The invention provides a lipase and its coding gene, a vector containing the coding gene, an engineering bacterium and its application. The amino acid sequence of the lipase is shown as SEQ ID NO.1 and the coding gene is shown as SEQ ID NO.2. The lipase gene of the invention can be connected with the expression vector to construct the intracellular expression recombinant plasmid containing the gene, and then transformed into E. coli strains to obtain recombinant E. coli. The recombinant E. coli can be separated and purified by cell fragmentation to obtain recombinant lipase. The recombinant lipase has the ability to catalyze the resolution of (R, S) methyl mandelic acid ester and can produce (R) methyl mandelic acid ester.
【技术实现步骤摘要】
一种脂肪酶在拆分(R,S)-扁桃酸甲酯中的应用(一)
本专利技术属于生物催化
，涉及一种脂肪酶及其编码基因，含有该编码基因的载体、工程菌，及通过该脂酶立体选择性催化水解拆分(R,S)-扁桃酸甲酯对映体合成单一构型的(R)-扁桃酸甲酯对映体的应用。(二)
技术介绍
手性是自然界的本质属性之一，构成生命有机体的分子都具有手性的特征。具有手性中心的药物的单一对映体可能具有不同的药理作用。外消旋扁桃酸、单一对映体扁桃酸及他们的衍生物都是重要的医药原料和医药中间体。(R)-扁桃酸及(S)-扁桃酸是重要的拆分介质，R-扁桃酸是制备多种手性药物的重要中间体，如用于半合成青霉素和头孢菌素等抗生素、血管扩张剂、杀菌剂、镇痉剂、减肥药物、抗肿瘤药物等的合成。R-扁桃酸的国际市场需求逐年增长，市场潜力巨大，加快R-扁桃酸的研究开发具有重要的意义。制备单一对映体扁桃酸的方法有：化学拆分法和生物酶法。化学拆分难度大，费用高，生物酶法涉及脂肪酶和脱氢酶，且生物酶法的反应条件温和，副作用少，对环境污染少，效率高。所以，本实验对(R,S)-扁桃酸甲酯对映体进行有效的手性拆分的研究具有重要的...
【技术保护点】
1.一种脂肪酶在拆分(R,S)‑扁桃酸甲酯中的应用，其特征在于所述脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
【技术特征摘要】
1.一种脂肪酶在拆分(R,S)-扁桃酸甲酯中的应用，其特征在于所述脂肪酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述脂肪酶编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述应用的方法为：以含脂肪酶编码基因的工程菌经发酵培养获得的湿菌体冻干后的粗酶为催化剂，以(R,S)-扁桃酸甲酯为底物，以pH7.0缓冲液为反应介质，在20-45℃、800rpm条件下进行拆分反应，反应完全后，将反应液分离纯化，获得(R)-扁桃酸甲酯。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述催化剂用量以缓冲液体积计为10g/L，所述底物终浓度以缓冲液体积计为5-20g/L。5.如权利要求3所述的应用，其特征在于反应时间为20-120min。6.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述反应条件为35℃、...
【专利技术属性】
技术研发人员：郑建永，吴鹏，章银军，汪钊，孙杰，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33
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