抗人PDL1抗体及其用途制造技术

本申请公开了结合人PDL1的抗体或其抗原结合部分，编码所述抗体或其抗原结合部分的多核苷酸、包含所述多核苷酸的载体、包含所述多核苷酸或载体的宿主细胞、制备和纯化该抗体的方法及所述抗体或其抗原结合部分的应用。

【技术实现步骤摘要】
抗人PDL1抗体及其用途
本申请大体涉及基因工程和抗体药物领域；具体而言，涉及抗人PDL1抗体领域及其用途。本申请开发了新的抗人PDL1抗体，并提供了该抗体在预防或治疗PDL1介导的疾病中的用途。
技术介绍
T细胞通过抗原特异性T细胞受体接受抗原递呈细胞呈递的抗原，启动激活过程，进而增殖分化为抗原特异性效应T细胞。抗原与T细胞受体的作用是T细胞激活的初级信号，决定了免疫反应的特异性，同时T细胞还需要T细胞和抗原递呈细胞之间的二级信号(即共刺激信号)来调节免疫反应水平或实现对自身抗原的耐受。通过抗原递呈细胞表面分子和T细胞表达的特异性受体传递共刺激信号(包括激活信号和抑制信号)。B7-1/B7-2-CD28/CTLA4通路是研究较多的共刺激信号通路，对T细胞激活或耐受具有重要作用，其中CD28共刺激信号介导T细胞激活，CTLA4免疫检查点介导T细胞抑制，二者之间存在精妙平衡。PDL1-PD1是一条抑制活性通路，该通路强化了免疫检查点维持自身耐受的作用。对于肿瘤免疫而言，CTLA-4信号在淋巴结T细胞反应早期调节T细胞活性，而PD1则是在肿瘤生长后期限制肿瘤微环境中的T细胞活性，一些恶性肿瘤细胞通过高表达共抑制配体PDL1，使得肿瘤微环境中的肿瘤浸润淋巴细胞失能。PDL1也被称为B7-H1，与B7-1/B7-2是同源分子，但不与ICOS、CD28或CTLA4作用。PDL1表达于B细胞、T细胞、巨噬细胞、树突细胞和肥大细胞等免疫细胞上，也在胰岛细胞、肝Kupffer细胞、血管内皮细胞和一些上皮细胞等非免疫细胞上表达，并且在多种恶性实体肿瘤和血液肿瘤的癌细胞或肿瘤微环境免疫细胞中表达上调。40％-100％的黑色素瘤、35％-95％的NSCLC、68％-100％的鼻咽癌以及17％-94％的淋巴瘤患者高表达PDL1。PDL1属于B7家族蛋白，是一种53kD的I型跨膜糖蛋白，胞外区有IgV和IgC结构域，胞内区有30个氨基酸残基，没有明显的信号结构域，但存在一个蛋白激酶C磷酸化位点。PD1是免疫球蛋白超家族I型跨膜糖蛋白，全长288个氨基酸残基，N端是单一的IgV样结构域，约20个氨基酸残基的茎结构将IgV结构与细胞膜隔开，C端是跨膜区和胞内区。PD1与CD28、ICOS和CTLA-4同源性高，胞外区结构相似，属于CD28家族成员，但CD28、CTLA-4和ICOS的胞内区有src同源结构域(SH2)结合基序(YxxM)，而PD1胞内区有两个活性结构域，靠近N端的序列(VDYGEL)构成免疫受体酪氨酸抑制基序(immunoreceptortyrosine-basedinhibitionmotif,ITIM)，通过其募集含SH2的磷酸酶；靠近C端的序列TEYATI构成免疫受体酪氨酸开关基序(immunoreceptortyrosinebasedswitchmotif,ITSM)，执行PD1的抑制功能。PD1与CD28家族成员的另一个区别是细胞表面的CD28、CTLA-4和ICOS是二聚体，而PD1以单体形式存在。PD1表达于树突细胞(DC)、B细胞、激活的T细胞(CD4+和CD8+)以及自然杀伤细胞(NK)。C57BL/6小鼠缺失PD1导致慢性进行性狼疮样肾小球肾炎和关节炎；Balb/c小鼠缺失PD1导致严重的扩张型心肌病、胃炎、高水平血清肌钙蛋白IgG1等自身免疫疾病。PD1通过ITSM结构域与T细胞受体临近的含SHP-2结构域的蛋白酪氨酸激酶作用，抑制T细胞受体临近激酶的激活，导致Lck介导的TCRCD3ζ链磷酸化下调，抑制T细胞受体下游阳性信号分子PI3K/Akt激活。PDL1/PD1对另一个重要的信号途径Ras/MEK/Erk通路也有抑制作用。通过对以上信号通路的抑制，PDL1/PD1抑制T细胞增殖，降低炎性细胞因子IFNγ和IL2等的分泌。因此，PDL1/PD1信号负向调节T细胞反应，在免疫系统中具有至关重要的作用。肿瘤细胞表面表达PDL1有助于促进肿瘤浸润淋巴细胞耗竭和失能，刺激向肿瘤微环境中分泌免疫抑制细胞因子，刺激Treg细胞功能，保护肿瘤细胞不被特异的细胞毒T细胞裂解，逃逸免疫反应。基于临床需求，探索和研发可以抑制PDL1分子的功能，通过提高T细胞活性治疗疾病特别是肿瘤的药物具有重要的生物学和医学意义。专利技术概述第一方面，本申请提供了一种结合人PDL1的抗体，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列的重链可变区和含LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列的轻链可变区，其中所述HCDR1氨基酸序列为GFNFTDS，所述HCDR2氨基酸序列为SPYGGS，所述HCDR3氨基酸序列为RHWPGGFNF，所述LCDR1氨基酸序列为RASQDIHNWLN，所述LCDR2氨基酸序列为GASTLQS，所述LCDR3氨基酸序列为QQGHSTPPT；或者所述HCDR1氨基酸序列为GFTFSDS，所述HCDR2氨基酸序列为SPFGGS，所述HCDR3氨基酸序列为RHWPGGFDF，所述LCDR1氨基酸序列为RASQDIHNWLN，所述LCDR2氨基酸序列为GASTLQS，所述LCDR3氨基酸序列为QQGHSTPPT；或者所述HCDR1氨基酸序列为GFNFTDS，所述HCDR2氨基酸序列为SPYGGS，所述HCDR3氨基酸序列为RHWPGGFNF，所述LCDR1氨基酸序列为RASQNVRNYLN，所述LCDR2氨基酸序列为SASSRPS，所述LCDR3氨基酸序列为QQEWHVPMT；或者所述HCDR1氨基酸序列为GFTFSDS，所述HCDR2氨基酸序列为SPFGGS，所述HCDR3氨基酸序列为RHWPGGFDF，所述LCDR1氨基酸序列为RASQNVRNYLN，所述LCDR2氨基酸序列为SASSRPS，所述LCDR3氨基酸序列为QQEWHVPMT；其中HCDR和LCDR氨基酸序列根据Chothia定义。在一些实施方案中，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO:17或者18所示。在一些实施方案中，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO:19或者20所示。在一些实施方案中，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO:17所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO:19所示；或者所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO:17所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO:20所示；或者所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO:18所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO:19所示；或者所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO:18所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO:20所示。第二方面，本申请提供了一种结合人PDL1的抗体，其中所述抗体的重链可变区的氨基酸序列与SEQIDNO:17或者18中任何一项具有至少90％的一致性，并且所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列与SEQIDNO:19或者20中任何一项具有至少90％的一致性。在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体为单克隆抗体。在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体为全抗体、Fab片段、F(ab’)2片段或单链Fv片段(scFv)。在第本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种结合人PDL1的抗体，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列的重链可变区和含LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列的轻链可变区，其中所述HCDR1氨基酸序列为GFNFTDS，所述HCDR2氨基酸序列为SPYGGS，所述HCDR3氨基酸序列为RHWPGGFNF，所述LCDR1氨基酸序列为RASQDIHNWLN，所述LCDR2氨基酸序列为GASTLQS，所述LCDR3氨基酸序列为QQGHSTPPT；或者所述HCDR1氨基酸序列为GFTFSDS，所述HCDR2氨基酸序列为SPFGGS，所述HCDR3氨基酸序列为RHWPGGFDF，所述LCDR1氨基酸序列为RASQDIHNWLN，所述LCDR2氨基酸序列为GASTLQS，所述LCDR3氨基酸序列为QQGHSTPPT；或者所述HCDR1氨基酸序列为GFNFTDS，所述HCDR2氨基酸序列为SPYGGS，所述HCDR3氨基酸序列为RHWPGGFNF，所述LCDR1氨基酸序列为RASQNVRNYLN，所述LCDR2氨基酸序列为SASSRPS，所述LCDR3氨基酸序列为QQEWHVPMT；或者所述HCDR1氨基酸序列为GFTFSDS，所述HCDR2氨基酸序列为SPFGGS，所述HCDR3氨基酸序列为RHWPGGFDF，所述LCDR1氨基酸序列为RASQNVRNYLN，所述LCDR2氨基酸序列为SASSRPS，所述LCDR3氨基酸序列为QQEWHVPMT；其中HCDR和LCDR氨基酸序列根据Chothia定义。...

