臭灵丹和迷迭香提取物在抗Ⅱ型登革病毒药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及臭灵丹和迷迭香提取物在抗Ⅱ型登革病毒药物中的应用。本发明专利技术所述的臭灵丹提取物、迷迭香提取物及其合成物通过细胞病变、Real Time RT‑PCR等一系列实验，对臭灵丹提取物、迷迭香提取物及其合成物的样品进行Ⅱ型登革病毒的体外中和作用和增殖抑制作用检测，臭灵丹提取物、迷迭香提取物及其合成物其活性成份具有抗Ⅱ型登革病毒活性，上述物质具有开发成单方、复方抗Ⅱ型登革病毒药物的前景。

Application of Odorandra and Rosemary Extracts in Anti-Dengue Virus Type II Drugs

The present invention relates to the application of the extracts of Lingdan and Rosemary in anti-dengue virus type II drugs. Through a series of experiments such as cytopathy, Real Time RT_PCR and so on, the extracts of Odorandra, Rosemary and their syntheses were tested for the neutralization and proliferation inhibition of type II dengue virus in vitro. The extracts of Odorandra, Rosemary and their syntheses had active components. It has anti-type II dengue virus activity. The above substances have the prospect of developing unilateral and compound anti-type II dengue virus drugs.

【技术实现步骤摘要】
臭灵丹和迷迭香提取物在抗Ⅱ型登革病毒药物中的应用
本专利技术涉及医药
，具体地说是臭灵丹和迷迭香提取物在抗Ⅱ型登革病毒药物中的应用。技术背景臭灵丹(LaggeraPterodonta(DC.)Benth)为菊科六棱菊属药用植物，别名狮子草、臭叶子、六棱菊等，分布于云南、四川、西藏等地，主产于我国云南省，药源丰富。《云南中草药》、《昆明民间常用草药》及《滇南本草》等大量收载了云南民间使用臭灵丹的经验，该药具有良好的抗菌消炎、清热解毒的作用，被广泛用于治疗感冒、咽喉炎、支气管炎、疟疾等病症。目前已经从该属植物中鉴定的化合物主要为桉烷型倍半萜及黄酮醇类化合物。迷迭香具有镇静安神、醒脑作用，对消化不良和胃痛均有一定疗效。多将其捣碎后，用开水浸泡后饮用，1天2～3次，可起到镇静、利尿作用。也可用于治疗失眠、心悸、头痛、消化不良等多种疾病。外用可治疗外伤和关节炎。还具有强壮心脏、促进代谢、促进末梢血管的血液循环等作用。从植物中发现天然抗病毒药物，是开发抗病毒药物的重要途径。臭灵丹药材资源十分丰富，现已开发成为抗细菌类的咽喉肿痛、肺热咳嗽类药物，但对病毒作用尚无系统基础研究和应用研究。目前未见臭灵丹和迷迭香提取物用于抗Ⅱ型登革病毒的文献报导。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供臭灵丹和迷迭香提取物在抗Ⅱ型登革病毒中的应用，以及所述臭灵丹提取物的提取方法。本专利技术对臭灵丹、迷迭香进行药物活性成分的富集和提取分离，并且进行Ⅱ型登革病毒的体外培养，研究臭灵丹活性成分的抗病毒作用，发扬和利用我国中药的优势和特色，对有效成分的深入药理机理研究，进一步寻找具有生物活性的化合物，研制出疗效确切、副作用小、经济有效和能广泛应用于临床的抗Ⅱ型登革病毒的臭灵丹提取物的应用。同时，提供包括上述成分的抗Ⅱ型登革病毒的组合物。本专利技术的技术方案具体如下：本专利技术涉及的臭灵丹提取物在抗Ⅱ型登革病毒药物中的应用。本专利技术涉及的迷迭香提取物及其合成物在抗Ⅱ型登革病毒药物中的应用。本专利技术涉及的用于抗Ⅱ型登革病毒的组合物，包括如下重量份的原料：臭灵丹提取物8-12克、迷迭香提取物4-8克、柴胡4-8克和连翘4-8克。进一步地，所述的臭灵丹提取物活性成分含以下化合物：3,4-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、4’,5-二羟基-6,7-二甲氧基黄酮、5,6-二羟基-3,4’,7-三甲氧基黄酮、4’,5-二羟基-3,6,7-三甲氧基黄酮、5-羟基-3,3’,4’,6,7-五甲氧基黄酮、4’,5-二羟基-3,3’,6,7-四甲氧基黄酮、3’,5-二羟基-3,4’,6,7-四甲氧基黄酮。进一步地，该药物为片剂、胶囊剂、注射剂、气雾剂、散剂、丸剂、合剂、颗粒剂、冲剂、滴丸剂、膏剂、口服液，或控释、缓释、纳米制剂。本专利技术涉及的臭灵丹提取物的制备方法，包括如下步骤：(1)在臭灵丹药材中加入提取剂，经过冷浸或渗滤、回流加热和超声提取回收溶剂后得到初提物；(2)在初提物中加入初提物2～3倍重量的水，放置2～3小时，水液减压浓缩，加入浓缩物2～3倍量的无水乙醇，放置4～5小时；醇溶液再次重复去除水不溶物，或直接回收溶剂至干得臭灵丹提取物；或者，初提物上大孔树脂柱或活性炭柱，水洗，除去水溶性杂质，再用20％-95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收溶剂至干即可得臭灵丹提取物；或者，初提物溶液通过聚酰胺柱或葡聚糖凝胶柱，依次用水、95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收溶剂至干即可得臭灵丹提取物。