【技术实现步骤摘要】
一种甲壳素脱乙酰酶及其应用
本专利技术属于基因工程
,具体涉及一种来源于油菜黄萎菌(Verticilliumlongisporum)VL1的甲壳素脱乙酰酶及其应用。
技术介绍
甲壳素又名几丁质,是由N-乙酰氨基-D-葡萄糖单体(D-GlcNAc)通过β-1,4糖苷键连接而成的直链高分子氨基多糖,主要存在于无脊椎动物(特别是虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳)、海藻(如绿藻)、真菌(如霉菌)等中,是除纤维素以外的又一大类重要的多糖。然而,甲壳素不溶于水、稀酸、碱、乙醇或其它有机溶剂,所以大大限制了其利用价值,而其脱去乙酰基后的产物壳聚糖取决于脱乙酰度不同,可以溶于酸及中性水溶液。由于壳聚糖具有生物官能性和相容性、血液相容性、安全性、微生物降解性等优良特性,因此在医药、食品、化工、化妆品、水处理、金属提取及回收、生化和生物医学工程等诸多领域得到了广泛应用(KaurandDhillon2014)。目前,生产壳聚糖主要采用的浓碱热解法(40%以上的氢氧化钠)存在诸多问题,如反应时间长、能耗大、产品质量(主要是指平均分子质量和脱乙酰度)不稳定,并会造成严重的环境污染问题。 ...
【技术保护点】
1.一种来源于油菜黄萎菌(Verticillium longisporum)VL1的甲壳素脱乙酰酶,所述甲壳素脱乙酰酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
【技术特征摘要】
1.一种来源于油菜黄萎菌(Verticilliumlongisporum)VL1的甲壳素脱乙酰酶,所述甲壳素脱乙酰酶的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。2.编码如权利要求1所述的甲壳素脱乙酰酶的DNA分子,优选地,所述DNA分子的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示。3.如权利要求2所述的DNA分子,其特征在于,所述DNA分子进一步在其3’端连接有编码六聚组氨酸标签的核苷酸序列。4.包含如权利要求2或3所述的DNA分子的表达载体,优选地,所述表达载体为pET24a(+)或pHThis。5.导入如权利要求4所述的表达载体的转化细胞,优选地,所述转化细胞为大肠杆菌转化细胞或枯草芽孢杆菌转化细胞;更优选地,所述转化细胞为大肠杆菌Transetta(DE3)细胞或枯草芽孢杆菌1012细胞。6.包含选自于如下物质中的一种或多种的试剂盒:如权利要求1所述的甲壳素脱乙酰酶;如权利要求2或3所述的DNA分子;如权利要求4所述的表达载体;以及如权利要求5所述的转化细胞。7.制备如权利要求1所述的甲壳素脱乙酰酶的方法,所述方法包括如下步骤:在培养基中培养如权利要求5所述的转化细胞;以及收...
【专利技术属性】
技术研发人员:佟毅,沈雪梅,王靖,张媛,刘颖慰,王小艳,陈博,彭超,李义,周勇,卢宗梅,满云,
申请(专利权)人:吉林中粮生化有限公司,中粮营养健康研究院有限公司,中粮生物化学安徽股份有限公司,
类型:发明
国别省市:吉林,22
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