一种柑橘黄龙病菌荧光定量分析的内参基因及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种柑橘黄龙病菌荧光定量分析的内参基因及其应用，内参基因为gyrA和ftsZ，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示。本发明专利技术首次筛选出适用于柑橘黄龙病菌感染不同寄主、感染寄主后不同时期时基因表达分析的内参基因组合gyrA和ftsZ，进一步提供了其特异性引物，为柑橘黄龙病菌基因的准确定量检测提供可靠保证，同时可以以此来检测样本是否感染柑橘黄龙病菌。本发明专利技术筛选出的内参基因组合gyrA和ftsZ具有可靠性高、稳定性好和适用性广的优势。利用此内参基因组合构建的对柑橘黄龙病菌的检测方法及检测试剂盒相比单个或传统的内参基因具有巨大的优势，值得大面积推广和应用。

Internal Reference Gene for Quantitative Fluorescence Analysis of Citrus Yellow Dragon Disease and Its Application

The invention discloses an internal reference gene for quantitative fluorescence analysis of Citrus Yellow Dragon fungus and its application. The internal reference genes are gyrA and ftsZ, and their nucleotide sequences are shown as SEQ ID NO.9 and SEQ ID NO.10, respectively. For the first time, gyrA and ftsZ, which are suitable for gene expression analysis of Citrus Yellow Dragon fungus in different host and different period after infection, are screened, and their specific primers are further provided, which can provide reliable guarantee for accurate quantitative detection of Citrus Yellow Dragon fungus genes, and can be used to detect whether samples are infected with Citrus yellow Dragon fungus. The internal reference genome combination gyrA and ftsZ selected by the invention has the advantages of high reliability, good stability and wide applicability. Compared with single or traditional reference genes, the detection kit of Citrus Yellow Dragon pathogen based on the combination of internal reference genes has great advantages, and it is worth popularizing and applying in a large area.

【技术实现步骤摘要】
一种柑橘黄龙病菌荧光定量分析的内参基因及其应用
本专利技术属于分子植物病理学
更具体地，涉及一种柑橘黄龙病菌荧光定量分析的内参基因及其应用。
技术介绍
柑橘黄龙病(CitrusHuanglongbing，HLB)是柑橘生产上最具毁灭性的病害之一，严重制约了我国柑橘产业的发展。目前普遍认为柑橘黄龙病由一种限于韧皮部筛管细胞的革兰氏阴性细菌引起。该细菌属于α-变形菌纲(Proteobacteriacea)的候选韧皮部杆菌属(CandidatusLiberibacterspp.)；根据热敏性和地区可分为耐热型亚洲种(CandidatusLiberibacterasiaticus，CLas)、在巴西发生的美洲种(CandidatusLiberibacteramericanus，CLam)和在南非发生的非洲种(CandidatusLiberibacterafricanus，CLaf)，可感染几乎所有柑橘属植物，且表现出不同的症状。研究表明，黄龙病菌体内与转录调节、运输系统、代谢途径、分泌系统和抗逆性相关的基因在昆虫寄主与植物寄主中的表达存在差异。黄龙病菌基因在不同植物寄主上的表达存在差本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一个柑橘黄龙病菌RT‑qPCR分析的内参基因组合，其特征在于，包括基因

【技术特征摘要】
1.一个柑橘黄龙病菌RT-qPCR分析的内参基因组合，其特征在于，包括基因gyrA和ftsZ，其核苷酸序列分别如SEQIDNO.9和SEQIDNO.10所示。2.权利要求1所述内参基因组合在柑橘黄龙病菌RT-qPCR分析，或制备柑橘黄龙病菌RT-qPCR分析试剂盒中的应用。3.基因gyrA的扩增引物，其特征在于，其核苷酸序列如SEQIDNO.2～3所示。4.基因ftsZ的扩增引物，其特征在于，其核苷酸序列如SEQIDNO.5～6所示。5.基因gyrA的扩增引物和/或基因ftsZ的扩增引物在柑橘黄龙病菌RT-qPCR分析，或制备柑橘黄龙病菌RT-qPCR分析试剂盒中的...

【专利技术属性】
技术研发人员：许美容，郑永钦，郑正，邓晓玲，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：广东,44