进一步地，步骤(1)中，提取剂为乙醇、甲醇、丙酮和乙酸乙酯中的一种，提取剂用量为臭灵丹药材质量的10倍。作为另一实施方式，本专利技术涉及的臭灵丹提取物的制备方法，按以下条件对臭灵丹药材进行超临界方法提取：萃取压力25Mpa，萃取时间3h，温度45℃。作为另一实施方式，本专利技术涉及的臭灵丹提取物的制备方法，将臭灵丹药材在常规条件下水浴加热后，用挥发油提取仪提取得到的挥发性油状液体，即为挥发油。进一步地，迷迭香提取物包括鼠尾草酸；合成物包括乙酰鼠尾草酸、鼠尾草氰和鼠尾草甲胺。迷迭香提取物是从迷迭香药材中用常规方法分离得到的。与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：本专利技术所述的臭灵丹提取物、迷迭香提取物及其合成物通过细胞病变、RealTimeRT-PCR等一系列实验，对臭灵丹提取物、迷迭香提取物及其合成物的样品进行Ⅱ型登革病毒的体外中和作用和增殖抑制作用检测，臭灵丹提取物、迷迭香提取物及其合成物其活性成份具有抗Ⅱ型登革病毒活性，上述物质具有开发成单方、复方抗Ⅱ型登革病毒药物的前景。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过购买获得的常规产品。实施例1本实施例的用于抗Ⅱ型登革病毒的组合物，将臭灵丹提取物配以柴胡、连翘、迷迭香、药用赋形剂组合成药物组合物。各组份的重量份为：臭灵丹提取物8克、迷迭香提取物4克、柴胡4克、连翘4克，以及必要的药用赋形剂(其用量可按现有技术配制)。其中，臭灵丹提取物的提取方法如下：用臭灵丹药材，加入臭灵丹药材10倍重量乙醇、甲醇、丙酮或乙酸乙酯中的一种，用现有的冷浸或渗滤、回流加热、超声提取得到初提物。该初提物按以下方法处理：加初提物2倍重量的水，放置2小时，滤去不溶物叶绿素、树脂状物，水液减压浓缩，加入浓缩物2倍量的无水乙醇，放置4小时，滤除醇不溶物；醇溶液再次重复去除水不溶物，或直接回收溶剂至干得臭灵丹提取物；或者初提物上大孔树脂柱或活性炭柱，水洗，除去水溶性杂质，再用20％-95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收溶剂至干即可得臭灵丹提取物；或者初提物溶液通过聚酰胺柱或葡聚糖凝胶柱，依次用水、95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收溶剂至干即可得臭灵丹提取物。其它药材按照药材配比用乙醇回流提取后加入。臭灵丹提取物活性成分含以下化合物：3,4-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、4’,5-二羟基-6,7-二甲氧基黄酮、5,6-二羟基-3,4’,7-三甲氧基黄酮、4’,5-二羟基-3,6,7-三甲氧基黄酮、5-羟基-3,3’,4’,6,7-五甲氧基黄酮、4’,5-二羟基-3,3’,6,7-四甲氧基黄酮、3’,5-二羟基-3,4’,6,7-四甲氧基黄酮。以上化合物可以采用以下方法分离得到：取上述方法得到的臭灵丹提取物用硅胶柱色谱分离，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱(10～0：1)，得到1～70的组份；第10段组份用C18柱色谱分离，以甲醇-0.1％甲酸梯度洗脱，其它组份用硅胶柱分离，以氯仿洗脱，得到上述各化合物。将上述臭灵丹提取物按现有技术的方法加药用赋形剂，制成片剂、胶囊剂、注射剂、气雾剂、散剂、丸剂、合剂、颗粒剂、冲剂、滴丸剂、膏剂、口服液，或控释、缓释、纳米制剂。迷迭香提取物是从迷迭香药材中用常规方法分离得到的。迷迭香A61提取物包括鼠尾草酸，鼠尾草酸含量为20％。实施例2本实施例的用于抗Ⅱ型登革病毒的组合物，将臭灵丹提取物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.臭灵丹提取物在抗Ⅱ型登革病毒药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.臭灵丹提取物在抗Ⅱ型登革病毒药物中的应用。2.迷迭香提取物及其合成物在抗Ⅱ型登革病毒药物中的应用。3.一种用于抗Ⅱ型登革病毒的组合物，其特征在于：包括如下重量份的原料：臭灵丹提取物8-12克、迷迭香提取物4-8克、柴胡4-8克和连翘4-8克。4.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于：所述的臭灵丹提取物活性成分含以下化合物：3,4-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、4’,5-二羟基-6,7-二甲氧基黄酮、5,6-二羟基-3,4’,7-三甲氧基黄酮、4’,5-二羟基-3,6,7-三甲氧基黄酮、5-羟基-3,3’,4’,6,7-五甲氧基黄酮、4’,5-二羟基-3,3’,6,7-四甲氧基黄酮、3’,5-二羟基-3,4’,6,7-四甲氧基黄酮。5.权利要求2或3所述的组合物在制备抗Ⅱ型登革病毒药物中的应用，其特征在于：该药物为片剂、胶囊剂、注射剂、气雾剂、散剂、丸剂、合剂、颗粒剂、冲剂、滴丸剂、膏剂、口服液，或控释、缓释、纳米制剂。6.权利要求1所述的臭灵丹提取物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）在臭灵丹药材中加入提取剂，经过冷浸或渗滤、回流加...

【专利技术属性】
技术研发人员：张荣平，王新华，罗晓东，赵昱，刘绍兴，于浩飞，王玉涛，张恒罡，秦琳，胡炜彦，张兰春，
申请(专利权)人：昆明医科大学，
类型：发明
国别省市：云南,53