The invention provides a novel promoter, which can significantly increase the expression of foreign protein by Pichia pastoris. The promoter can increase the expression of hemicellulase, peroxidase, protease and other enzymes in Pichia pastoris by 76%-320%. The effect is remarkable, which is conducive to greatly reducing the production cost of enzymes and promoting the wide application of enzymes.
【技术实现步骤摘要】
一种提高毕赤酵母外源蛋白表达量的启动子及其应用
本专利技术涉及基因工程
，具体涉及一种提高毕赤酵母蛋白表达量的启动子及其应用。
技术介绍
毕赤酵母表达系统是上世纪80年代初期发展起来的一种新型的外源蛋白表达系统，相对于大肠杆菌表达系统而言，毕赤酵母表达系统具有明显的优越性，诸如：倍增时较短，发酵周期短；基因组简单，便于操作；培养条件相对简单，且易于进行高密度培养，进而可以获得较高的目的蛋白产量；对外源蛋白可以进行折叠、糖基化修饰，形成二硫键等；同时，它还避免了酿酒酵母分泌效率差、表达菌株不够稳定、表达质粒易丢失等缺陷；并且，就糖基化程度而言，毕赤酵母中加到外源蛋白每条侧链的平均长度为8-14个甘露糖残基，较之酿酒酵母每条侧链平均50-150甘露糖残基要短得多，不会产生过度糖基化现象；此外，毕赤酵母其自身分泌的胞外蛋白很少，这对于后期的蛋白纯化非常有利。目前己有许多外源基因在毕赤酵母中成功表达，但也有许多蛋白的表达量并不理想。尽管表达蛋白的产量在很大程度上受其自身遗传特性的影响，但是，充分利用某些影响基因表达和产物稳定性的因素，能够显著增加外源基因的表达量。例...
【技术保护点】
1.一种启动子，其特征在于，所述启动子包含有：核苷酸序列为SEQ ID NO:1的启动子；与a）中的启动子序列相似性不低于90%，且具有a）中启动子功能的启动子。
【技术特征摘要】
1.一种启动子，其特征在于，所述启动子包含有：核苷酸序列为SEQIDNO:1的启动子；与a）中的启动子序列相似性不低于90%，且具有a）中启动子功能的启动子。2.一种表达载体，包含有权利要求1所述的启动子。3.一种外源蛋白表达系统，包含有宿主和表达载体，其特征在于，所述的宿主为毕赤酵母，表达载体为权利要求2所述的表达载体。4.一种表达外源蛋白的方法，包括如下步骤：1）外源基因的克隆；2）利用权利要求2所述的表达载体，构建携带步骤1）所述外源基因的重组表达载体；3）将重组表达载体转化毕赤酵母，获得重组表达外源蛋白的重组菌株。5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的外源蛋白选自半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质素酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、苹果酸酶、β-葡...
【专利技术属性】
技术研发人员：程斯达，康丽华，李宾，黄亦钧，
申请(专利权)人：青岛蔚蓝生物集团有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37
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