【技术特征摘要】
1.一种结合人PDL1的抗体，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列的重链可变区和含LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列的轻链可变区，其中所述HCDR1氨基酸序列为GFNFTDS，所述HCDR2氨基酸序列为SPYGGS，所述HCDR3氨基酸序列为RHWPGGFNF，所述LCDR1氨基酸序列为RASQDIHNWLN，所述LCDR2氨基酸序列为GASTLQS，所述LCDR3氨基酸序列为QQGHSTPPT；或者所述HCDR1氨基酸序列为GFTFSDS，所述HCDR2氨基酸序列为SPFGGS，所述HCDR3氨基酸序列为RHWPGGFDF，所述LCDR1氨基酸序列为RASQDIHNWLN，所述LCDR2氨基酸序列为GASTLQS，所述LCDR3氨基酸序列为QQGHSTPPT；或者所述HCDR1氨基酸序列为GFNFTDS，所述HCDR2氨基酸序列为SPYGGS，所述HCDR3氨基酸序列为RHWPGGFNF，所述LCDR1氨基酸序列为RASQNVRNYLN，所述LCDR2氨基酸序列为SASSRPS，所述LCDR3氨基酸序列为QQEWHVPMT；或者所述HCDR1氨基酸序列为GFTFSDS，所述HCDR2氨基酸序列为SPFGGS，所述HCDR3氨基酸序列为RHWPGGFDF，所述LCDR1氨基酸序列为RASQNVRNYLN，所述LCDR2氨基酸序列为SASSRPS，所述LCDR3氨基酸序列为QQEWHVPMT；其中HCDR和LCDR氨基酸序列根据Chothia定义。2.根据权利要求1所述的抗体，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO:17或者18所示。3.根据权利要求1所述的抗体，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO:19或者20所示。4.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体的重链可...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘志刚，
申请(专利权)人：北京百特美博生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11