一种甲壳素脱乙酰酶及其应用制造技术

技术编号:20857522 阅读:284 留言:0更新日期:2019-04-13 11:19
本发明专利技术通过对不同物种的不同基因组序列进行分析研究,筛选得出了若干未知蛋白,并进一步从中鉴定出了具有出色脱乙酰酶活性的甲壳素脱乙酰酶,更具体而言,本发明专利技术涉及一种来源于油菜黄萎菌(Verticillium longisporum)Vlo的甲壳素脱乙酰酶,与已经报道的甲壳素脱乙酰酶相比,该甲壳素脱乙酰酶对生产条件要求较低,具有较高的生物安全性,并且具有更适合工业化应用的特性,表现出广泛的应用潜力。

【技术实现步骤摘要】
一种甲壳素脱乙酰酶及其应用
本专利技术属于基因工程
,具体涉及一种来源于油菜黄萎菌(Verticilliumlongisporum)VL1的甲壳素脱乙酰酶及其应用。
技术介绍
甲壳素又名几丁质,是由N-乙酰氨基-D-葡萄糖单体(D-GlcNAc)通过β-1,4糖苷键连接而成的直链高分子氨基多糖,主要存在于无脊椎动物(特别是虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳)、海藻(如绿藻)、真菌(如霉菌)等中,是除纤维素以外的又一大类重要的多糖。然而,甲壳素不溶于水、稀酸、碱、乙醇或其它有机溶剂,所以大大限制了其利用价值,而其脱去乙酰基后的产物壳聚糖取决于脱乙酰度不同,可以溶于酸及中性水溶液。由于壳聚糖具有生物官能性和相容性、血液相容性、安全性、微生物降解性等优良特性,因此在医药、食品、化工、化妆品、水处理、金属提取及回收、生化和生物医学工程等诸多领域得到了广泛应用(KaurandDhillon2014)。目前,生产壳聚糖主要采用的浓碱热解法(40%以上的氢氧化钠)存在诸多问题,如反应时间长、能耗大、产品质量(主要是指平均分子质量和脱乙酰度)不稳定,并会造成严重的环境污染问题。甲壳素脱乙酰酶(Ch本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种来源于油菜黄萎菌(Verticillium longisporum)VL1的甲壳素脱乙酰酶,所述甲壳素脱乙酰酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

【技术特征摘要】
1.一种来源于油菜黄萎菌(Verticilliumlongisporum)VL1的甲壳素脱乙酰酶,所述甲壳素脱乙酰酶的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。2.编码如权利要求1所述的甲壳素脱乙酰酶的DNA分子,优选地,所述DNA分子的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示。3.如权利要求2所述的DNA分子,其特征在于,所述DNA分子进一步在其3’端连接有编码六聚组氨酸标签的核苷酸序列。4.包含如权利要求2或3所述的DNA分子的表达载体,优选地,所述表达载体为pET24a(+)或pHThis。5.导入如权利要求4所述的表达载体的转化细胞,优选地,所述转化细胞为大肠杆菌转化细胞或枯草芽孢杆菌转化细胞;更优选地,所述转化细胞为大肠杆菌Transetta(DE3)细胞或枯草芽孢杆菌1012细胞。6.包含选自于如下物质中的一种或多种的试剂盒:如权利要求1所述的甲壳素脱乙酰酶;如权利要求2或3所述的DNA分子;如权利要求4所述的表达载体;以及如权利要求5所述的转化细胞。7.制备如权利要求1所述的甲壳素脱乙酰酶的方法,所述方法包括如下步骤:在培养基中培养如权利要求5所述的转化细胞;以及收...

【专利技术属性】
技术研发人员:佟毅沈雪梅王靖张媛刘颖慰王小艳陈博彭超李义周勇卢宗梅满云
申请(专利权)人:吉林中粮生化有限公司中粮营养健康研究院有限公司中粮生物化学安徽股份有限公司
类型:发明
国别省市:吉林,22

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