic digestion to obtain insulin or insulin derivative precursor with higher purity. Compared with the prior art, the preparation of insulin or insulin derivative precursor by the scheme of the invention has the advantages of simple operation, low equipment input and high process yield, and has good industrial application prospect.

【技术实现步骤摘要】
一种胰岛素或胰岛素衍生物前体制备方法
本专利技术涉及生物医药
，具体涉及一种胰岛素或胰岛素衍生物前体制备方法。
技术介绍
胰岛素是糖尿病治疗过程中的重要药物之一，目前，市场生产的胰岛素主要采用重组技术，重组胰岛素的生产过程通常包括以下几个步骤：S1、通过微生物如大肠杆菌或酵母菌等表达胰岛素原；S2、通过纯化后去除发酵液中的大部分杂质；S3、通过胰蛋白酶或赖氨酰内切酶酶切获得去B链30位氨基酸残基的胰岛素(DesB30胰岛素)固体粉末；S4、对上述操作得到的DesB30胰岛素进行不同的修饰得到功效不同的重组胰岛素衍生物，如通过转肽反应等工艺可以获得起效迅速的门冬胰岛素；或通过不同脂肪酸侧链的修饰可以获得长效的地特胰岛素或德谷胰岛素。其中，步骤S2中胰岛素原纯化方式通常采用阳离子交换层析，通过使用在酸性条件下，0.5～1.0MNaCl进行洗脱获得胰岛素或胰岛素类似物前体。这种方式得到的人胰岛素类似物前体存在的大量无机盐会严重抑制胰蛋酶的活性，往往需要进一步脱盐、加大酶量或延长酶切时间来调控酶切效率。此外，步骤S1利用微生物(如大肠杆菌、毕赤酵母、酿酒酵母等)发酵平台，获得大量的表达本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种胰岛素或胰岛素衍生物前体制备方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、向胰岛素前体蛋白的发酵液中添加蛋白酶；S2、调节所述步骤S1处理后的溶液的pH值和温度使蛋白酶进行酶切，酶切后得到含有胰岛素或胰岛素衍生物前体的溶液。

【技术特征摘要】
1.一种胰岛素或胰岛素衍生物前体制备方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、向胰岛素前体蛋白的发酵液中添加蛋白酶；S2、调节所述步骤S1处理后的溶液的pH值和温度使蛋白酶进行酶切，酶切后得到含有胰岛素或胰岛素衍生物前体的溶液。2.根据权利要求1所述的胰岛素或胰岛素衍生物前体制备方法，其特征在于：所述蛋白酶为赖氨酸酰肽链内切酶。3.根据权利要求2所述的胰岛素或胰岛素衍生物前体制备方法，其特征在于：所述赖氨酸酰肽链内切酶的用量为0.1～10U/g胰岛素前体蛋白；更优选地，所述赖氨酸酰肽链内切酶的用量为0.5～4U/g胰岛素前体蛋白。4.根据权利要求1所述的胰岛素或胰岛素衍生物前体制备方法，其特征在于：所述步骤S2中，所述pH值为8.0～10.0；优选地，所述pH值为9.0～10.0。5.根据权利要求1所述的胰岛素或胰岛素衍生物前体制备方法，其特征在于：所述步骤S2中，所述温度为0～40℃。6.根据权利要求5...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚元锋，张超，刘本达，马文柱，夏玉平，赖红星，肖拥军，罗湘冀，
申请(专利权)人：珠海冀百康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44