一种用于检测糖尿病尿液中DNA的提取方法技术

本发明专利技术公开了一种用于检测糖尿病尿液中DNA的提取方法，包括以下步骤，S1，分子标志物标记：取用糖尿病患者尿液，通过生物荧光剂对尿液中的分子标志物，红细胞和白细胞进行染色；S2，分子标志物检测：利用缓冲等张液鞘液的水动力聚集功能及流式细胞计数池的层压进行检测，可实现有形成分以尽量平铺不重叠的方式，最大剖面朝向显微镜镜头进行图像捕捉，S3，分子标志物分隔：通过流式细胞仪的自动粒子识别功能对图像中的有形成分进行分隔、特征分析及自动分类。本发明专利技术对DNA检测通过生物荧光蛋白结合红细胞和白细胞标记为分子标志物，通过流式细胞计对分子标志物捕捉分类，通过离心提取检测DNA含量分析推断出分子标志物的含量。

A Method for DNA Extraction from Diabetic Urine

The invention discloses an extraction method for detecting DNA in diabetic urine, which includes the following steps: taking urine of diabetic patients, dyeing molecular markers, red blood cells and white blood cells in urine by biofluorescent agent; S2, detection of molecular markers: utilizing hydrodynamic aggregation function of buffer isotonic sheath and flow cell counting cell pool. The laminar pressure can be detected in a flat and non-overlapping way. The maximum section is directed towards the microscope lens for image capture, S3, molecular marker separation. The formed components in the image are separated, analyzed and classified automatically by the automatic particle recognition function of flow cytometer. The method uses biofluorescent protein binding red blood cells and white blood cells as molecular markers for DNA detection, captures and classifies molecular markers by flow cytometry, and deduces the content of molecular markers by centrifugal extraction and detection of DNA content analysis.

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测糖尿病尿液中DNA的提取方法
本专利技术涉及糖尿病
，尤其涉及一种用于检测糖尿病尿液中DNA的提取方法。
技术介绍
糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病，高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损，或两者兼有引起，糖尿病时长期存在的高血糖，导致各种组织，特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍，其中并发炎症可能导致尿液中一些物质多于常见指标，现有对检测糖尿病中的分子标志物的DNA提取办法，从而确定尿液中一些指标，市场没有很好的实施方法，是检测糖尿病指标中的一个缺陷。
技术实现思路
基于
技术介绍
存在的技术问题，本专利技术提出了一种用于检测糖尿病尿液中DNA的提取方法。本专利技术提出的一种用于检测糖尿病尿液中DNA的提取方法，包括以下步骤：S1：分子标志物标记：取用糖尿病患者尿液，通过生物荧光剂对尿液中的分子标志物，红细胞和白细胞进行染色；S2：分子标志物检测：利用缓冲等张液鞘液的水动力聚集功能及流式细胞计数池的层压进行检测，可实现有形成分以尽量平铺不重叠的方式，最大剖面朝向显微镜镜头进行图像捕捉；S3：分子标志物分隔：通过流式细胞仪的自动粒子识别(APR)功本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测糖尿病尿液中DNA的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：分子标志物标记：取用糖尿病患者尿液，通过生物荧光剂对尿液中的分子标志物，红细胞和白细胞进行染色；S2：分子标志物检测：利用缓冲等张液鞘液的水动力聚集功能及流式细胞计数池的层压进行检测，可实现有形成分以尽量平铺不重叠的方式，最大剖面朝向显微镜镜头进行图像捕捉；S3：分子标志物分隔：通过流式细胞仪的自动粒子识别(APR)功能对图像中的有形成分进行分隔、特征分析及自动分类，对荧光标记的分子标志物的部分尿液进行提取区分；S4：离心提取分子标志物：采用尿液样本10ml左右，5000转离心10min,收集底部的沉淀a1，用枪小心...

【技术特征摘要】
1.一种用于检测糖尿病尿液中DNA的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：分子标志物标记：取用糖尿病患者尿液，通过生物荧光剂对尿液中的分子标志物，红细胞和白细胞进行染色；S2：分子标志物检测：利用缓冲等张液鞘液的水动力聚集功能及流式细胞计数池的层压进行检测，可实现有形成分以尽量平铺不重叠的方式，最大剖面朝向显微镜镜头进行图像捕捉；S3：分子标志物分隔：通过流式细胞仪的自动粒子识别(APR)功能对图像中的有形成分进行分隔、特征分析及自动分类，对荧光标记的分子标志物的部分尿液进行提取区分；S4：离心提取分子标志物：采用尿液样本10ml左右，5000转离心10min,收集底部的沉淀a1，用枪小心吸走上方的液体，底部仍保留部分液体b1；S5：对分子标志物中DNA提取：对b1溶液中加入TE缓冲液1.5ml，混匀，8000转,离心5min,收集沉淀，重复上述步骤一次，加入450ul裂解液,10ul蛋白酶K，55度水浴1小时，接下来可以用分氯仿的方法进行抽提；...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵春艳，
申请(专利权)人：川北医学院，
类型：发明
国别省市：四川,51